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一种繁殖多花黄精的方法

来源：花匠小妙招时间：2025-07-28 00:46

本发明涉及药用植物组织培养领域，尤其涉及一种繁殖多花黄精的方法。

背景技术：

1、目前，多花黄精(polygonatum cyrtonema)的繁殖方法主要包括无性繁殖和有性繁殖两种，即根状茎繁殖和种子繁殖。然而，种子繁殖存在发芽率低、育苗周期长等问题。因此，在目前的人工栽培中，主要依赖根状茎的进行无性繁殖，但该方法也存在一些缺点。例如，根状茎用量大以及在催芽过程中常因伤口受微生物感染，导致其在长出新芽之前就已经腐烂，从而造成巨大的经济损失。然而，随着多花黄精现代药理学的深入研究，多花黄精广泛应用于食品、医药、化妆品等行业中，市场需求进一步加大。在市场需求增大以及存在诸多育苗缺陷的大环境下，传统中草药种植行业的发展面临着极大的挑战。

2、植物体细胞可以在外源植物生长调节剂(pgrs)的诱导下，通过体细胞胚发生实现基因的重新编程并分化为体细胞胚。通过这一生物学过程获得的再生植株存在数量多、遗传特性相对稳定和变异系数低等诸多效益。就目前作物遗传改良而言，体细胞胚是较其他材料相对容易接受外源基因的靶材料，这在多项研究中均已得到证实。迄今为止，体细胞胚在多种植物的离体再生研究中得到报导，但是目前关于多花黄精体细胞胚发生体系的建立尚未有报导的案例。

技术实现思路

1、本发明针对目前多花黄精组培中存在的根状茎用量大且催芽过程中常因伤口感染导致长出新芽之前就已经腐烂的问题，通过利用幼胚作为外植体，构建了一种优质、高效的再生体系，利用体细胞胚进行多花黄精组培苗的繁育。

2、为解决上述技术问题，本发明提供了一种繁殖多花黄精的方法，所述方法包括以多花黄精的幼胚作为外植体，通过诱导愈伤组织与体细胞胚诱导获得体细胞胚，使所述体细胞胚萌发为带有根系的幼苗的步骤。

3、上述方法中，所述幼胚为花期结束后50～60天内的幼胚。

4、上述方法中，所述体细胞胚为球形胚时期的体细胞胚。

5、上述方法中，所述诱导愈伤组织所用的培养基中植物生长调节剂的种类和含量为：1.0mg/l的6-ba和0.5mg/l的2,4-d。

6、上述方法中，所述诱导愈伤组织在温度25±1℃的黑暗条件下培养，具体可培养30天。

7、上述方法中，所述体细胞胚诱导所用的培养基中植物生长调节剂的种类和含量为：1.0mg/l的6-ba和1.0mg/l的2,4-d。

8、上述方法中，所述体细胞胚诱导在温度25±1℃的黑暗条件下培养，具体可培养30天。

9、上述方法中，所述体细胞胚萌发所用的培养基中植物生长调节剂的种类和含量为：2.0mg/l的6-ba和1.0mg/l的naa。

10、上述方法中，所述体细胞胚萌发在温度25±1℃、光照强度2000lux，光照时间为14h/d的条件下培养，具体可培养40天。

11、上述方法中，所述诱导愈伤组织所用的培养基、所述体细胞胚诱导所用的培养基和所述体细胞胚萌发所用的培养基均为向ms基本培养基中加入蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。

12、上述方法中，所述方法还包括如下步骤：将所述带有根系的幼苗进行壮苗培养后炼苗移栽。

13、上述方法中，所述壮苗培养所用的培养基中植物生长调节剂的种类和含量为：0.5mg/l的iaa和1.0mg/l的iba。

14、上述方法中，所述壮苗培养在温度25±1℃、光照强度2000lux，光照时间为14h/d的条件下培养，具体可培养20天。

15、上述方法中，所述壮苗培养所用的培养基为向ms基本培养基中加入蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。

16、上述方法中，所有的培养基中凝固剂为琼脂。

17、上述方法中，所有的培养基中蔗糖的含量均为30g/l，琼脂的含量均为7g/l，所有的培养基的ph值均为6.1±0.1。

18、上述方法中，所述外植体需经过消毒。

19、本发明还提供繁殖多花黄精的组合物，所述组合物由所述的诱导愈伤组织所用的培养基、体细胞胚诱导所用的培养基、体细胞胚萌发所用的培养基和所述的壮苗培养所用的培养基组成。

20、本发明以多花黄精未成熟幼胚作为外植体，构建了一项关于多花黄精体细胞胚的再生体系。这个体系的建立将作为体细胞胚发生的首次报道，并填补这一技术性空白，为多花黄精商业化育苗、遗传改良奠定提供了技术支撑。

技术特征：

1.一种繁殖多花黄精的方法，其特征在于，所述方法包括以多花黄精的幼胚作为外植体，通过诱导愈伤组织与体细胞胚诱导获得体细胞胚，使所述体细胞胚萌发为带有根系的幼苗的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述幼胚为花期结束后50～60天内的幼胚。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述体细胞胚为球形胚时期的体细胞胚。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述诱导愈伤组织所用的培养基中植物生长调节剂的种类和含量为：1.0mg/l的6-ba和0.5mg/l的2,4-d；

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述诱导愈伤组织所用的培养基、所述体细胞胚诱导所用的培养基和所述体细胞胚萌发所用的培养基均为向ms基本培养基加入中蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述诱导愈伤组织在温度25±1℃的黑暗条件下培养；所述体细胞胚诱导在温度25±1℃的黑暗条件下培养；所述体细胞胚萌发在温度25±1℃、光照强度2000lux的条件下培养。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：将所述带有根系的幼苗进行壮苗培养后炼苗移栽。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述壮苗培养所用的培养基中植物生长调节剂的种类和含量为：0.5mg/l的iaa和1.0mg/l的iba。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述壮苗培养所用的培养基为向ms基本培养基中加入蔗糖、凝固剂和植物生长调节剂得到的固体培养基。

10.繁殖多花黄精的组合物，其特征在于，所述组合物由权利要求4中所述的诱导愈伤组织所用的培养基、体细胞胚诱导所用的培养基、体细胞胚萌发所用的培养基和权利要求8中所述的壮苗培养所用的培养基组成。

技术总结
本发明涉及药用植物组织培养领域，为解决目前多花黄精组培中存在的根状茎用量大且催芽过程中常因伤口感染导致长出新芽之前就已经腐烂的问题，本发明提供一种繁殖多花黄精的方法，包括以多花黄精的幼胚作为外植体，通过诱导愈伤组织与体细胞胚诱导获得体细胞胚，使所述体细胞胚萌发为带有根系的幼苗的步骤。利用本发明的方法可实现多花黄精的工厂化育苗，加快分子育种时代的推进。

技术研发人员：李宁,杨国群,崔传通,黄黎君,蒋东
受保护的技术使用者：中南林业科技大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17