兰州大学刘志鹏团队发现核转运因子MsNTF2L正向调控紫花苜蓿耐旱性
紫花苜蓿(Medicago sativa)被誉为“牧草之王”,具有同源四倍体、多年生的特性。紫花苜蓿是全球栽培最广的豆科牧草,是美国第四大作物。据统计,我国紫花苜蓿种子80%以上依赖进口。我国紫花苜蓿的主栽区位于干旱、半干旱地区,干旱严重制约着紫花苜蓿干草的产量和品质。因此,亟需开展紫花苜蓿耐旱机理研究,为抗逆高产优质分子设计育种奠定理论基础。
近日,兰州大学草种创新与草地农业生态系统全国重点实验室、草地农业科技学院 刘志鹏教授团队在国际植物学知名期刊 The PlantJournal在线发表了题为“NUCLEAR TRANSPORT FACTOR 2-LIKE improves drought tolerance by modulating leaf water loss in alfalfa (Medicago sativa L.)”的研究论文,详细揭示了核转运因子MsNTF2L(NUCLEAR TRANSPORT FACTOR 2-like)正向调控紫花苜蓿耐旱性的作用机制。
试验室前期开展紫花苜蓿转录组测序,挖掘了一批紫花苜蓿耐旱候选基因,发现了一个功能未知的核转运因子MsNTF2L,其同源基因的功能也未见在植物中报道。在此基础上,发现MsNTF2L受到干旱、ABA和盐的显著诱导,其蛋白定位在细胞核、细胞质和细胞膜上。将MsNTF2L在拟南芥中过表达,发现转基因植株在种子萌发和幼苗生长阶段对ABA表现出敏感表型;但是显著提高了植株在萌发期、幼苗期及成苗期的耐旱性,表现出更高的萌发率、根长、鲜重和存活率,以及更低的活性氧水平。
随后,以紫花苜蓿(WT )为受体,获得了紫花苜蓿MsNTF2L过表达OE 株系和RNAi株系,并在温室条件下对转基因株系开展了同盆和不同盆的干旱比较实验。结果发现,过表达MsNTF2L可以通过促进ROS清除、增加根系长度、降低气孔密度、加快ABA诱导的气孔关闭、促进表皮蜡质积累、以及提高植物光合能力赋予植物耐旱性;而RNAi植株表现出相反的表型(图1和图2)。接着,对紫花苜蓿WT、OE和RNAi 株系进行转录组分析发现,大量涉及ABA/胁迫信号转导、抗氧化防御和渗透调节相关的基因在干旱处理中差异响应。此外,对紫花苜蓿WT、OE和RNAi 株系的营养品质分析发现,在正常和干旱条件下,紫花苜蓿OE株系的干物质含量、粗蛋白含量、相对饲喂价值等指标与WT相比都无明显差异。
图1.MsNTF2L过表达和RNAi 紫花苜蓿植株的耐旱性评价
图2.MsNTF2L介导的叶片失水率与气孔密度、ABA诱导的气孔关闭,以及叶表皮蜡质积累有关
总之,该研究证实MsNTF2L是调控紫花苜蓿耐旱性方面的一个正向调控因子,通过调节叶片水分散失(与气孔和表皮蜡质相关)、抗氧化防御和光合作用,赋予紫花苜蓿耐旱性,为遗传改良紫花苜蓿耐旱性提供了潜在的候选基因(图3)。
图3.MsNTF2L赋予紫花苜蓿耐旱性的模型
作者和基金项目
兰州大学草种创新与草地农业生态系统全国重点实验室、草地农业科技学院萃英博士后罗栋为该文第一作者,刘志鹏教授为通信作者;团队青年研究员方龙发、博士后周强、博士生吴昱果、硕士生刘洁和张茜参与了该研究工作。该研究得到中国科学院战略性先导科技专项(A 类)创建生态草牧业科技体系子课题(XDA26030103)、国家自然科学基金优秀青年基金项目(31722055)和国家自然科学基金面上项目(31672476 )的资助。该团队在紫花苜蓿耐旱方面开展了系统研究,在The Crop Journal、International Journal of Biological Macromolecule、BMC Plant Biology发表论文80 余篇,授权发明专利15件,选育牧草新品种(系)5个,创制转基因紫花苜蓿新材料5份(获批农业农村部中间试验)。
引文全文:Luo Dong, Liu Jie, Wu Yuguo, Zhang Xi, Zhou Qiang, Fang Longfa, Liu Zhipeng. (2022). NUCLEAR TRANSPORT FACTOR 2-LIKEimproves drought tolerance by modulating leaf water loss in alfalfa (Medicago sativaL.). The Plant Journal.
DOI号: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/tpj.15955
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