首页分享器官培养器官培养概述[文字可编辑].ppt

器官培养器官培养概述[文字可编辑].ppt

来源：花匠小妙招时间：2025-08-11 16:58

31 ( 二 ) 影响茎尖培养微繁殖的因素 ? 基因型 ? 外植体的大小 ? 供试植株的生理状态 ? 芽在植株上的部位 ? 供试植株的年龄 ? 培养基 ? 褐变 ? 玻璃化 32 （三）茎段的培养 ? 茎段培养指不带芽和带 1 个以上定芽或不定芽的，包括块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。培养茎段的主要目的是快繁。 ? 优点培养技术简单易行，繁殖速度较快；芽生芽方式增殖的苗木质量好，且无病，性状均一；解决不能用种子繁殖的无性繁殖植物的快速繁殖问题等。 33 图示茎段培养过程健康植株上选健壮的枝梢植株再生培养 75% 酒精 1 分钟 1% 次氯酸钠 0.1% 升汞去叶片用水冲洗茎段 34 (1) 材料的选择和处理 ? 取生长健壮无病虫的幼嫩枝条或鳞茎盘，若是木本，取当年生嫩枝或一年生枝条，剪去叶片，剪成 3-4cm 的小段。取材时注意茎的基部比顶部切段，侧芽比顶芽的成活率低，所以应优先利用顶部的外植体，但由于每个新梢仅一个顶芽，也可利用腋芽，茎上部的腋芽培养效果较好。还应注意尽量在生长期取芽，在休眠期取外植体，成活率降低。如苹果在 3-6 月取材的成活率为 60 ％， 7-11 月下降到 10 ％， 12-2 月都下降 10 ％以下。 35 (2) 培养 ? 最常用的基本培养基为 MS 培养基，加入 3 ％蔗糖，用 0 ． 7 ％的琼脂固化。培养条件保持 25 ℃左右。经培养后茎段的切口特别是基部切口上会长出愈伤组织，呈现稍许增大，而芽开始生长，有时会出现丛生芽，从而得到无菌苗。 ? 在茎段培养中，促进腋芽增殖用 6-BA 是最为有效的，依次为 Kt 和 Zt 等。生长素虽不能促进腋芽增殖，但可改善苗的生长。 GA 对芽伸长有促进作用。 36 （ 3 ）继代 ? 两种途径：一是促进腋芽的快速生长，二是诱导形成大量不定芽。第一种途径的好处是不会产生变异，能保持品种优良特性。且方法简便，可在各种植物上使用，每年从一个芽可增殖 10 万株以上。第二种途径会产生变异。继代增殖过程注意选用培养基和生长调节剂。 37 （ 4 ）生根 ? 降低或除去细胞分裂素而加人生长素。由于在苗增殖时施用了较高浓度的细胞分裂素，并促使苗中保持着一定的量，因此，在生根培养中不需要加细胞分裂素。生长素的浓度， NAA 一般 0 ． 1- 1 ． 0mg ／ L ， IBA 和 IAA 可稍高。 ? MS ， B5 White 等培养基，都可用于诱导生根，但是其含盐浓度要适当加以稀释。前面的几种培养基中，除 White 外，都富含 N ， P ， K 盐，它们都抑制根的发生。因此，应将它们降低到 1 ／ 2 ， 1 ／ 3 或 1 ／ 4 ，甚至更低的水平。 ? 生根培养时增强光照有利于发根，且对成功地移栽到盆钵中有良好作用。故在生根培养时应增加光照时间和光照强度，但强光直接照射根部，含抑制根的生长，所以在生根培养时最好在培养基中加 0 ． 3 ％活性炭，以促进生根。 38 (5) 移植 ? 在驯化时要进行炼苗。然后洗净琼脂，小心移栽，初期湿度要大，基质通气湿润，保湿保温，更要精心管理等。 39 一、定义：离体叶的培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。第三节叶的培养第 3 章器官培养 40 叶培养的意义： ? 1 、是研究叶形态建成、光合作用、叶绿素形成的好方法 ? 2 、通过叶组织的脱分化与再分化以证实叶细胞的全能性 ? 3 、通过叶组织培养，探索离体叶组织培养的条件和影响因素 ? 4 、建立体细胞快速无性繁殖体系 ? 5 、叶细胞培养物经诱变筛选突变体。第三节叶的培养 41 二、叶组织培养的方法 1 、制备外植体：幼嫩叶片 --- 水洗 --- 消毒 --- 无菌水洗。 2 、影响培养因素： 1 ） 6-BA 和 KT 利于芽的形成； 2,4-D 利于愈伤组织形成。 2 ）极性：叶片腹面向上放置利于芽的分化 3 ）损伤：常从叶柄、叶脉的切口处形成愈伤组织和芽。第三节叶的培养 42 三、离体叶组织中再生植株发生途径 1 、直接产生不定芽 2 、离体叶愈伤组织不定芽 3 、离体叶愈伤组织胚状体不定芽 4 、离体叶