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关于植物克隆实验的简介

来源:花匠小妙招 时间:2024-11-02 04:26

关于植物克隆实验的简介

许多植物都有先天克隆的本领。例如,从一棵大柳树上剪下几根枝条插进土里,枝条就会长成一株株活泼可爱的小柳树;把马铃薯切成许多小块种进地里,就能收获许多新鲜的马铃薯;把仙人掌切成几块,每块落地不久就会生根,长成新的仙人掌……此外,一些植物可以通过压条或嫁接培育后代。凡此种种,都是植物的克隆。......阅读全文

细胞克隆实验操作的注意事项

(1)第一次开始培养某种细胞时,一定要在WWW. ATCC. ORG上用该细胞的名称进行检索,可以得到关于该细胞的详细信息,包括需要使用的培养基、血清、添加剂、通常的消化时间、传代时间等。对于特定的细胞(如原代培养的细胞),需要查阅相关文献来获得更准确的培养方法。(2)进入细胞间开始细胞培养时,必须

大量细菌克隆的杂交方法筛选实验

实验方法原理这一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)报道,主要用来处理由质粒 cDNA 文库转化的细菌。将转化菌的混合物或者一份扩增的 cDNA 文库直接置于不含洗涤剂的硝酸纤维素膜或尼龙膜上,复制膜用膜-膜接触的方法制备。采用这一方法,每块 150

单克隆抗体的腹水制备实验

实验材料杂交瘤细胞试剂、试剂盒完全DMEM-10HEPES丙酮酸钠PBS仪器、耗材注射针头离心管转子离心机实验步骤1.  用20G或22G的注射针,小鼠腹膜内注射降植烷,每只鼠0.5 ~ 1 ml,1周后接种细胞。 2.  在175 cm2培养瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸钠培养液,进

菌落 PCR 分析克隆的重组体实验

           实验方法原理菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。使用载体上的通用引物,进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用

软琼脂克隆形成实验的基本步骤

原理:细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数,但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形

实验九 转化克隆的筛选和鉴定

1.目的学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。2.原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片段的克隆菌落。3.器材旋涡混合器,小镊子,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,干式恒温气浴

细胞克隆实验的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

细胞克隆实验操作的具体步骤

一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5

多克隆抗体的免疫电泳实验

【实验原理】免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM'' IgG'' IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体

单克隆抗体的提纯实验过程

1.材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液20mMol/LNaCl(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液40mMol/LNaCl(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液80mMol/LNaCl(4)20mMol/LpH7.8~

关于单克隆抗体的基本介绍

  单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。  用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,

关于细胞克隆的准备工作介绍

  准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。

关于多克隆抗体的组织结构介绍

  抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,最终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体

关于单克隆抗体的定义介绍

单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。单克隆抗体优点:纯度高,灵敏度高,特异性强,交叉反应少,制备的成本低。缺点:对技术有一定的要求,而且通过抗原的化学处理很容易丢失表位 [1]  。

关于T载体克隆的显色反应介绍

  LacZ基因是大肠杆菌乳糖操纵子中的一个基因,可以编码β—半乳糖核苷酶。β—半乳糖核苷酶是由4个亚基组成的四聚体,可催化乳糖的水解.用X-Gal为底物进行染色时,呈蓝色。  一些特定的质粒(比如pUC/pBS等),常带有β—半乳糖核苷酶的调控序列和β—半乳糖核苷酶N端146个氨基酸(α肽段)的编

关于单克隆抗体的内容介绍

  解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得仅针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但

关于单克隆抗体技术的介绍

  一种免疫学技术,将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞进行细胞融合, 获得既能产生抗体, 又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体。是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。  单克隆抗体技术(monoclonal antibody t

关于多克隆抗体的免疫方法介绍

  可以采用以下各种方法之一进行免疫。  (1)淋巴结注射法:  ①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;  ②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1

关于多克隆抗体免疫动物的介绍

  供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体,多采用大动物;如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物;如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体;如果难以获得的抗原

关于多克隆抗体的结果判定介绍

  1.抗 Ig 的效价测定 琼脂扩散效价达 1﹕16 或 1﹕32 者为合格。  2.纯度鉴定 采用琼扩法。中间孔加抗 Ig 血清,外周孔加 Ig 和标准品 Ig。在抗 Ig 与 I抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好

关于多克隆抗体的抗体鉴定介绍

  抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼

植物RNA的制备实验

实验材料RNA试剂、试剂盒TELiCl无水乙醇乙酸钠氯仿仪器、耗材匀浆器离心管离心机水浴锅实验步骤1.  研钵和研棒先用液氮冷却,称出15 g 冻结植物组织于研钵中(加液氮保持冻结)。2.  用研棒磨成粉末,立即转移到一个盛有150 ml,研磨缓冲液和50 ml TLE缓冲液平衡酚的500

植物抗逆性的鉴定实验

实验方法原理 当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。实验步骤 一、材料与设备1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。2.

植物抗逆性的鉴定实验

实验方法原理:当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。实验步骤:一、材料与设备1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。2.

植物组织的观察实验

[目的要求]1.掌握植物细胞有丝分裂和减数分裂各时期的特征。2.掌握植物分生组织和各种成熟组织的形态、位置、结构及功能。3.学习简单地离析组织的方法。[材料用品]材料:蚕豆叶、烟草叶、玉米叶、小麦叶、水稻叶、椴树茎横切片

植物光合测量系统简介

  植物光合测量系统可以测定气体CO2浓度、空气温湿度,叶片温度,光合有效辐射,细胞间CO2浓度,气体流量等要素,并计算出植物的光合速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度和水分利用率等光合作用指标,也可以单独作为二氧化碳记录仪使用。FT-GH30植物光合测量系统采用windows 操作系统,触摸

植物组织培养简介

  植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论,近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其

关于原发性免疫缺陷病实验诊断的简介

  原发性免疫缺陷病是一组少见病,与遗传相关,常发生在婴幼儿,出现反复感染,严重威胁生命。其中有些可能获得有效治疗,故及时诊断仍很重要。按免疫缺陷性质的不同,可分为体液免疫缺陷为主、细胞免疫缺陷为主以及两者兼有的联合性免疫缺陷三大类。补体缺陷、吞噬细胞缺陷等非特异性免疫缺陷也属于此组。

关于自身免疫性肝炎实验诊断的简介

  自身免疫性肝炎实验诊断是指通过实验室检查进行自身免疫性肝炎的诊断,常用的实验室检查包括免疫学、病理学检查等。自身免疫性肝炎(AIH)是以肝慢性坏死性炎症为特点的自身免疫性肝病,若未及时诊断及治疗,可缓慢进展为肝硬化,或发展为急性、爆发性肝病,最终以各种并发症而死亡,故早期诊断并及时行恰当的治疗是

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