调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用

本发明涉及调控桃抗蚜性的ppwrky4基因及应用，属于农业生物。

背景技术：

1、桃蚜(myzuspersicae sülzer)，又叫桃赤蚜、腻虫、烟蚜、油汉，属同翅目，蚜科。桃蚜分布范围广，在朝鲜、日本、印度尼西亚、印度以及北美、欧洲、非洲等地均有发生，是世界上分布最广的蚜虫之一，在我国桃主要产区均有分布。桃蚜寄主范围广，可以在50多科400多种植物上取食，主要包括桃、李等蔷薇科植物，油菜等十字花科植物，烟草、马铃薯等茄科植物。并且，桃蚜的传毒能力强，可传播115种植物病毒，占整个蚜虫传播的植物病毒的67.7％。桃蚜会对作物产生严重危害。受桃蚜侵食后的植物幼叶向反面横卷或不规则卷曲，阻碍叶片的营养吸收，使叶片营养恶化，甚至黄落。蚜虫排泄在叶片上的蜜露易诱发霉污病，干扰植物的光合作用，严重影响作物的产量和品质。桃蚜的繁殖力很强，世代重叠现象突出，孤雌繁殖，适应性强，是最难防治的害虫之一。

2、目前，对于桃蚜的防治主要依赖于杀虫剂。但由于近年来烟碱类杀虫剂的广泛使用，桃蚜已经对其产生抗药性，防治难度增加；另外，广谱型杀虫剂的大量使用对授粉昆虫和天敌昆虫也产生严重危害，并对果园的生态环境造成破坏。因此挖掘抗性资源的抗蚜基因、培育抗桃蚜新品种，是桃资源和育种研究工作的重要环节。本发明利用抗蚜资源挖掘到一个参与桃抗蚜过程的wrky基因，为培育抗蚜桃品种奠定了基础。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一个首次从桃中获得的ppwrky4基因，该基因具有调控抗蚜的功能。

2、为了实现上述目的，本发明的技术方案之一是提供：

3、调控桃抗蚜性的ppwrky4基因，所述ppwrky4基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

4、所述ppwrky4基因为完整的编码547个氨基酸的orf。

5、所述ppwrky4基因编码的氨基酸序列如seq id no.2。

6、本发明的技术方案之一是提供：ppwrky4基因在调控桃抗蚜性中的应用。

7、具体的，在蚜虫侵染后，所述ppwrky4基因在桃叶片中被诱导表达。

8、具体方法为：所述ppwrky4基因与载体pri101-an正向连接后得到pri101-ppwrky4重组表达载体，将所述pri101-ppwrky4重组表达载体转化到dh5α大肠杆菌中，筛选阳性菌提取质粒，将测序验证过表达载体中的ppwrky4基因序列正确的质粒转化农杆菌菌株gv3101，制备侵染液，将拟南芥植株的地上部位倒置于侵染液中，暗培养过夜，即可正常栽培管理。

9、本发明的有益效果：

10、本发明以蚜虫接种前后的抗蚜桃品种叶片为材料进行转录组测序，首次发现ppwrky4基因对于蚜虫抗性的影响。同时本发明通过将ppwrky4过表达载体转化到拟南芥中进行验证，结果证明过表达ppwrky4基因的拟南芥上蚜虫数目明显少于野生型。本发明为培育抗蚜桃品种奠定了基础。

技术特征：

1.调控桃抗蚜性的ppwrky4基因，其特征在于，所述ppwrky4基因的核苷酸序列如seqid no.1所示。

2.根据权利要求1所述的ppwrky4基因，其特征在于，所述ppwrky4基因为完整的编码547个氨基酸的orf。

3.根据权利要求2所述的ppwrky4基因，其特征在于，所述ppwrky4基因编码的氨基酸序列如seq id no.2。

4.ppwrky4基因在调控桃抗蚜性中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在蚜虫侵染后，所述ppwrky4基因在桃叶片中被诱导表达。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，具体方法为：所述ppwrky4基因与载体pri101-an正向连接后得到pri101-ppwrky4重组表达载体，将所述pri101-ppwrky4重组表达载体转化到dh5α大肠杆菌中，筛选阳性菌提取质粒，将测序验证过表达载体中的ppwrky4基因序列正确的质粒转化农杆菌菌株gv3101，制备侵染液，将拟南芥植株的地上部位倒置于侵染液中，暗培养过夜，即可正常栽培管理。

技术总结
本发明公开了调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用，所述PpWRKY4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述PpWRKY4基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2。本发明以蚜虫接种前后的抗蚜桃品种叶片为材料进行转录组测序，首次发现PpWRKY4基因对于蚜虫抗性的影响。同时本发明通过将PpWRKY4过表达载体转化到拟南芥中进行验证，结果证明过表达PpWRKY4基因的拟南芥上蚜虫数目明显少于野生型。本发明为培育抗蚜桃品种奠定了基础。

技术研发人员：王力荣,王君秀,李勇,曹珂,朱更瑞,王新卫,陈昌文,方伟超,吴金龙
受保护的技术使用者：中国农业科学院郑州果树研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11

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