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长春花化学成分分离及分析

来源：花匠小妙招时间：2024-11-04 04:20

( 广东药学院硕士研究生学位论文长春花化学成分的分离及分析摘要目的: 通过对长春花( Catharanthus roseus (L.) Don )化学成分的分离及分析研究,以期达到以下目的:( 1)建立长春花中生物碱类成分的薄层分析,初步比较其生物碱类成分的组成;( 2)对长春花中的化学成分进行分离与结构鉴定;( 3)建立长春花中文多灵生物碱等化学成分的 HPLC 含量分析方法; 4)开展长春花 HPLC 指纹图谱的研究, 为长春花药材的整体质量控制提供可靠方法;( 5)探讨长春花中文多灵、长春质碱等生物碱一年内的动态变化规律,及其长春花生物碱的相关性,为长春花 GAP 种植提供数据支持。方法: 长春花化学成分的薄层分析与分离: 采用硅胶预制板,以甲醇-氯仿( 9:1 )为展开剂,文多灵、长春碱等多种生物碱为对照品,改良碘化铋钾为显色剂,对不同产地长春花样品进行薄层分析; 以无水乙醇对样品进行反复提取,过滤,合并滤液,并浓缩至流浸膏,采用硅胶柱色谱层析法,先后以石油醚:丙酮:氯仿( 15:5: )系统与甲醇-氯仿( 9: )系统进行洗脱,对其化学成分进行分离。长春花中文多灵等成分的 HPLC 含量测定:以 yilite C18 柱( 10?? m, mm x250 mm )为色谱柱,甲醇∶水( 64∶36,以二乙胺调 pH11 )为流动相;流速为 1ml/min ; 检测波长 220nm ,建立文多灵的 HPLC 分析方法。同时,以 yilite C18 柱( 10?? m, mm x250 mm )为色谱柱,乙腈∶水( 90∶10) 为流动相,流速为 1ml/min ;检测波长 220nm ,建立了熊果酸的 HPLC 测定法。长春花生物碱类成分的 HPLC 指纹图谱研究:以 yilite C18 柱( 10? m, mm x250 mm )为分析柱,甲醇∶水( 61∶39,以二乙胺调 pH11 )为流动相,检测波长 254nm , 检测时间为 1h为分析条件,对样品进行了 HPLC 分析,并采用中药指纹图谱相似度计算软件对不同时间、不同部位以及不同品种长春花色谱图进行相似性分析,对长春花的质量进行了整体评价。长春花中文多灵、长春质碱等生物碱类成分的含量动态变化及其积累相关性研 I 广东药学院硕士研究生学位论文究: 根据 HPLC 分析的结果,分析了在一年的生长期内文多灵、长春质碱等生物碱积累的动态变化;同时运用 SPSS 软件初步探讨了长春花生物碱积累的相关性。结果: 长春花化学成分的薄层分析分析显示,不同产地长春花样品中均含有生物碱,其中文多灵为主要成分,除香港的长春花外,其他产地中的长春质碱也较为丰富,长春碱与长春新碱较微弱。从长春花样品中分离得到了 7个化合物,并根据理化性质和光谱数据鉴定了其中的五个化合物,分别为其中 CH-1 为正三十烷,CH-3 为二十五酸二十四烷酯, CH-4 为 1-甲基二十四烷醇, CH-5 为二十八烷醇, CH-12 为熊果酸。应用建立的 HPLC 分析方法成功测定了不同来源的长春花中文多灵生物碱的含量,结果表明不同来源的长春花中文多灵含量存在差异。不同产地中文多灵生物碱的含量最高的为恩平,达 mg/g ;不同品种中文多灵生物碱含量最高的为白花黄心品种,含量为 mg/g 。首次建立了长春花中熊果酸的 HPLC 含量测定的方法,测定了长春花不同部位中熊果酸的含量。其含量分别为:全草 mg/g ,叶 ,茎 mg/g ,花。建立了长春花的 HPLC 指纹图谱,显示有 13个共有峰,方法学考察符合指纹图谱技术要求。相似度计算表明,广东不同时期采收长春花的相似度较大,达到以上,不同部位与不同品种间的相似度较小。长春花中文多灵、长春质碱生物碱类成分含量的动态变化及其积累的相关性分析表明: 一年的生长时期中,长春花文多灵生物碱的含量差异较大,茎中文多灵的含量在 10-2 月处于上升阶段, 2-9 月总体处于下降阶段。叶中文多灵的含量则在 10-3 月与 4-9 月,分别呈现上升与下降的趋势。与茎、叶相比,花与果中文多灵生物碱的含量动态变化较为复杂;花中长春质碱在 10-11 月份处于上升,在 11-2 月份下降, 2月份,含量开始上升,并在 3-9 月处于平缓阶段。叶中长春质碱在 1-4 月份中, 总体呈上升趋势,在四月份达到最大值后急剧下降,在 5-8 月份,其含量又逐渐上升, 在 7-11 月份中,长春质碱含量变化相对较为平缓。果中长春质碱含量主要集中在一年中的下半年,茎中几乎不含长春质碱。相关性分析结果表明,文多灵生物碱的含量与长春碱、长春质碱含量之间的相关 II 广

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