【技术分享】水产动物常见致病菌的初步鉴定方法

细菌病是水产养殖动物的重要疾病，治疗不同的细菌性疾病需要使用不同的抗菌类药物，实验室菌种鉴定过程用时较长，对于一些急性发病池塘，完成细菌鉴定后再进行处理，会造成较大经济损失，对于一些常见的致病菌，我们可以通过细菌培养时间、菌落形态及革兰氏染色观察做出初步鉴定，再结合发病动物症状、流行特点等对细菌病的种类做出初步诊断，可以快速进行现场处理。 笔者根据经验，整理出初步鉴别细菌种属的方法，为养殖池塘细菌病处理提供一些参考。

一

气单胞菌

1、培养特性

气单胞菌经29℃培养18h，在黄色的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上生长旺盛，菌落直径可达2mm左右，在绿色的硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(TCBS)上不生长或形成营养不良小菌落。

2、菌落形态

大部分气单胞菌在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成圆形光滑、边缘整齐、湿润、稍隆起不透明或半透明灰白色或黄色馒头状大菌落，且无法在硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(TCBS)上生长。

图1 气单胞菌在TSA培养基上菌落形态

嗜水气单胞菌较为特殊，在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成灰白色不透明大菌落，在硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基（TCBS）上形成黄色生长不良小菌落。

图2 嗜水气单胞菌在TSA培养基上菌落形态

3、革兰氏染色形态

气单胞菌为革兰氏染色阴性、两端钝圆的直杆菌或球杆菌，单个、成双或以短链形式排列。

图3 气单胞菌革兰氏染色形态

二

弧 菌

1、培养特性

弧菌经29℃培养18h，在黄色的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）及绿色的硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(TCBS)上均生长旺盛，菌落直径一般在1mm以上。

2、菌落形态

弧菌在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成圆形、稍隆起、湿润透明或半透明灰白色菌落，形成圆形、隆起的湿润黄色或绿色菌落，48h后干瘪、下陷，表面褶皱且无光泽。常见的副溶血弧菌、创伤弧菌在硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基（TCBS）上形成绿色菌落，哈维氏弧菌、溶藻弧菌在硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基（TCBS）上形成黄色菌落。

图4 弧菌在TSA培养基上菌落形态

拟态弧菌较为特殊，在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成圆形、隆起、湿润透明菌落，形态极像树叶上的露珠。

图5 拟态弧菌在TSA培养基上菌落形态

3、革兰氏染色形态

弧菌革兰氏染色阴性，杆状或短杆状，多数菌体稍弯曲，有一端或两端稍尖，散在或个别成双排列。

图6 弧菌革兰氏染色形态

三

链球菌

1、培养特性

链球菌经28℃-35℃培养12小时左右，在黄色的脑心浸液琼脂培养基（BHIA）上生长旺盛，菌落直径约为1mm左右，在黄色的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成透明针尖大小的菌落，有的需对着光才能看清。

2、菌落形态

链球菌在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成圆形、边缘整齐、湿润，针尖大小的透明小菌落。

图7 链球菌在TSA培养基上菌落形态

3、革兰氏染色形态

链球菌为革兰氏染色阳性球菌，单个或链状排列。

图8 链球菌革兰氏染色形态

四

诺卡氏菌

1、培养特性

诺卡氏菌经25℃培养48h～72h，才可在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上长出少量沙粒状菌落。

2、菌落形态

诺卡氏菌在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成沙粒状、干燥、不透明橘色或黄色边缘不整齐菌落。

图9 诺卡氏菌在TSA培养基上菌落形态

3、革兰氏染色形态

诺卡氏菌为革兰氏染色阳性丝状菌，单个、成对Y或V字状排列。

图10 诺卡氏菌革兰氏染色形态

五

爱德华氏菌

1、培养特性

迟缓爱德华氏菌经25℃培养24h，在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上生长旺盛，直径小于1mm，鮰爱德华氏菌在25℃-30℃培养48h才能在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成针尖大小的菌落。

2、菌落形态

迟缓爱德华氏菌在胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）上形成圆形、边缘整齐、光滑、湿润半透明或透明的灰白色小菌落。

图11 爱德华氏菌在TSA培养基上菌落形态

3、革兰氏染色形态

爱德华氏菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌，单个或双个排列。

图12 爱德华氏菌革兰氏染色形态

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