一种快速繁殖蒲公英的组织培养方法及其所用培养基与应用
本发明涉及植物组织培养领域,尤其涉及一种快速繁殖蒲公英的组织培养方法及其所用培养基与应用。
背景技术:
1、蒲公英( taraxacum mongolicumhandel-mazzetti)为菊科(compositae)蒲公英属(taraxacum weber)植物,将该属植物统称为蒲公英,蒲公英属有约2 000 余种,主产于北半球温带至亚热带地区,少数产热带南美洲。蒲公英味甘、苦、性寒、无毒,归肝、胃经,是传统的中药材,具有清热解毒,消肿散结,利尿通淋之功效,现代药理研究表明,它有良好的抗菌消炎、利胆保肝和免疫促进作用。目前主要采用野外采集供应市场需求,蒲公英为药食同源植物,含有多种营养物质和具有保健作用的化学物质,随着人们对蒲公英的不断研究和产品开发,必将会出现供不应求的现象。本发明利用植物组织培养进行蒲公英的种苗培养,探索蒲公英组培快繁的方法,为蒲公英的研究与种苗的生产提供技术支持。
技术实现思路
1、为了达到蒲公英组织培养快速繁殖的目的,通过利用蒲公英叶片为外植体进行愈伤诱导、芽诱导和生根培养,大大提高了诱导率、生根率和繁殖效率,生根快速,缩短了育苗周期,建立了一种优质、高效的组培扩繁方法。
2、为解决上述技术问题,本发明提供了一种快速繁殖蒲公英的组织培养方法,以蒲公英叶片为外植体进行愈伤诱导获得愈伤组织,对所述愈伤组织进行芽诱导获得丛生芽,将所述丛生芽生根获得蒲公英组培苗;
3、所述进行愈伤诱导所用培养基中植物生长调节剂的种类和含量为:6-苄氨基嘌呤1.0-2 mg /l、萘乙酸0.3-0.7 mg /l和噻苯隆0.2-0.4 mg /l;优选为6-苄氨基嘌呤1.5 mg/l、萘乙酸0.5 mg /l和噻苯隆0.2 mg /l。
4、上述方法中,所述进行愈伤诱导所用培养基为向ms基本培养基中加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。
5、上述方法中,所述进行愈伤诱导所用培养基的凝固剂为琼脂。
6、上述方法中,所述进行愈伤诱导所用培养基中蔗糖的含量为30 g/l,琼脂的含量为 7-9 g/l,ph 值为5.8-6.0。
7、上述方法中,所述愈伤诱导,培养15-30天。
8、上述方法中,所述愈伤诱导的培养条件为温度22-25℃,光照强度1500-3000 lx,每日光照12-15 h。
9、上述方法中,所述进行芽诱导所用培养基中植物生长调节剂的种类和含量为6-苄氨基嘌呤2 mg /l、吲哚丁酸0.3-0.5 mg /l。
10、上述方法中,所述进行芽诱导所用培养基为以向ms基本培养基中加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。
11、上述方法中,所述进行芽诱导所用培养基为以向ms基本培养基中加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。
12、上述方法中,所述芽诱导所用培养基的凝固剂为琼脂。
13、上述方法中,所述芽诱导所用培养基中蔗糖的含量为30 g/l,琼脂的含量为 7-9g/l,ph 值为5.8-6.0。
14、上述方法中,所述芽诱导,培养30天。
15、上述方法中,所述芽诱导的培养条件为温度22-25℃,光照强度1500-3000 lx,每日光照12-15 h。
16、上述方法中,所述生根所用培养基中植物生长调节剂的种类和含量为0.5-2 mg/l吲哚丁酸。
17、上述方法中,所述生根所用培养基为以向1/2 ms基本培养基中加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。
18、上述方法中,所述生根所用培养基的凝固剂为琼脂。
19、上述方法中,所述生根所用培养基中蔗糖的含量为30 g/l,琼脂的含量为 7-9 g/l,ph 值为5.8-6.0。
20、上述方法中,所述生根,培养10-21天。
21、上述方法中,所述生根的培养条件为温度22-25℃,光照强度1500-3000 lx,每日光照15 h。
22、上述方法中,所述蒲公英叶片为无菌叶片。
23、所述无菌叶片,来自a1或a2:
24、a1、将蒲公英种子消毒后于ms固体培养基中培养得到无菌苗,采集所述无菌苗上较大较嫩的叶片得到无菌叶片;
25、a2、从所述蒲公英组培苗上采集较大较嫩的叶片,得到无菌叶片。
26、本发明的快速繁殖蒲公英的组织培养方法,还包括将蒲公英组培苗炼苗后移栽定植的步骤。
27、本发明还保护上述芽诱导所用培养基。
28、本发明还保护所述方法或所述培养基在蒲公英生产中的应用。
29、本发明快速繁殖蒲公英的组织培养方法具有如下有益效果:
30、(1)具有生产能力强、培养周期短、增殖系数高、种苗抗性强等特点。
31、(2)由于采用组织培养的无性繁殖技术,不但能够保持母本的优良性状,而且能够获得脱毒种苗。
32、(3)培养基配制简单易得。
技术特征:
1.一种快速繁殖蒲公英的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:以蒲公英叶片为外植体进行愈伤诱导获得愈伤组织,对所述愈伤组织进行芽诱导获得丛生芽,将所述丛生芽生根获得蒲公英组培苗;
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述进行芽诱导所用培养基中植物生长调节剂的种类和含量优选为6-苄氨基嘌呤2 mg /l、吲哚丁酸 0.3-0.5 mg /l。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述进行生根培养所用培养基中植物生长调节剂的种类和含量为:吲哚丁酸 0.5-2 mg /l。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述进行愈伤诱导所用培养基和所述进行芽诱导所用培养基均为以向ms基本培养基中加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基;所述进行生根诱导所用培养基为以向1/2 ms基本培养基中加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述进行愈伤诱导所用培养基、所述进行芽诱导所用培养基和所述进行生根所用培养基的凝固剂均为琼脂。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述进行愈伤诱导所用培养基、所述进行芽诱导所用培养基和所述进行生根所用培养基中蔗糖的含量均为30 g/l,琼脂的含量均为7-9 g/l,自然ph 5.8-6.0值。
7.根据权利要求1-6任一所述的方法,其特征在于,所述蒲公英叶片为无菌叶片。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述无菌叶片,来自a1或a2:
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述愈伤诱导,培养15-25天;所述芽诱导,培养30天;所述生根培养,培养10-21天;所述培养在温度22-25℃,光照强度1500-3000 lx,每日光照12-15 h的条件下进行。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括将蒲公英组培苗炼苗后移栽定植的步骤。
技术总结
本发明涉及植物组织培养领域,具体公开了一种快速繁殖蒲公英的组织培养方法,包括如下步骤:以蒲公英叶片为外植体进行愈伤诱导获得愈伤组织,对所述愈伤组织进行芽诱导获得丛生芽,将所述丛生芽生根获得蒲公英组培苗。本发明快速繁殖蒲公英的组织培养方法通过利用蒲公英叶片为外植体,经脱分化诱导愈伤组织,愈伤组织再分化生芽,单芽生根,建立了一种优质、高效的组培扩繁方法。
技术研发人员:李晓琳,周俊辉,闫志华
受保护的技术使用者:中国中医科学院中药研究所
技术研发日:
技术公布日:2025/4/7
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