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半夏大豆花叶病毒分离株感染性克隆的构建与鉴定,Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology

来源：花匠小妙招时间：2024-11-10 21:24

半夏大豆花叶病毒分离株感染性克隆的构建与鉴定
Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology Pub Date : 2020-05-25 , DOI: 10.13345/j.cjb.190439
Li Zhang 1 , Defu Wang 1 , Yanni Pei 1 , Shen Xian 1 , Yanbing Niu 1

大豆花叶病毒（SMV）是半夏（半夏）的主要病毒性疾病之一，对其产量和质量产生了严重影响。病毒感染性克隆的构建是进行病毒基因功能以及病毒与宿主之间相互作用的反向遗传学研究的有力工具。为了阐明半夏SMV感染的分子机制，构建SMV全长cDNA感染性克隆尤为重要。因此，本研究利用吉布森体外重组系统构建了大豆花叶病毒山西半夏分离株（SMV-SXBX）的感染性克隆，农杆菌浸润，机械传代和RT-PCR进一步接种了健康的半夏叶片。，确认3' 当SMV-SXBX感染性克隆的末端含有56-nt的poly（A）尾巴时，它具有稳定的感染性。该方法不仅方便高效，而且避免了大肠杆菌中SMV感染性克隆的不稳定性。SMV全长感染性cDNA克隆的构建为进一步研究SMV复制和发病机理提供了基础。大豆花叶病毒（大豆花叶病毒，SMV）作为半夏（Pinellia ternata（Thunb。）Breit。）主要病毒病害之一，已造成作物和品质造成严重影响。学研究病毒基因功能，病毒与宿主相互作用的有力工具，为明确SMV侵染半夏的分子机制，进行SMV转化cDNA侵染性克隆的构建特别重要。因此文中利用Gibson体外重组系统对大豆花叶病毒山西半夏分离物（SMV-SXBX）侵染性克隆进行组装，通过农杆菌浸润法植入健康半夏；进一步通过机械传代，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）证实SMV- SXBX侵染性克隆3'末端含有多聚体（A）尾56 nt时具有稳定侵染性。该方法便捷，高效，且避免了SMV侵染性克隆在结肠中的寄生虫问题。染性cDNA克隆的重建，为进一步研究SMV复制和发病的分子机制破坏了基础。该方法不仅方便高效，而且避免了大肠杆菌中SMV感染性克隆的不稳定性。SMV全长感染性cDNA克隆的构建为进一步研究SMV复制和发病机理提供了基础。大豆花叶病毒（大豆花叶病毒，SMV）作为半夏（Pinellia ternata（Thunb。）Breit。）主要病毒病害之一，已造成作物和品质造成严重影响。学研究病毒基因功能，病毒与宿主相互作用的有力工具，为明确SMV侵染半夏的分子机制，进行SMV转化cDNA侵染性克隆的构建特别重要。因此文中利用Gibson体外重组系统对大豆花叶病毒山西半夏分离物（SMV-SXBX）侵染性克隆进行组装，通过农杆菌浸润法植入健康半夏；进一步通过机械传代，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）证实SMV- SXBX侵染性克隆3'末端含有多聚体（A）尾56 nt时具有稳定侵染性。该方法便捷，高效，且避免了SMV侵染性克隆在结肠中的寄生虫问题。染性cDNA克隆的重建，为进一步研究SMV复制和发病的分子机制破坏了基础。该方法不仅方便高效，而且避免了大肠杆菌中SMV感染性克隆的不稳定性。SMV全长感染性cDNA克隆的构建为进一步研究SMV复制和发病机理提供了基础。大豆花叶病毒（大豆花叶病毒，SMV）作为半夏（Pinellia ternata（Thunb。）Breit。）主要病毒病害之一，已造成作物和品质造成严重影响。学研究病毒基因功能，病毒与宿主相互作用的有力工具，为明确SMV侵染半夏的分子机制，进行SMV转化cDNA侵染性克隆的构建特别重要。因此文中利用Gibson体外重组系统对大豆花叶病毒山西半夏分离物（SMV-SXBX）侵染性克隆进行组装，通过农杆菌浸润法植入健康半夏；进一步通过机械传代，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）证实SMV- SXBX侵染性克隆3'末端含有多聚体（A）尾56 nt时具有稳定侵染性。该方法便捷，高效，且避免了SMV侵染性克隆在结肠中的寄生虫问题。染性cDNA克隆的重建，为进一步研究SMV复制和发病的分子机制破坏了基础。SMV全长感染性cDNA克隆的构建为进一步研究SMV复制和发病机理提供了基础。大豆花叶病毒（大豆花叶病毒，SMV）作为半夏（Pinellia ternata（Thunb。）Breit。）主要病毒病害之一，已造成作物和品质造成严重影响。学研究病毒基因功能，病毒与宿主相互作用的有力工具，为明确SMV侵染半夏的分子机制，进行SMV转化cDNA侵染性克隆的构建特别重要。因此文中利用Gibson体外重组系统对大豆花叶病毒山西半夏分离物（SMV-SXBX）侵染性克隆进行组装，通过农杆菌浸润法植入健康半夏；进一步通过机械传代，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）证实SMV- SXBX侵染性克隆3'末端含有多聚体（A）尾56 nt时具有稳定侵染性。该方法便捷，高效，且避免了SMV侵染性克隆在结肠中的寄生虫问题。染性cDNA克隆的重建，为进一步研究SMV复制和发病的分子机制破坏了基础。SMV全长感染性cDNA克隆的构建为进一步研究SMV复制和发病机理提供了基础。大豆花叶病毒（大豆花叶病毒，SMV）作为半夏（Pinellia ternata（Thunb。）Breit。）主要病毒病害之一，已造成作物和品质造成严重影响。学研究病毒基因功能，病毒与宿主相互作用的有力工具，为明确SMV侵染半夏的分子机制，进行SMV转化cDNA侵染性克隆的构建特别重要。因此文中利用Gibson体外重组系统对大豆花叶病毒山西半夏分离物（SMV-SXBX）侵染性克隆进行组装，通过农杆菌浸润法植入健康半夏；进一步通过机械传代，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）证实SMV- SXBX侵染性克隆3'末端含有多聚体（A）尾56 nt时具有稳定侵染性。该方法便捷，高效，且避免了SMV侵染性克隆在结肠中的寄生虫问题。染性cDNA克隆的重建，为进一步研究SMV复制和发病的分子机制破坏了基础。

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