一种大樱桃砧木克雷姆斯克5号组织培养快速繁殖方法
本发明属于植物人工繁殖,尤其涉及一种大樱桃砧木克雷姆斯克5号组织培养快速繁殖方法。
背景技术:
1、樱桃组织培养技术是利用樱桃的茎尖、茎段、子叶、根尖、种子和花器官等外植体都可以诱导出植株;始于20世纪70年代末,经过20多年的研究发现,野生樱桃外植体的最佳接种时间为4~5月,在试管苗移栽前应用无激素的液体培养或固体培养效果都很好,器官中茎段培养外植体的增殖系数最好。
2、山东省果树研究所从吉塞拉6实生苗中选出可育的四倍体品种,其生长势比吉塞拉6强,大樱桃的矮化栽培技术研究已有重大突破,吉塞拉系列特别是吉塞拉5号、吉塞拉6号矮化砧适应性广,矮化性强,表现突出,用其嫁接的甜樱桃表现树体矮化、结果早、抗病能力强,是优良的樱桃矮化砧木。但是,因此吉塞拉6为三倍杂交体,其生根率低,无法进行自然繁殖,进而无法大量推广;并且在西北等地区生长情况明显次于南方。
3、克雷姆斯克5号砧木是由俄罗斯育成的半矮化砧木,与“吉塞拉6”相比,该砧木早产性和丰产性稍差,但土壤适应性广,抗寒性能好,目前,勃艮第珍珠、珊瑚香槟、黑珍珠等世界有名的大樱桃都适合这种砧木,所以研究出一种能够让其快速繁殖的体系后,将能够投入大规模的生产,可以带来极大的经济效益。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种大樱桃砧木克雷姆斯克5号组织培养快速繁殖方法,该方法通过组织培养出适合克雷姆斯克5号砧木的樱桃外植体,并能实现根系繁殖,且适合大部分的土壤和气候。
2、为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、一种大樱桃砧木克雷姆斯克5号组织培养快速繁殖方法,包括如下步骤:
4、(1)外植体的选择
5、选取4月初克雷姆斯克5号樱桃树的新稍或者带腋芽的未木质茎段,并将茎段剪切成带芽的3~5cm小段,并将其存放在温度为4℃环境中;
6、采用洗洁精溶液对带芽的小段浸泡8min,然后采用纱布将浸泡后的小段包覆后在流动水下冲洗5min,然后再转移到无菌环境中,采用0.1%的hgcl2溶液振荡8min,并采用无菌水冲洗3次后获得外植体;
7、(2)初代培养
8、将外植体垂直接入初代培养基wpm+6-ba0.2mg/l+iba0.02mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6.5g/l中,每瓶接种1株,然后放入培养室中进行培养,培养条件温度20~26℃,每天光照10~12小时和光照强度为800~1000lx的条件下培养4周,获取分化苗;
9、(3)继代培养
10、选取健康、生长良好的初代组分化苗,剪切后接种到增殖培养基wpm+6-ba0.3mg/l+iba0.03mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6.5g/l上进行继代增殖,每瓶接种1株;然后放入培养室中进行培养,培养条件为温度20~26℃,每天光照10~12小时和光照强度为800~1000lx,培养4周,获取继代苗;
11、(4)生根培养
12、选取高于3cm且健壮的继代苗,由茎基部剪切后接种到生根培养基wpm+0.05mg/liaa+蔗糖30g/l+琼脂6.5g/l上进行生根培养,每瓶接种1株;然后放入培养室中进行培养,培养条件温度20~26℃,每天光照10~12小时和光照强度为800~1000lx的条件下培养3周,获培苗;
13、(5)炼苗移栽
14、将培苗的培养基转移到自然光环境下,先进行封闭炼苗,自然光照射下3d,然后继续开放炼苗3d;炼苗完成后进行移栽;
15、用镊子将生根苗从培养瓶中取出,用自来水将其根部的培养基冲洗干净,移入已混好有机质:蛭石=1:1基质的苗盘,浇足水,喷施多菌灵,转入驯化室培养30d,而后选择健壮的移栽苗转至温室土壤中栽种。
16、本发明以0.1%的hgcl2溶液进行灭菌处理,采用wpm+6-ba0.2mg/l+iba0.02mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6.5g/l作为初代培养基,采用wpm+6-ba0.3mg/l+iba0.03mg/l+蔗糖30g/l+琼脂6.5g/l增殖培养基,采用wpm+0.05mg/l iaa+蔗糖30g/l+琼脂6.5g/l生根培养基,最后以机质和蛭石为介质增强根系,大大提高了移栽存活率。
技术特征:
1.一种大樱桃砧木克雷姆斯克5号组织培养快速繁殖方法,其特征在于包括如下步骤:
技术总结
本发明公开了一种大樱桃砧木克雷姆斯克5号组织培养快速繁殖方法,该方法以0.1%的HgCl2溶液进行灭菌处理,采用WPM+6‑BA0.2mg/L+IBA0.02mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L作为初代培养基,采用WPM+6‑BA0.3mg/L+IBA0.03mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L增殖培养基,采用WPM+0.05mg/L IAA+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L生根培养基,最后以机质和蛭石为介质增强根系,大大提高了移栽存活率。
技术研发人员:纠松涛,张才喜,胥杰明,杨琪,刘瑞娥,王世平,王磊,徐岩,吕正鑫,王雨萱
受保护的技术使用者:上海交通大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/13
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