大花蕙兰高频再生及工厂化生产体系的建立
大花蕙兰(Cymbidium)又名虎头兰,是一种观赏价值很高的洋兰,其花朵硕大,枝叶俊秀,深受兰花爱好者的欢迎,也是春节消费的高档盆花。但是由于大花蕙兰多为杂交品种,种子繁殖无法保持其品种特性,且结实率也相当低,分株能力又很弱,因而繁殖系数极低,繁殖速度慢,远远不能满足工厂化生产的需求。正是因为繁殖系数不高,许多名贵品种短缺,导致了近几年大花蕙兰价格不断攀升。因此,建立和完善大花蕙兰高频再生和工厂化生产体系是解决这一问题的关键环节。本实验以大花蕙兰假鳞茎上新生侧芽为外植体,通过单因素和正交实验,研究了大花蕙兰侧芽离体再生不定芽的主要影响因素,确定了大花蕙兰高频再生的一系列技术参数组合,建立了高频稳定的大花蕙兰再生生产体系。结果表明:以大花蕙兰假鳞茎上新生侧芽为外植体,最佳的灭菌方法为:将芽体冲洗干净后,用70%酒精浸泡30s,0.1%Hgcl2浸泡5min,500mg/LPVP浸泡6min后接种。污染率18.33%,褐化率33.33%,成活率36.66%。最适宜的原球茎诱导培养基配方是MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L+活性炭2.0g/L,pH:5.4。诱导率平均达到63.3%。原球茎增殖最适宜的培养基的配方是MS+BA 1.Omg/L+NAA 0.5mg/L+IBA 1.Omg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L+马铃薯汁150g/L+活性炭2g/L,pH:5.4.最适宜的大花蕙兰生根壮苗的培养基的配方是1/2MS+NAA 0.1mg/L+GA3 1.Omg/L+蔗糖20g/L+马铃薯汁100g/L+琼脂8g/L,pH:5.4。大花蕙兰最适宜的一次性成苗培养基的配方是1/2MS+BA 1.Omg/L+NAA O.lmg/L+马铃薯汁100g/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L+... (共57页)
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