赤霉素调控拟南芥叶腋分生组织起始的分子机制研究

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第一章文献综述

1．1赤霉素简介

1．1．1发现历程

1．1．2合成

1．1．3赤霉素失活降解

1．2赤霉素研究进展

1．2．1信号转导

1．2．2生物学功能

1．3植物腋芽发育调控的研究进展

1．3．1腋芽分生组织发育模式

1．3．2腋芽发育的基因调控

1．3．3植物激素对腋芽发育的交叉调控

1．4植物腋芽特异性转录因子SPL9研究进展

2．1植物材料

2．2常用载体与菌株

2．3常用培养基

2．4实验试剂

2．4．1酵母双杂交(Y2H)相关试剂

2．4．2拟南芥浸染液配方

2．4．3烟草叶片转化侵染液配方

2．4．4拟南芥DNA提取相关试剂EB buffer

2．4．5 DNA-蛋白pull-down实验相关试剂

2．4．7Western blot相关试剂

2．5实验方法

2．5．1拟南芥种子灭菌

2．5．2植物培养

2．5．3杂交

2．5．4植物基因组DNA粗提

2．5．5农杆菌介导的拟南芥转化

2．5．6农杆菌介导的烟草瞬时转化

2．5．7RNA提取

2．5．8酵母双杂

2．5．9蛋白诱导

2．5．9蛋白纯化

2．5．10Westem blot

2．5．12DNA-蛋白Pull-down实验

第三章结果与分析

3．1赤霉素抑制腋芽起始

3．1．1赤霉素处理抑制莲座叶腋芽的形成

3．1．2DELLAs蛋白促进腋芽的形成

3．1．3内源GAs缺失促进腋芽形成

3．2DELLAs与SPL9互作

3．2．1酵母双杂实验验证DELLAs蛋白与SPL9互作

3．2．2双分子荧光互补实验证明DELLAs蛋白与SPL9蛋白在细胞核内互作

3．2．3Pull-down实验证明DELLAs蛋白与SPL9蛋白在体外互作

3．3SPL9抑制腋芽起始

3．4GA通过SPL9抑制LAS的表达

3．4．1LAS基因参与了GA调控腋芽起始的网络

3．4．2SPL9抑制LAS基因的表达

3．4．3DELLAs抑制SPL9蛋白结合LAS启动子

3．4．4检测pRGA:RGAd17／pSPL9:rSPL9植株中LAS的表达量升高

3．4．5DELLAs蛋白抑制SPL9的活性，使得腋芽比例升高

3．5LAS诱导GA降解酶GA2ox4的表达

3．5．2LAS蛋白可以与GA2ox4启动子结合

3．5．3LAS蛋白促进由GA2ox4启动子驱动的荧光素酶的表达水平升高

3．6在叶腋处特异增加GAs的浓度会抑制腋芽的形成

4．1结论与讨论

4．2本文的创新点

4．3本文的不足

参考文献

致谢

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