微需氧和二氧化碳培养法
一、微需氧培养
弯曲菌属是微需氧菌,需要在含有5%〜10%氧和大约10%二氧化碳的气体中生长。对于一些其他的细菌的分离,也需要类似的气体环境。
1.外部气体供应装置
所需的气体可以由外部气瓶来供给,气瓶含有所需的气体混合物,同时应使用有进气阀、出气阀和压力计的厌氧罐,但不要用催化剂。将厌氧罐抽至罐内压力约为35kPa,然后用95%的氮和5%的二氧化碳的混合气体使罐内压力达到大气压力。
2.产气囊或吸氧囊
这种培养装置有两种类型。一种是使用氢气囊或产二氧化碳气囊.被用于有冷催化剂的合适规格的厌氧罐中。使用时使氢气略低于罐内的氧的含量,以至氧气不至于被全部诮耗掉,使最终的气体能够维持微需氧的生长。
另一种是使用气囊和二氧化碳发生器,气嚢中含有能够吸收氧气的物质(例如抗坏血酸或细铁屑)。能吸收氧的化合物的量必须根据容器的体积仔细地计算,这样就可得到合适的氧气含量。
二、二氧化碳培养
有几种细菌是嗜二氧化碳的,它们只能在浓度很高的二氧化碳环境中生长或生长得
更好。一些厌氧菌和微需氧菌也需要增加二氧化碳的浓度。
在实验室内提供一个富含二氧化碳的厌氧气体要相对容易些。把培养皿或试管放入一个约半截饼干罐大小的容器(约22cm×20cm×12cm)或其他相同容积的容器中,同时放入一个含有15m l2mol/L HCL的烧杯。在酸中加入1~1.2g大理石碎屑,盖住盖子。用PVC胶带将盖子密封。在罐中,大理石会与盐酸发生反应释放出含量约为5%的二氧化碳。
另外,还可以选择二氧化碳发生气囊。
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