植物缺铁诱导乙烯合成机理及水稻铁还原酶OsFRO1功能研究
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摘要
英文摘要
第一章 文献综述
1.1 植物对铁的两种吸收机理
1.1.1 还原机理(机理Ⅰ植物)
1.1.2 螯合机理(机理Ⅱ植物)
1.2 植物铁平衡的调控机理
1.2.1 机理Ⅰ植物中铁的调控
1.2.2 机理Ⅱ植物中铁的调控
1.3 铁还原酶家族
1.3.1 根细胞膜定位还原酶
1.3.2 叶细胞膜定位还原酶
1.3.3 亚细胞结构中的还原酶
1.4 植物铁信号调控与乙烯之间的关系
1.4.1 乙烯的合成及信号途径
1.4.2 MAPK与乙烯合成限速酶ACS的关系
1.4.3 植物缺铁对乙烯合成和信号转导的影响
1.4.4 乙烯对于植物缺铁响应的作用
1.5 本研究的目的意义及主要内容
第二章 材料方法
2.1 实验材料
2.1.1 拟南芥材料
2.1.2 水稻材料
2.1.3 菌株
2.1.4 载体
2.2 实验方法
2.2.1 植物生长培养条件
2.2.2 水稻转基因载体及酵母表达载体的构建
2.2.3 农杆菌介导的水稻转化
2.2.4 进化树分析及蛋白跨膜结构预测
2.2.5 OsFRO1的亚细胞定位
2.2.6 OsFRO1的组织表达分析
2.2.7 植株金属元素含量测定
2.2.8 可溶性铁测定
2.2.9 乙烯含量测定
2.2.10 SPAD测定
2.2.11 RNA的提取
2.2.12 cDNA合成和荧光定量PCR分析
2.2.13 蛋白的提取与免疫沉淀激酶活性检测
2.2.14 酵母中FRO酶活的检测
2.2.15 植物根部氧化还原酶活性检测
第三章 植物缺铁诱导乙烯合成机理研究
3.1 结果与分析
3.1.1 水稻与拟南芥缺铁对乙烯合成水平的影响
3.1.2 水稻与拟南芥ACS家族的生物信息学分析
3.1.3 水稻与拟南芥缺铁对ACS转录水平的影响
3.1.4 水稻与拟南芥acs突变体正常和缺铁条件下乙烯合成比较
3.1.5 水稻与拟南芥acs突变体正常和缺铁条件下铁相关基因表达比较
3.1.6 拟南养缺铁对MPK3/MPK6在转录水平及蛋白活性的影响
3.1.7 拟南芥mpk3,mpk6突变体正常和缺铣条件下的乙烯合成量的检测
3.1.8 拟南莽mpk3,mpk6突变体正常和缺铁条件下ACS及铁相关基因的表达
3.1.9 拟南芥mpk3,mpk6突变体正常和缺铁条件下铁还原酶活性检测
3.1.10 拟南芥mpk3,mpk6突变体正常和缺铁条件下表型鉴定
3.2 讨论
第四章 水稻铁还原酶OsFRO1功能的初步研究
4.1 结果与分析
4.1.1 水稻铁还原酶OsFROs的生物信息学分析
4.1.2 OsFRO1的亚细胞定位
4.1.3 OsFRO1的组织袁达情况分析
4.1.4 OsFRO1基因的表达模式
4.1.5 OsFRO1在酵母中的酶活检测
4.1.6 水稻OsFRO1超表达及干涉材料的鉴定
4.1.7 OsFRO1超表达及干涉株系的生长状况
4.1.8 OsFRO1超表达及干涉株系元素含量的测定
4.2 讨论
第五章 结论与展望
5.1 植物缺铁诱导乙烯合成机理研究
5.2 水稻铁还原酶OsFRO1功能的初步研究
参考文献
攻读博士期间发表的论文
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