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植物生物技术花天狂骨精简版

来源：花匠小妙招时间：2024-11-11 02:04

植物生物技术总结

胞质杂种（Cybrid）含双亲一方的核遗传物质和双方的胞质遗传物质，非对称杂种。

植物基因工程（Plant Genetic Engineering）：又称植物遗传转化，是将外源基因转移到植物细胞内，并稳定地整合、表达与遗传的技术。目的是改变植物性状，培育高产、优质、抗逆新品种/系；或者利用转基因植物/细胞来生产外源基因的表达产物。

Ti plasmid根癌农杆菌Ti质粒Ti质粒：160 - 240 kb, 大型环状双链DNA分子。

T-DNA根癌农杆菌Ti质粒中一段可转移的DNA，插入基因引起突变。

目的基因target gene要进行分离表达抑制和/或突变等研究的特定基因或DNA 片段均称为。共整合载体系统由卸甲载体与中间载体构建物而成的一元载体系统

双元载体系统/binary vector system 有两个独立的质粒的构建成的双元载体体统

分子标记/molecular marker是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性DNA 片段，是DNA水平遗传多态性的直接反映、理想的遗传标记。

RFLP标记限制性片段长度多态性

RAPD随机扩增多态性DNA。

AFLP 扩增片段长度多态性，RFLP与PCR相结合的产物。

SSR简单序列重复，也称微卫星DNA真核基因组中普遍存在，随机分布，主要位于非编码区；重复单元1~6bp，串联重复10~60次，多态性主要来自串联重复次数的不同。

SNP单核苷酸多态性，指不同基因组DNA中某一特定位置上单个核苷酸的差异包括单碱基的转换颠换插入和缺失等，而且其在群体中出现的频率大于1%分布于编码区与非编码区。常用培养基的种类和特点1. MS：无机盐/离子浓度较高，且较平衡，广泛应用2. B5：含较低的铵（常抑制生长），适合于双子叶特别是木本植物。3. White：无机盐含量较低，适于生根培养。4. N6 ：成分较简单，KNO3 和(NH4)2 SO4 含量高，用于花药培养。5. KM-8P：有机成分复杂，包括多种单糖和维生素，用于原生质体培养。

灭菌方法及用途 1. 物理灭菌1.1 高压高温蒸气灭菌（培养基、器皿、用具）：常用。在1 atm/cm2 (0.1Mpa)的压力下，锅内温度达121℃，持续约20min，可杀死各种微生物的营养体及其孢子。1.2 灼烧灭菌（金属器械）1.3 过滤除菌（不耐热物品）1.4 干热灭菌（玻璃器皿及耐热用具）：不推荐。1.5 紫外线照射灭菌（接种室、超净台用）

2.化学灭菌2.1消毒剂灭菌：常用氯化汞、次氯酸钠、次氯酸钙、70% 酒精。2.2熏蒸灭菌。激素作用的模式：生长素/细胞分裂素的比值决定再分化的方向，该值低可促进芽的分化，而该值高有利于根的分化。

培养基的成分：培养基=水+无机＋有机＋激素＋固化剂＋其它

1. 水：蒸馏水、自来水

2. 无机盐

3. 有机化合物1）糖：常用蔗糖。2）维生素3）肌醇。4）氨基酸及有机添加物5）天然复合物

4. 植物生长调节物2）细胞分裂素类

5. 固化剂：琼脂外植体灭菌无菌苗可直接切取外植体和接种。带菌材料需消毒灭菌，再切取外植体进行接种。灭菌步骤：取材切割—自来水冲洗（几分钟至数小时））—70%酒精20~60 sec（浸湿表面）—无菌水冲洗—灭菌剂处理—无菌水冲洗—切取外植体—接种。

3. 接种将灭过菌的材料剪切适当大小：叶片0.5cm2，茎段0.5cm长，茎尖0.2~0.3mm 大小，接种于培养基，封口，标名称、日期等，在适宜条件下培养。

1）愈伤组织的诱导分哪几个时期？各时期的特点是什么？

1. 愈伤组织的诱导：分3个阶段1起动期/诱导期：外植体细胞在外源激素作用下，经脱分化而恢复分裂状态，开始形成愈伤。特点：细胞外观无明显变化，代谢旺盛，合成加强，为分裂做准备2分裂期：外植体切口边缘膨大，外层细胞迅速分裂，体积变小，具分生细胞特征，细胞数速增3形成期：外植体表层细胞分裂减缓，内部细胞开始分裂，大量细胞形成瘤状/泡状或片状结构。若不及时继代，将分化出拟分生组织瘤状物和维管组织，又称分化期。愈伤组织的形态特征质地：松脆易碎的颗粒状；紧密坚实的结块状；水渍或浆糊状。颜色：