金钗石斛多糖的研究进展
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金钗石斛多糖的研究进展
安凤娟
，
何宇新
*
（
西华大学生物工程学院
，
四川成都
610039
）
摘要
金钗石斛是我国的名贵中药
，
化学成分主要有多糖类
、
生物碱类和酚类等
，
其中多糖为主要成分之一
。
现代药理学研究表明
，
金
钗石斛多糖具有调节免疫
、
抗肿瘤和抗氧化等功能
，
引起了众多专家学者的广泛关注
。
文中分类综述了金钗石斛多糖的含量
、
结构分析
及生物活性等方面的研究工作
，
为金钗石斛多糖的开发应用提供参考
。
关键词
金钗石斛
（
Dendrobium
nobile
Lindl．
）
；
多糖
；
结构分析
；
生物活性
中图分类号
S567
；
Q539
文献标识码
A
文章编号
0517
－
6611
（
2014
）
13
－
03857
－
06
Ｒesearch
Advance
of
Polysaccharides
from
Dendrobium
nobile
Lindl．
AN
Feng-
juan
，
HE
Yu-
xin
（
School
of
Bioengineering
，
Xihua
University
，
Chengdu
，
Sichuan
610039
）
Abstract
Dendrobium
nobile
，
is
widely
used
in
traditional
Chinese
and
folk
medicine
，
contains
a
variety
of
chemical
constituents
，
such
as
poly-
saccharides
，
alkaloids
，
polyphenolsand
so
on．
Modern
pharmacological
studies
showed
that
bioactivities
，
such
as
immuno-
modulatory
，
anti-
tumor
，
and
antioxidant
properties
，
have
been
found
for
Dendrobium
nobile
polysaccharides
，
which
has
provoked
widespread
concern
among
many
experts
and
scholars．
The
recent
progresses
of
polysaccharide
from
Dendrobium
nobile
on
content
，
structure
analysis
and
biological
activity
were
summarized
in
this
review
，
which
can
provide
curtain
theory
for
the
development
and
application
of
Dendrobium
nobile
polysaccharides．
Key
words
Dendrobium
nobile
；
Polysaccharide
；
Structure
analysis
；
Biological
activity
作者简介
安凤娟
（
1989
－
）
，
女
，
四川眉山人
，
硕士研究生
，
研究方向
：
中药新制剂
。
*
通讯作者
，
教授
，
硕士生导师
，
博士
，
从事中
药新制剂新剂型研究
。
收稿日期
2014-
04-
16
金钗石斛
（
Dendrobium
nobile
Lindl．
）
是兰科
（
Orchidace-
ae
）
石斛属
（
Dendrobium
）
多年生附生草本植物
，
是中国药典
记载的主要石斛品种之一
，
主要以新鲜或干燥茎入药
［
1
］
。
金
钗石斛素有
“
千金草
”
之称
，
驰名中外
，
被国际药用植物界称
为
“
药界大熊猫
”
，
被道家称为中华
9
大仙草之首
［
2
］
。
在我国
金钗石斛主要产于秦岭以南的各个省区
，
主要产区有广西
、
贵州
、
四川和云南等
［
3
－
6
］
。
几十年来
，
中外学者对金钗石斛
的化学成分和药理作用进行了大量研究
，
发现金钗石斛化学
成分多种多样
。
以往对金钗石斛的研究主要集中在小分子
成分的研究上
，
如酚类
，
菲类
，
倍半萜类和生物碱等
，
对其生
物活性大分子的研究不多
［
7
－
12
］
。
多糖类物质是生命代谢不
可缺少的重要物质
，
是由多个单糖或其衍生物聚合而成的大
分子活性化合物
［
13
］
。
近期研究表明
，
金钗石斛多糖是金钗
石斛的主要活性成分之一
，
具有抗肿瘤
、
抗氧化
、
免疫促进和
抗白内障等活性
［
14
－
18
］
。
笔者就金钗石斛多糖的含量
、
结构
分析及药理作用等方面的研究工作进行综述
。
现报道如下
。
1
金钗石斛多糖的含量研究
金钗石斛多糖类成分含量不高
［
19
－
20
］
。
不同器官组织
、
不同生长期多糖含量不同
，
且不同生长条件下
，
多糖含量也
不尽相同
，
甚至加工前后多糖的含量也有很大差别
。
传统经
验认为
，
金钗石斛的质重
、
嚼之粘牙
、
味甘
、
无渣者为优品
，
多
糖含量较高
［
2
］
。
包英华等采用徒手切片法对金钗石斛多糖
进行组织化学定位研究
［
21
］
，
结果表明金钗石斛多糖主要分
布在根的皮层薄壁细胞
、
茎的中部和内部的薄壁细胞的细胞
质和叶片皮层薄壁细胞内
。
从不同器官多糖含量比较来看
，
2
种石斛的多糖含量呈现茎
＞
叶
＞
花
＞
根的趋势
，
且相互之
间存在明显差异
。
吴庆生发现
，
多糖含量按此方式分布
，
可
能是因为糖是靠植物叶绿体的光合作用产生的
，
随着光合能
力逐渐减弱
，
糖的生成和积累也逐渐减少
［
23
］
。
因而以上
（
梢
）
部为最高
，
药用时首先考虑这个部位
；
茎下部虽枯老
，
但
其含量并不比中部低
，
有的甚至更高
，
与中
、
上部呈相似分
布
，
因此这部分药材仍可药用
；
而且其叶片中多糖含量也不
低
。
因此
，
在实际生产中应重视金钗石斛叶片的开发利用
，
可提高资源的综合利用效率
［
21
］
。
不同月份采收的金钗石斛多糖含量差异较大
，
无论是野
生金钗石斛还是组培金钗石斛
，
3
月份时多糖含量最低
，
从
3
月到第
2
年
1
月总体呈上升趋势
，
7
月份前后金钗石斛多糖
的含量在稍有下降后持续升高
，
10
月份左右含量达到最高
，
11
月份略有降低
，
总体仍相对较高
，
12
月份开始降低
［
21
－
22
］
。
综合多糖和生物碱的含量变化以及生物量的因素
，
并结合考
虑传统的采收期
，
最佳采收期在
10
月到
11
月之间较为适
宜
［
24
］
。
随着生长期的延长
，
金钗石斛体内水溶性多糖累积出现
先增加后降低的趋势
，
在第
1
年基本达到饱和
，
在第
2
年达
2．
83%
，
为最高值
，
但在
3
年龄金钗石斛体内水溶性多糖含
量则降低到
2．
25%
［
25
］
。
王令仪也研究了贵州赤水人工栽培
的不同生长期金钗石斛多糖含量
，
发现金钗石斛
1
、
2
、
3
年生
多糖含量分别是
7．
74%
、
2．
75%
和
2．
20%
［
26
］
。
金钗石斛多
糖含量
1
年生最高
，
是
2
年生和
3
年生金钗石斛多糖含量的
3
倍
，
且随着年份的延长
，
其含量依次递减
。
结合多糖和生物
碱的含量变化
，
故金钗石斛以
1
年采收为最佳
。
不同产地金钗石斛的水溶性多糖含量之间存在明显差
异
，
杨立昌等发现赤水与其他
3
个产地之间有极显著差异
（
P
＜
0．
01
）
［
25
］
。
其中
，
以赤水产金钗石斛为最高
（
2．
290%
）
，
合江产金钗石斛为最低
（
1．
893%
）
；
以鲜重计算的话
，
则
4
个
产地金钗石斛的水溶性多糖含量之间存在显著差异
（
P
＜
0．
05
）
。
水溶性多糖含量最高和最低的产地分别是罗甸和赤
水
，
依次为
0．
365
7%
和
0．
277
2%
。
王燕燕等比较了各地区
安徽农业科学
，
Journal
of
Anhui
Agri．
Sci．
2014
，
42
（
13
）
：
3857
－
3862
责任编辑
石金友
责任校对
况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.13.129
金钗石斛多糖含量
，
发现各地区金钗石斛多糖含量各不相
同
，
其中以贵州习水所产金钗石斛多糖含量最高
，
海南东方
霸王岭下生长的金钗石斛多糖含量最低
［
13
］
。
还发现贵州的
2
份样品多糖含量较其他产地的高
，
在采样过程中
，
贵州习水
的海拔最低
，
贵州赤水的海拔较其略高一些
，
推测海拔的高
低与植物多糖的含量累积有一定的相关性
。
在温室中驯化栽培与野外栽培相比
，
前者具有方便
、
成
本低
、
利于控制石斛生长条件的优势
。
杨立昌等以贵州赤水
产金钗石斛为试验材料
，
研究了野外栽培和温室栽培过程中
的金钗石斛体内水溶性多糖的累积
［
25
］
。
结果表明
，
栽培环
境显著影响水溶性多糖含量
，
特别是以干重计算
，
野外和温
室栽培条件下金钗石斛水溶性多糖含量分别为
2．
325
0%
和
2．
106
7%
，
存在极显著差异
（
P
＜
0．
01
）
。
章金辉等发现
，
野
生石斛的茎段多糖含量与组培金钗石斛没有显著差异
，
但其
他器官
，
组培金钗石斛与野生金钗石斛的多糖含量具有显著
性差异
［
22
］
。
目前随着野生金钗石斛资源的匮乏
，
以组培快
繁
、
温室大棚种植的趋势越来越被社会采用
，
因此
，
组培金钗
石斛具有很好的开发潜力和替代应用的可行性
。
采集后的处理方法对石斛多糖含量的影响较大
，
如自然
晒干的金钗石斛总多糖含量降低
，
茎上段的多糖含量较烘干
处理的下降了
50．
35%
，
根部的含量则上升了
90．
63%
。
这是
由于自然晒干过程中
，
石斛植物仍保持着呼吸作用
，
需用消
耗一定量的糖分来维持有机体的生理活动
，
其中茎尖呼吸作
用最旺盛
，
同时多糖在石斛植株全草的不同部位发生了运输
和渗透平衡
，
直至失水死亡
，
这一过程可持续数月
［
27
］
。
陈照
荣等比较了金钗石斛干品
、
清炒石斛
、
酒炙石斛
3
种炮制品
的多糖溶出率
。
结果发现酒炙法炮制的石斛的的多糖含量
明显高于其他炮制方法
［
28
］
。
因此在试剂应用中可采用酒炙
的方法预先炮制
，
这样既可以节省煎煮时间
，
又可提高药物
的利用率
，
增加疗效
，
同时还有利于石斛资源的有效利用和
保护
。
2
金钗石斛多糖的结构分析
多糖的化学结构包括单糖残基组成
、
单糖残基排列顺
序
、
相邻糖残基连接方式
、
糖链分支等
，
其对多糖发挥药理活
性有着重要的意义
。
蒋玉兰等研究总结了近
5
年来金钗石
斛均一多糖的分子量分布和单糖组成
，
发现金钗石斛的多糖
往往由几个不同分子量范围的组分构成
，
且不同分子量均一
组分的单糖组成也不相同
［
16
］
。
Luo
等从金钗石斛粗多糖中分离出
4
个组分
，
它们的分
子量分别为
136
、
27．
7
、
11．
8
和
11．
4
kD
，
单糖组成分析表明这
4
个组分都主要包含甘露糖
、
葡萄糖
、
半乳糖和少量的鼠李
糖
、
阿拉伯糖和木糖
［
29
］
。
从金钗石斛茎中分离出一种新的
水溶性多糖
DNP
（
8．
76
×
10
4
Da
）
。
单糖分析表明
，
DNP
主要
由甘露糖
（
17．
0%
）
，
葡萄糖
（
63．
3%
）
，
半乳糖
（
16．
5%
）
，
以及
少量的鼠李糖
（
0．
5%
）
，
阿拉伯糖
（
1．
2%
）
和木糖
（
1．
5%
）
组
成
，
其摩尔比为
30．
8∶
118．
0∶
31．
8∶
1．
0∶
2．
8∶
2．
2
。
研究发现
，
DNP
的主链由
（
1
→
6
）
-
Glc
p
，
和
（
1
→
6
）
-
Gal
p
组成
，
支链由
-
（
1
→
4
）
-
β
-
Glc
p
和
-
（
1
→
4
）
-
β
-
Man
p
残基组成
；
发现从金钗石
斛茎中已分离出的多糖
，
大部分是由
-
（
1
→
4
）
（
1
→
6
）
-
Man
，
-
（
1
→
3
）
-
Man
，
-
（
1
→
4
）
-
Man
或
Glc
，
-
（
1
→
4
）
（
1
→
6
）
-
Man
或
Glc
组成
［
30-
31
］
。
王军辉将
DNP-
W
进一步分离纯化
，
获得
7
个均一多糖
组
分
DNP-
W1A
、
DNP-
W1B
、
DNP-
W2
、
DNP-
W3
、
DNP-
W4
、
DNP-
W5
和
DNP-
W6
［
32
］
；
并采用化学
（
甲基化分析
、
高碘酸氧
化
-
Smith
降解反应
、
部分酸水解
）
与波谱学
（
UV
、
IＲ
、
GC
、
GC-
MS
、
ESI-
MS
、
NMＲ
）
结合的手段
，
对各均一多糖的一级结构进
行了表征
。
结果表明
，
DNP-
W1A
是由
Man
、
Glc
和
Gal
组成
的半乳葡甘聚糖
，
主链由
（
1
→
6
）
-
α
-
Man
p
和
（
1
→
3
）
-
α
-
Man
p
组成
，
Glc
p
和
Gal
p
残基支链分别通过
（
1
→
6
）
-
α
-
Man
p
的
3
位
和
2
位连接在主链上
。
DNP-
W4
是一个主链由
β
-
（
1
→
4
）
-
Glc
p
、
β
-
（
1
→
6
）
-
Glc
p
及
β
-
（
1
→
6
）
-
Gal
p
组成的酸性杂多糖
。
DNP-
W6
为果胶类多糖
，
由
［
→
4
）
-
α
-
GalA
p
-
（
1
→
2
）
-
α
-
Ｒha
p
-
（
1
→
］
二糖重复单位构成主链
，
DNP-
W6
主链
Ｒha
p
的
4
位存
在分支
，
支链区包括半乳糖区域和葡萄甘露糖区域
。
DNP-
W1B
为均
一
多
糖
组
分
，
分
子
量
为
7．
7
×
10
5
Da
。
DNP-
W1B
的比旋度
［
α
］
20
D
=
+
81．
3°
（
c
0．
3
，
H
2
O
）
，
紫外扫描
结果表明
DNP-
W1B
不含肽或蛋白质
。
在
DNP-
W1B
的红外
光谱中
，
890
cm
－
1
处的特征峰为
β
吡喃型葡萄糖的吸收峰
，
810
及
870
cm
－
1
附近无吸收峰
，
表明不含甘露糖
。
糖醛酸含
量测定结果表明
，
DNP-
W1B
不含糖醛酸
。
单糖组成分析表
明
，
DNP-
W1B
由葡萄糖
、
阿拉伯糖和半乳糖
3
种单糖组成其
摩尔比为
6．
2∶
3．
1∶
0．
9
。
甲基化分析结果表明
，
组成
DNP-
W1B
的
3
种残基共有
6
种连接方式即
1-
Glc
p
，
1
，
3-
Ara
f
，
1-
Ara
f
，
1
，
6-
Glc
p
，
1
，
4-
Glc
p
，
1
，
4
，
6
-
Glc
p
，
摩尔比为
0．
8∶
2．
1∶
1．
0∶
2．
9∶
1．
1∶
2．
9
。
非还原末端糖残基连接与具有分支的糖
残基连接摩尔比基本相等
，
表明
DNP-
W1B
已完全甲基化
。
三取代糖残基的存在
，
表明
DNP-
W1B
具有分支结构
。
DNP-
W1B
是一个阿拉伯半乳葡聚糖
，
拥有
［
→
4
）
-
β
-
Glc
p
-
（
1
→
6
）
-
β
-
Glc
p
-
（
1
→
］
二糖单位的主链结构
，
在
β
-
（
1
→
6
）
-
Glc
p
的
4
位
形成分支
，
支链由
Gal
p
和
Ara
p
残基组成
。
综上所述
，
DNP-
W1B
是一个以
［
→
4
）
-
β
-
Glc
p
-
（
1
→
6
）
-
β
-
Glc
p
-
（
1
→
］
二糖单
位为主链的半乳阿拉伯葡聚糖
，
在
β
-
（
1
→
6
）
-
Glc
p
的
4
位形
成分支
，
支链由末端
Gal
p
和
Ara
f
及
1
，
3
-
Ara
f
组成
。
比较发
现
，
DNP-
W1B
的单糖组成比例及各糖残基连接方式之间组
成的重复结构特征与已报道的石斛多糖都不同
，
是一个石斛
中获得的具有新结构特征的多糖化合物
［
32
－
33
］
。
DNP-
W2
是一个部分乙酰化的半乳甘露葡聚糖
，
主链由
β
-
（
1
→
4
）
-
Glc
p
、
β
-
（
1
→
6
）
-
Glc
p
及
β
-
（
1
→
4
）
-
Man
p
组成
，
其中
部分
β
-
（
1
→
4
）
-
Glc
p
及
β
-
（
1
→
4
）
-
Man
p
的
6
位连接有末端
Gal
p
。
DNP-
W2
为均一多糖组分
，
分子量为
18
kDa
。
DNP-
W2
的比旋光度
［
α
］
20
D
=
+
81．
6°
。
糖醛酸含量测定结果表明
，
DNP-
W2
不含糖醛酸
。
GC
分析表明
DNP-
W2
主要由葡萄
糖
、
甘露糖和半乳糖
（
摩尔比为
6．
1∶
2．
9∶
2．
0
）
，
以及少量的阿
拉伯糖组成
，
DNP-
W2
所有的糖残基都为
D
构型
。
甲基化分
析结果表明
，
主要组成
DNP-
W2
的
3
种残基共有
6
种连接方
式即
2
，
3
，
4
，
6-
Me4-
Gal
p
，
2
，
3
，
6-
Me3-
Man
p
，
2
，
3-
Me2-
Man
p
，
2
，
8
5
8
3
安徽农业科学
2014
年
3
，
4-
Me3-
Glc
p
，
2
，
3
，
6-
Me3-
Glc
p
，
2
，
3-
Me2-
Glc
p
，
摩尔比为
2．
0∶
1．
9∶
0．
9∶
1．
3∶
4．
0∶
1．
1
，
以及少量的
2
，
3
，
5-
Me3-
Ara
f
。
结果表
明
，
DNP-
W2
具有分支结构
。
非还原末端残基的摩尔比约等
于该分支残基的摩尔比
，
这表明
DNP-
W2
已完全甲基化
。
综
上所述
，
DNP-
W2
是一个部分乙酰化的半乳甘露葡聚糖
，
主
链由
β
-
（
1
→
4
）
-
Glc
p
、
β
-
（
1
→
6
）
-
Glc
p
及
β
-
（
1
→
4
）
-
Man
p
组成
，
其中部分
β
-
（
1
→
4
）
-
Man
p
的
2
位被乙酰基团取代
，
β
-
（
1
→
4
）
-
Glc
p
及
β
-
（
1
→
4
）
-
Man
p
的
6
位连接有末端
Gal
p
［
32
，
34
］
。
DNP-
W3
为阿拉伯半乳聚糖
，
主链由
β
-
（
1
→
3
）
-
Gal
p
组
成
，
在其
4
位连接
Ara
p
和
Ｒha
p
残基支链
。
DNP-
W3
为均一
多糖组分
，
分
子
量
为
71
kDa
。
DNP-
W3
的
比
旋
光
度
［
α
］
20
D
=
+
19．
6°
（
c
0．
5
，
H
2
O
）
。
紫外扫描结果表明
，
DNP-
W3
在
280
nm
处无吸收
，
不含肽或蛋白质
。
GC
分析表明
DNP-
W3
主要由半乳糖
、
鼠李糖
、
阿拉伯糖组成
，
其摩尔比为
3．
1∶
1．
1∶
1．
0
，
以及少量的阿拉伯糖
。
DNP-
W3
的鼠李糖
、
阿拉伯糖残
基是
L
构型
，
半乳糖残基是
D
构型
。
糖醛酸含量测定结果表
明
，
DNP-
W3
不含糖醛酸
。
甲基化分析结果表明
，
主要组成
DNP-
W3
的
3
种残基共有
4
种连接方式即
2
，
3
，
5-
Me3-
Ara
p
，
2
，
3-
Me2-
Ｒha
p
，
2
，
4
，
6-
Me3-
Gal
p
，
2
，
6-
Me2-
Gal
p
，
摩尔比为
0．
9∶
1．
1∶
2．
0∶
1．
1
。
非还原末端残基的摩尔比约等于该分支残基
的摩尔比
，
这表明
DNP-
W3
已完全甲基化
。
综上所述
，
DNP-
W3
为阿拉伯半乳聚糖
，
主链由
β
-
（
1
→
3
）
-
Galp
组成
，
在
Gal
p
的
4
位形成分支
，
支链由
Ara
p
和
Ｒha
p
残基组成
。
显然
DNP-
W3
的结构特点与已报道的石斛多糖都不同
，
是
1
个石斛中
获得的具有新结构特征的多糖化合物
［
32
，
35
］
。
果胶多糖
DNP-
W5
为均一多糖组分
，
分子量为
4．
6
×
10
5
Da
。
DNP-
W5
的比旋光度
［
α
］
20
D
=
－
12．
1°
（
c
0．
5
，
H
2
O
）
。
紫
外扫描结果表明
，
DNP-
W3
在
280
nm
处无吸收
，
说明不含肽
或蛋白质
。
DNP-
W5
的红外光谱中
，
1
720
cm
－
1
附近有弱吸
收峰
，
表明
DNP-
W5
含有糖醛酸或乙酰基
。
间羟基联苯法测
定它含有
14．
2%
糖醛酸
。
TLC
分析表明
DNP-
W5
包含甘露
糖
（
11．
0%
）
，
葡
萄
糖
（
28．
8%
）
，
半
乳
糖
（
29．
2%
）
，
木
糖
（
2．
1%
）
，
鼠李糖
（
14．
9%
）
和半乳糖醛酸
（
13．
9%
）
。
GC
分
析表明
DNP-
W5
主要由甘露糖
、
葡萄糖
、
半乳糖
、
木糖
、
鼠李
糖和半乳糖醛酸组成
，
摩尔比为
3．
1∶
8．
1∶
8．
2∶
0．
6∶
4．
2∶
3．
9
。
其中半乳糖醛酸中有
21%
以甲酯形式存在且乙酰基含量达
到
6．
9%
。
试验结果表明
，
DNP-
W5
是
ＲG-
II
的多糖
，
以
2
糖
重复单位
［
→
4-
GalA
p
-
（
1
→
2
）
-
Ｒha
p
-
1
→
］
为主链
，
在
Ｒha
p
的
4
位和
Man
p
的
3
位存在分支
。
Ｒha
p
的
4
位存在侧链
，
包含
β
-
（
1
→
4
）
-
Glc
p
，
β
-
（
1
→
6
）
-
Man
p
，
β
-
（
1
→
6
）
-
Gal
p
及
末
端
Gal
p
。
1
，
3
，
4-
GalA
p
的
3
位连接着
Xylp
。
侧链被进一步取
代
，
Man
p
的
3
位被末端和
β
-
（
1
→
6
）
-
Glc
p
残基取代
，
Gal
p
的
3
位被末端和
β
-
（
1
→
6
）
-
Gal
p
取代
［
32
，
36
］
。
3
金钗石斛多糖的生物活性
3．
1
免疫调节作用
陈志国等研究了金钗石斛水溶性粗多
糖
（
DNCP
）
和粗多糖的脱蛋白样品
（
DNPP
）
对小鼠脾细胞的
增殖的影响
，
发现
DNCP
和
DNPP
在体外一定浓度下均能明
显促进小鼠脾细胞的增殖
，
且随着浓度的增高其对脾淋巴细
胞的增殖作用越强
，
两者存在正比例关系
［
37
］
。
DNCP
和
DN-
PP
（
25
和
50
mg
/L
）
可显著提高
ConA
诱导小鼠的
T
淋巴细
胞增殖和
LPS
诱导小鼠的
B
淋巴细胞的增殖
（
P
＜
0．
01
）
。
相同的剂量
（
25
或
50
mg
/L
）
下
，
DNCP
对小鼠脾细胞增殖的
效力均高于
DNPP
（
P
＞
0．
05
）
［
31
］
。
王军辉等发现
DNP-
W1B
对
Con
A
诱导的脾
T
淋巴细胞
和
LPS
诱导的脾
B
淋巴细胞的体外增殖具有显著的促进作
用
，
且促进作用随着
DNP-
W1B
浓度的增加而加大
，
呈现剂量
依赖性关系
。
当添加的
DNP-
W1B
为
200
μ
g
/ml
时
，
T
淋巴
细胞和
B
淋巴细胞的增殖率分别为对照的
6．
3
与
4．
6
倍
［
33
］
。
Wang
等研究了不同浓度的多糖的样品
（
DNP-
W
、
DNP-
W2
、
DNP-
W3
、
HDNP-
W2
和
HDNP-
W3
）
对脾的
T
和
B
淋巴细
胞的影响
［
34
－
35
］
。
研究结果表明
，
DNP-
W
、
DNP-
W2
、
DNP-
W3
、
HDNP-
W2
可显著促进脾的
T
和
B
淋巴细胞的增殖
（
P
＜
0．
05
）
，
并且随着多糖的浓度的增加淋巴细胞增殖作用增强
。
然而
，
HDNP-
W2
、
HDNP-
W3
在低剂量时对体外淋巴细胞增殖
没有影响
，
且在高剂量时对体外淋巴细胞增殖的效果极微
。
构效关系表明
，
DNP-
W2
的分支对其免疫活性的增强的表达
不重要
，
而
DNP-
W3
的分支对其免疫活性增强的表达是极
其重要的
。
Wang
等还发现
DNP-
W5
显示出对
T
淋巴细胞和
B
淋巴
细胞显著的免疫增强活性
，
其分支和乙酰基是非常重要的免
疫学活性的表达
［
36
］
。
构效关系的研究表明
，
果胶无支链的
区域具有低的活性
，
并且高度支化的区域具有较高的活性
。
李小琼等发现金钗石斛多糖干预
LPS
诱导的巨噬细胞
后
，
TNF-
α
和
NO
分泌减少
，
而金钗石斛多糖浓度越高
，
TNF-
α
、
NO
的分泌
、
iNOS
活性及
TNF-
α
mＲNA
、
iNOS
mＲNA
表达
下降越明显
（
P
＜
0．
05
）
［
38
］
；
表明金钗石斛多糖可通过抑制
TNF-
α
、
NO
的产生发挥抗炎作用
，
其可能的机制与金钗石斛
多糖抑制小鼠腹腔臣噬细胞
TNF-
α
mＲNA
、
iNOS
mＲNA
的表
达有关
，
这为金钗石斛的临床应用奠定了一定的理论基础
。
张俊青等观察了不同浓度的石斛多糖
（
0．
025
、
0．
250
和
2．
500
mg
/L
）
对细胞激活的影响
［
39
］
，
发现
LPS
刺激星形胶质
细胞后
MTS
检测吸光度明显升高
，
NO
含量
、
TNF-
α
和
IL-
6
mＲNA
及其蛋白表达均明显升高
，
与正常组比较有显著性差
异
（
P
＜
0．
01
）
；
石斛多糖
3
个剂量组对
LPS
诱导的
NO
释放
具有改善作用
（
P
＜
0．
05
）
。
研究结果显示
，
石斛多糖能明显
抑制
LPS
所诱导的大脑皮质
Ac
内
NO
的释放
，
提示其可能
是金钗石斛抗炎作用的主要有效成分
。
3．
2
抗氧化作用
金钗石斛多糖在体外具有一定的清除
－
OH
和氧自由基的能力
，
在体内能显著提高正常小鼠血清和
肝组织中
SOD
、
GSH-
Px
的活性
，
并明显降低正常小鼠肝组织
中
MDA
水平
，
说明石斛多糖具有显著的抗氧化作用
［
31
，
40
］
。
Luo
等在初步的体外活性试验中
，
发现
DNP
对
ABTS
自
由基表现出较高自由基清除活性
（
78．
00%
）
，
尤其在
2．
0
mg
/ml
时清除活性近似于维生素
C
［
30
］
。
DNP
在各浓度点对
羟基自由基的清除效果都弱于维生素
C
，
但在
0．
5
mg
/ml
时
清除活性近似于维生素
C
（
50．
09%
～
60．
02%
）
。
但
DNP
在
9
5
8
3
42
卷
13
期
安凤娟等
金钗石斛多糖的研究进展
每个浓度点对
DPPH
自由基表现出非常低的自由基清除活
性
，
且比维生素
C
低得多
。
因此
，
DNP
对
DPPH
自由基清除
无显著作用
。
综上所述
，
DNP
可作为一种新的潜在的抗氧
化剂
。
Luo
等还发现纯化的多糖对
ABTS
自由基清除能力随浓
度增加而增加
。
此外
，
DNP4-
2
对
ABTS
自由基表现出较高
的自由基清除活性近似于维生素
C
［
41
］
。
在
2．
0
mg
/ml
时
DNP4
-2
的清除能力最强
，
达到
82．
6%
（
P
＜
0．
05
）
。
ABTS
自由基清除能力为维生素
C
＞
DNP4-
2
＞
DNP2-
1
＞
DNP3-
1
＞
DNP1-
1
。
这些结果表明
，
DNP4-
2
对
ABTS
自由基具有较强
的清除活性
，
并应作为潜在的抗氧化剂
DNP4-
2
对羟基自由
基清除活性比
DNP1-
1
、
DNP2-
1
和
DNP3-
1
强
（
P
＜
0．
05
）
，
但
在
0．
1
～
2．
0
mg
/ml
的范围内大大低于维生素
C
。
DNP1-
1
、
DNP2-
1
和
DNP3-
1
对
DPPH
自由基表现出非常低的自由基
清除活性
。
而在
1．
0
mg
/ml
时
DNP4
-
2
的作用稍强
（
38%
）
，
但是比维生素
C
低得多
（
95%
）
。
宾捷等发现金钗石斛多糖能有效抑制自然衰老小鼠体
内
MDA
的升高
，
使机体受自由基攻击程度减低
，
清除自由基
的能力增强
，
抑制和延缓自由基反应
［
42
］
。
同时能增加老龄
小鼠体内抗氧化剂
SOD
、
GSH-
Px
的活性水平
。
综上所述
，
金
钗石斛能有效抑制体内过多的自由基及提高体内抗氧化酶
的活力
。
金钗石斛对老龄小鼠具有抗氧化作用
，
表明金钗石
斛多糖的抗衰老与抗氧化有关
［
26
］
。
3．
3
抗肿瘤活性
从金钗石斛的水提物分离出四种水溶性
多糖
（
DNP1-
1
、
DNP2-
1
、
DNP3-
1
和
DNP4-
2
）
。
肿瘤抑制和免
疫调节活性的评价显示
，
NP4-
2
在
2．
5
mg
/ml
时抑制肿瘤细
胞生长率可达
67．
01%
。
DNP4-
2
能显著增加免疫指标
，
并大
力促进
IL-
2
、
TNF-
α
和
IFN-
γ
的分泌
（
P
＜
0．
01
）
，
同时也降低
MDA
浓度血清
（
P
＜
0．
01
）
。
DNP4-
2
可作为一种潜在的抗肿
瘤新药
。
研究人员认为抗肿瘤的活性是由于
DNP4-
2
优良的
增强免疫和抗氧化活性
［
29
，
31
］
。
Wang
等对金钗石斛多糖的抗肿瘤活性进行了研究
。
体
内活性试验发现
DNP-
W
有
31．
3%
的抑制生物活性
［
43
］
。
对
DNP-
W
进一步分离纯化后
，
结果发现
DNP-
W1
和
DNP-
W3
对
Sarcoma180
肿瘤细胞表现出显著更高的抗肿瘤活性
，
抑制
率分别为
65．
3%
和
61．
2%
。
DNP-
W2
和
DNP-
W4
与
DNP-
W
表现出类似的抗肿瘤活性
，
抑制率分别为
33．
7%
和
33．
4%
。
对于
DNP-
W5
和
DNP-
W6
的抗肿瘤活性数据都在体内表现
出非常低的抗肿瘤活性
，
抑制率分别
10．
3%
和
8．
7%
。
体外活性试验发现
，
所有多糖都表现出对
HL-
60
白血病
细胞的生长有较强的抑制作用
，
特别是
，
DNP-
W1
和
DNP-
W3
在
200
μ
g
/ml
时显著呈现超过
80%
的高抑制率
。
MTT
试
验结果表明
，
金钗石斛多糖是有效的肿瘤细胞生长抑制剂
，
相较于贴壁的
HepG2
肿瘤细胞
，
对悬浮
HL-
60
肿瘤细胞的增
殖表现出选择性高的抗肿瘤活性
。
综上所述
，
DNP-
W1
和
DNP-
W3
可作为潜在的抗白血病资源
，
也可被视为一种有效
的抗肿瘤天然源
。
另一研究发现
，
金钗石斛水提物对
HelaS3
和
HepG2
细
胞有不同程度的抑制作用
，
且在所选浓度范围内成良好的
剂量依赖性和时间依赖性
，
形态学观察结果验证了其抑瘤
作用
［
44
］
。
郑斯卓等
［
45
］
在体外培养人白血病
K562
细胞
，
发现金钗
石斛多糖可抑制
K562
细胞增殖并诱导其凋亡
，
且随剂量和
时间的增加效果增强
；
金钗石斛多糖可使
BCＲ-
ABL
融合基
因表达量下降
，
且随多糖浓度增加和作用时间延长
mＲNA
表
达量下降明显
。
金钗石斛多糖能直接抑制
K562
细胞增殖并
诱导其凋亡
，
其可能机制与金钗石斛多糖抑制
K562
细胞中
BCＲ-
ABL
融合基因
mＲNA
的表达有关
。
金钗石斛多糖可诱
导
K562
细胞凋亡
，
且这种促凋亡的效应随着浓度和时间的
增加而增加
。
金钗石斛多糖可有效抑制
BCＲ
/ABL
融合基
因
，
并随浓度和作用时间的延长
，
抑制效果增强
，
由此可以推
断金钗石斛多糖可能通过抑制
BCＲ
/ABL
融合基因的表达来
诱导
K562
细胞凋亡
，
从而达到抗肿瘤效果
。
3．
4
抗白内障
金钗石斛对眼科疾病有明显的治疗作用
。
其多糖具有较好的抗糖性白内障作用
，
可下调
iNOS
基因的
表达
，
明显抑制
NOS
的活性
，
减少
NO
的产生
，
从而减轻氧化
损伤作用
，
达到抗白内障作用
。
体外研究表明
，
金钗石斛的
总生物碱和粗多糖均有一定的抗白内障作用
，
而总生物碱的
作用优于粗多糖
［
19
，
46
－
47
］
。
王军辉在抗白内障活性试验中发现
，
金钗石斛水提粗多
糖及各均一多糖组分都对链脲佐菌素
（
STz
）
诱导的糖尿病性
白内障有一定的延缓作用
，
但各多糖处理组之间差异较大
，
以粗多
糖
与
DNP-
W1A
处
理
组
的
效
果
最
好
，
呈
剂
量
依
赖
性
［
32
］
。
试验结束时
，
粗多糖与
DNP-
W1A
处理组大鼠晶体混
浊程度明显低于模型及其他多糖处理组
，
体重增加幅度在
150%
～
190%
，
血糖下降了
25%
以上
，
晶体各清除氧自由基
酶活性及
GSH
含量明显高于
STZ
模型组
，
膜脂过氧化指标
MDA
与
H
2
O
2
、
蛋白质氧化损伤产物
、
糖基化终产物等含量明
显低于
STZ
模型组
。
龙艳等采用体外构建氧化损伤白内障模型的方法
，
对金
钗石斛总生物碱和粗多糖的抗白内障作用进行探讨
［
48
］
。
发
现模型组可溶性蛋白含量显著低于正常对照组
，
而各用药组
可显著缓解可溶性蛋白的减少
，
生物碱高剂量组尤其明显
；
同时
，
金钗石斛的提取物总生物碱和粗多糖均可提高晶状体
GSH
含量及
SOD
活性
，
同时降低
MDA
活性
，
即通过提高晶
状体抗氧化能力而达到抑制白内障的作用
。
石斛具有抗白
内障的作用早已被证实
。
研究发现
，
金钗石斛的两种药效部
位
（
总生物碱和粗多糖
）
在体外可通过减轻晶状体的氧化损
伤而抑制白内障的进程
，
且总生物碱的效果优于粗多糖
［
49
］
。
3．
5
其他作用
李向阳等观察了金钗石斛多糖对
Wistar
大
鼠高脂血症和肝脏脂肪变性的影响
，
发现金钗石斛多糖能明
显降低高脂血症
Wistar
大鼠血清中总胆固醇
、
甘油三酯和低
密度脂蛋白含量
（
P
＜
0
．
05
）
，
使高密度脂蛋白水平明显升高
（
P
＜
0．
05
）
，
并具有改善高脂血症
Wistar
大鼠肝脏脂肪变性
的作用
［
50
］
。
综上所述
，
金钗石斛多糖对高脂血症大鼠血脂
代谢异常具有调节作用
，
能够有效减轻高脂血症大鼠肝脏组
0
6
8
3
安徽农业科学
2014
年
织的脂肪变性
。
金钗石斛多糖能有效降低高脂血症大鼠血
清中
TC
、
TG
和
LDLC
的含量
，
升高血清中
HDLC
的含量
，
降
低肝脏指数
，
降低肝脏组织中
MDA
的含量和升高
SOD
的活
性
，
并具有减轻高脂血症大鼠肝脏脂肪变性作用
。
李菲等观察金钗石斛多糖和生物碱对正常小鼠及肾上
腺素性高血糖小鼠血糖的影响
［
51
］
。
金钗石斛多糖和生物碱
对肾上腺素引起的高血糖小鼠有明显的降血糖作用
，
但对正
常小鼠血糖无明显影响
。
研究结果表明
，
金钗石斛多糖和生
物碱均能显著降低肾上腺素所致小鼠血糖升高
，
可能机制是
抑制肝糖元分解和肌糖元酵解
，
促进外周组织对葡萄糖的摄
取和利用
，
从而降低血糖
。
陶凤研究发现
，
金钗石斛明显性降低血糖
、
糖化血红蛋
白
、
血尿素
、
24
h
尿白蛋白水平
、
肾脏指数
、
增加肌酐清除率
、
减轻系膜的扩张和基底膜的增厚
，
从而表明金钗石斛水提物
有可能通过降低血糖延缓糖尿病肾病的发生发展
［
52
］
。
这也
证实了金钗石斛水提物能通过降低血糖
、
抑制非酶糖基化和
氧化应激的发生
，
改善糖尿病大鼠肾功能
、
减轻其病理变化
，
从而延缓糖尿病肾病的发生发展
，
为探讨金钗石斛对糖尿病
肾保护作用机制奠定了基础
。
金徽发现金钗石斛水煎剂能减少大鼠血清中
AGE
的生
成
，
下调肾组织中受体蛋白
ＲAGE
的含量
，
可能的机理是其
降低血糖减少糖基化反应进程及其修饰生物大分子导致蛋
白质理化性质改变
，
易被酶降解使其含量减少
，
或蛋白非酶
糖基化反应减轻
，
从而对
DM
大鼠的肾脏起到了积极的保护
作用
［
53
］
。
金钗石斛通过抑制蛋白非酶糖基化来保护
DM
大
鼠肾脏的机制可能是因为金钗石斛具有降血糖和抗氧化作
用
，
对高血糖诱导的
AGE
形成具有一定的抑制
。
因此使
AGE
生成量减少
，
血液中
AGE
的含量降低
，
从而减少
AGE
在肾小球系膜及基膜的沉积
；
另外
，
金钗石斛提取物可以降
低
DM
大鼠血清中
AGE
的水平
，
也可能对
AGE-
ＲAGE
具有
直接抑制作用
，
使得
AGE
与
ＲAGE
相互作用所介导的细胞
生物学效应
、
细胞内信号传导改变
、
激活核转录因子等一系
列反应减少
，
从而减缓了肾小球及血管内皮细胞的损伤
。
张艳磊等研究认为
，
金钗石斛多糖
FDP1
可以抑制高糖
诱导下的
HBZY-
1
细胞总抗氧化能力的下降
、
ＲOS
生成的增
加
；
并能够促进
Nrf2
的核移位
，
并能增加其表达量
，
使更多处
于激活状态的
Nrf2
蛋白参与到提高机体自身对于氧化还原
稳态的反馈调节
［
54
］
。
其可以上调其下游
NADPH
醌氧化物
还原酶等大部分抗氧化物酶与抗氧化分子
，
参与对氧化应激
的抑制
，
保护细胞正常的代谢运行
，
为金钗石斛多糖对于糖
尿病肾病的防御保护的作用机制提供一定的理论基础
。
Pan
等比较了
4
种石斛多糖的降血糖和抗氧化作用
，
发
现除鼓槌石斛多糖
（
DCP
）
外
，
霍山石斛多糖
（
DHP
）
、
铁皮石
斛多糖
（
DOP
）
及金钗石斛多糖
（
DNP
）
，
均能够显著降低四氧
嘧啶糖尿病小鼠的
FBG
和
GSP
，
并能够增加血清胰岛素水
平
，
从而达到降血糖作用
［
55
］
。
降血糖能力
DHP
＞
DNP
＞
DOP
。
组织病理学观察证实
，
DHP
、
DOP
和
DNP
有干预胰腺
组织损伤的能力
。
超氧化物歧化酶的测定
，
肝肾过氧化氢
酶
，
丙二醛和
L-
谷胱甘肽水平显示
DHP
、
DOP
和
DNP
对四氧
嘧啶诱导的氧化损伤有保护作用
，
且
DHP
效果最佳
。
四种
石斛多糖的降血糖和抗氧化作用存在显著差异
，
可能是四种
石斛多糖的理化性质不同
。
4
小结与展望
野生金钗石斛资源日益匮乏
，
积极开发组培金钗石斛
，
对野生石斛资源的保护能起到积极的推动作用
，
而且其低廉
的价格也能满足普通大众的需求
。
并深入研究金钗石斛多
糖成分的作用机制和构效关系
，
为多糖成分的应用提供进一
步的科学依据
，
具有重要的理论意义和临床应用价值
。
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1
6
8
3
42
卷
13
期
安凤娟等
金钗石斛多糖的研究进展
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正交试验优选金钗石斛含片提取工艺
正交试验优选金钗石斛含片提取工艺
安凤娟;何宇新
【期刊名称】《西华大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2015(034)003
【摘要】为找到金钗石斛含片的最佳提取,采用正交试验方法,以总多糖含量、总皂苷含量和干浸膏得率为评价指标,对提取工艺参数进行优化.结果表明:金钗石斛含片的最佳提取条件为提取溶媒体积为金钗石斛质量的8倍,提取次数3次,提取时间1.5h.在最佳提取条件下,总多糖质量分数为78.85 mg/g,总皂苷质量分数为
4.87mg/g,干浸膏得率为18.43％.
【总页数】3页(P101-103)
【作者】安凤娟;何宇新
【作者单位】西华大学食品与生物工程学院,四川成都610039;西华大学食品与生物工程学院,四川成都610039
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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3.浅谈应用正交试验法优选清润含片的提取工艺 [J], 王玉
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5.浅谈应用正交试验法优选清润含片的提取工艺 [J], 王玉;
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金钗石斛多糖对秀丽隐杆线虫衰老的影响
金钗石斛多糖对秀丽隐杆线虫衰老的影响张宗敏;潘先花;周姝;周满红【摘要】目的研究金钗石斛多糖(DNP)对秀丽隐杆线虫衰老的影响,并初步探讨其机制.方法设立金钗石斛多糖组(0.06、0.12、0.24 mg/mL)、PBS缓冲液组及空白对照组(0 mg/L),观察金钗石斛多糖对N2野生型秀丽隐杆线虫的寿命及生理指标(生殖能力、咽泵频率和身体摆动频率)的影响.通过进行线虫的氧化应激实验和热应激实验,初步探讨金钗石斛多糖延缓衰老的机制.结果在寿命实验中,金钗石斛多糖组线虫的平均寿命较空白对照组显著延长(P＜0.05),PBS缓冲液组较空白组差异无统计学意义(P＞0.05);在生殖能力、咽泵频率和身体摆动频率实验中,金钗石斛多糖组较空白对照组差异无统计学意义(P＞0.05);在氧化应激实验和热应激实验中,金钗石斛多糖组线虫的平均生存时间较空白对照组明显延长(P＜0.05).结论金钗石斛多糖能延缓秀丽隐杆线虫衰老,其机制可能与金钗石斛多糖提高线虫的抗应激能力有关.【期刊名称】《贵州医药》【年(卷),期】2018(042)008【总页数】4页(P913-916)【关键词】金钗石斛多糖;秀丽隐杆线虫;衰老【作者】张宗敏;潘先花;周姝;周满红【作者单位】遵义医学院附属医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属医院,贵州遵义563003【正文语种】中文【中图分类】R-33;R34金钗石斛(Dendrobium nobile)为兰科石斛属多年生草本植物，主要以新鲜或干燥茎入药，药用范围广且安全；其中，多糖是其主要的有效成分，具有调节免疫、抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、保肝、降低血糖等功效[1-2]。
然而，具体到金钗石斛多糖对生物体寿命有无延长作用，由于可能受到观察不便(人类及一般动物寿命都较长)、外界环境(生存环境复杂)等原因的限制，没有恰当的动物模型，因而目前尚缺少相关研究数据。
金钗石斛多糖减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退及机制研究的开题报告
金钗石斛多糖减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退
及机制研究的开题报告
一、研究背景及意义
脂多糖是一类能够激活免疫系统的大分子多糖，长期暴露于脂多糖环境下，容易引起学习记忆减退等不良反应。
因此，寻找具有治疗作用的药物成为了当前研究的热点，其中金钗石斛多糖是一种植物提取物，具有显著的抗炎和抗氧化作用，同时具有很好的生物相容性，因此被广泛应用于相关领域。
本研究旨在探讨金钗石斛多糖对脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退的作用及其机制。
二、研究内容及方法
本研究将采用体重相似的健康雄性SD大鼠，诱导其脂多糖环境并分为对照组、模型组、金钗石斛多糖高、中、低剂量组。
治疗期为4周，每周2次，观察治疗前后大鼠体重变化、学习记忆能力、电学信号变化及相关脑区组织学变化。
学习记忆能力将通过Morris水迷宫实验进行检测，电学信号变化将通过多通道脑电图检测仪进行检测，并记录相关参数。
相关脑区组织学变化将通过苏木精-伊红染色法进行检测。
三、预期研究结果
本研究预计将探讨金钗石斛多糖对脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退的作用，同时研究其通过改善大鼠脑内电学信号变化及相关组织学变化实现治疗的机理。
四、研究意义及应用前景
本研究可为探索金钗石斛多糖在治疗脂多糖相关损害中的作用提供实验基础和理论依据，并可为该领域的药物研究提供新的思路和方向。
最终结果也有助于进一步推动金钗石斛多糖在临床应用中的推广及其应用前景的拓展。
金钗石斛倍半萜类成分研究进展
1838
天然产物研究与开发
Vol. 31
1化学成分 1.1 Picrotoxane 型倍半砧
Picrotoxane型倍半菇成分是金钗石斛中特殊的 一类化学成分，含有多个手性中心⑺，主要以picro
toxane 型生物碱和非生物碱两种形式存在。迄今为
止，从金钗石斛中分离得到picrotoxane型生物碱倍 半菇13个,picrotoxane型非生物碱18个。 1.1.1 Picrotoxane类生物碱倍半菇
天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2019,31 ： 1837-1845
金钗石斛倍半菇类成分研究进展
王晓雅▽，蒙春旺V,周勤梅2**
|成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验பைடு நூலகம்； 2成都中医药大学西南特色药材创新药物成分研究所，成都611137
摘要:金钗石斛为传统名贵中药，药用历史悠久。现代研究发现金钗石斛中含有倍半话类、寒类、黄酮类、以及多
收稿日期=2019-05-29
接受日期=2019-09-24
基金项目:四川省青年科技创新研究团队专项(2017TD0001,
2016TD0006)，成都中医药大学“杏林学者”学科人才
提升计划(YXRC2018005, BSH2018009)；川产道地药
材综合研究与应用开发创新团队(CXTD2018012)
糖等多种化学成分，其中倍半话类报道较多，且以结构特殊的picrotoxane型为代表，同时发现金钗石斛倍半话具有神 经保护、免疫调节、抗肿瘤等方面的生理活性。因此,本文对金钗石斛中的倍半蒂类成分进行总结归纳，为其进一步
研究提供参考。
关键词:金钗石斛;倍半话;化学成分;药理活性
中图分类号:R284
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金钗石斛的功效介绍
金钗石斛，金钗石斛的食用方法
金钗石斛的形态特征
金钗石斛的作用是什么
原文链接: 金钗石斛多糖的研究进展 https://www.huajiangbk.com/newsview2606780.html
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