玉簪繁殖与组织培养技术的研究.doc
玉簪繁殖与组织培养技术的研究 摘要:玉簪是重要的园林绿化植物,本文概述了玉簪的繁殖方式及影响玉簪植物组织培养的各种因素。主要评述了玉簪组织培养过程中的外在因素和内在因素两方面影响。为大量获得同步化玉簪苗木提供了新的思路。 关键词:植物组织培养;愈伤组织;玉簪 中图分类号:S682.19文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2016) 10(c)-0000-00 玉簪是重要的荫生地被绿化植物,具有丰富的叶型、株型,且部分种(品种)的花拥有芳香气味,是优秀的城市生态、园林建设植物。 野生玉簪属植物资源主要存在于东亚的温带与亚热带地区,原产于我国的东部和南部及朝鲜、日本和俄罗斯远东地区。目前分布情况是仅在北半球的亚温带和亚热带地区连续分布,主要包括中国、日本和朝鲜半岛,俄罗斯远东地区。 1.玉簪属植物常规繁殖方式 1.1种子繁殖 玉簪属植物种子结实率低,我国东北地区一般不结种子。种子萌发率在80%-85%之间,幼苗需在无阳光直射处生长。种子繁殖的植株3-4年才能开花,繁殖速度慢,因此实际生产中基本不以种子进行繁殖。 1.2分株繁殖 在玉簪的生产中最常用分株繁殖。一般玉簪每年可分蘖3-5个芽,分株时要将植株整体挖起,以一个芽或者2-3个芽为一株切分并栽培,栽培后要浇透水,并保持土壤湿而不涝。当年即可开花。但季节影响较大,只能于春秋两季进行。目前还有罗斯法、割冠法等。分株法速度慢使其无法短时间提供大量种苗。 2.植物组织培养 植物组织培养是指在无菌的条件下,以植物的组织、器官或者原生质体为外植体,在人工培养基中进行培养,调整适当的培养条件,短时间内生长成完整植株的过程。利用植物组织组培技术进行植物快繁,具有的优势明显,①能高度保持遗传性状稳定,②繁殖系数高,③生产周期很短,④生产过程中占地面积小等,该技术在花卉植物生产中受到越来越多的重视。 3.玉簪组培的影响因素 玉簪离体培养时影响因素众多。根据文献报道,分为外在与内在两种因素,外在因素主要有培养基成份、激素种类与用量等方面;内在因素主要有外植体取材部位、取材时间等。 3.1外在因素 3.1.1 培养基选择 培养基种类的选择直接决定了植物组织培养的成败,不同种类的植物需要使用不同的培养基。目前常用的基本培养基包括B5、N6、SH、White及MS等。不同培养基的主要区别是无机盐含量不同,选择时主要关注其离子的种类以及浓度,特别是硝态氮氨态氮的比例。植物组织培养中最常用的是MS培养基,MS的特点是钾、氮、硝酸盐、铵盐含量高。文献报道玉簪的组织培养多以MS培养基为主。 3.1.2 激素的选择 植物组培过程中,激素的种类、组合及使用浓度发挥着不同的效应,文献报道,玉簪的组织培养的过程中,激素较常用的细胞分裂素有KT-30、BA、TDZ,ZT。常用的生长素有2,4-D、IBA、NAA、IAA。 玉簪的组培中最常用的是BA与NAA组合。如郝砚英等以花叶玉簪甜心、王冠以及法兰西等的芽为外植体进行培养使用的BA与NAA组合。顾德峰等以白玉簪的茎芽为外植体,使用ZT、BA与NAA三种激素组合进行诱导增殖。冯慧等利用法兰西和白玉簪的花作为外植体,用了BA与NAA。王春婷发现对芽、幼花及花葶的诱导诱导和增殖,最佳的激素也是BA与NAA的组合。张洪娣等以紫萼根茎为外植体进行愈伤组织的诱导及分化,发现BA、NAA及2,4-D是最适当的激素组合。 3.1.3 培养条件 培养条件主要包括外在的环境因素及内在的继代周期和继代次数,环境因素主要有光照强度、温度、pH、湿度等。光的主要作用是在培养过程中的形态建成,其中光照强度、光照时间的不同会对外植体材料的培养产生不同的影响,文献指出应根据培养材料的不同,选择不同的光照时间和光强进行培养。大多数植物材料适宜的培养温度约24±2℃。培养基中琼脂用量,直接影响培养瓶中的湿度大小,并影响苗的生长,外植体材料的大小,光照强度与时间及温度的高低等都是影响瓶内湿度的重要因素。培养瓶内湿度太大培养物容易出现玻璃化现象,或者抑制培养材料生长,故应该控制瓶内湿度。瓶内的空气质量及组成直接影响材料的生长及分化,幼苗在瓶内长时间生长会出现生长缓慢甚至叶片发黄脱落,这是由于瓶内的乙烯累积过多造成的。还有的材料继代后或者继代培养时间长些会出现褐化死亡,这主要是培养基中累积的醌类物质对材料的毒害作用引起的。一般情况下,继代周期的延长和继代次数的增加会导致变异频率的上升。 3.1.4 污染的影响 污染主要分为细菌性污染和真菌性污染。细菌性污染在培养的1-3d即可发现,真菌性污染一般3d-15d才有症状出现,主要由霉菌引起。操作不规范、接种室空气不清洁、外植体消毒不彻底、培
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