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花青素提纯方案

来源：花匠小妙招时间：2025-06-26 21:31

大孔吸附树脂分离花生种皮原花青素的研究

油脂加工
粮油食品科技第 22 卷 2014 年第 3 期
大孔吸附树脂分离花生种皮原花青素的研究
姬娜，熊柳，孙庆杰
（青岛农业大学食品科学与工程学院，山东青岛 266109）
摘要：研究比较了 4 种大孔吸附树脂对花生种皮原花青素分离的影响，筛选出最适的分离原花青素大孔吸附树脂 AB-8 型，并确定了 AB-8 型大孔吸附树脂的最佳工艺条件：样品浓度为 2． 5 mg / mL，上样流速为 0． 5 mL / min。采用 20% 、30% 、50% 浓度的乙醇溶液进行洗脱，得到 3 个不同的原花青素洗脱级分别为 PSPP1、PSPP2、PSPP3，其中原花青素的含量分别为 75． 26% 、84． 50% 和 90． 18% 。通过薄层层析分析得知，提纯的原花青素样液有三条谱带，初步推断为单体、低聚体混合物及高聚体。关键词：花生种皮；原花青素；大孔吸附树脂中图分类号： S 565． 2 文献标识码： A 文章编号： 1007 － 7561（ 2014） 03 － 0032 － 04
度（ mg / mL）。
原花青素的计算公式：
D
=
V× W
C，其中
D：
试样
mL / mg的原花青素样液和标准品经不同的点样量展开后，在波长 280 nm 内扫描硅胶板上的斑点，根据标准品的色谱曲线推断样品的组分，并确定其Ｒf 值。
中原花青素的百分含量，% ； V：试样定容体积，mL； 2 结果与分析
表 1 4 种吸附树脂的结构性能
树脂型号 AB-8 NKA-9
DK-130 HPD-100
粒径 / mm 0． 3 ～ 1． 25 0． 3 ～ 1． 25 0． 3 ～ 1． 25 0． 3 ～ 1． 2

紫甘蓝花青素的提取工艺

紫甘蓝花青素的提取工艺紫甘蓝花青素是一种具有很高的营养和药用价值的天然色素，具有抗氧化、抗癌和抗炎等多种生物活性。

目前，对紫甘蓝花青素的提取工艺研究已经相对成熟，以下是关于紫甘蓝花青素的提取工艺的详细介绍。

紫甘蓝花青素的提取工艺主要包括材料准备、提取、分离纯化、干燥等几个步骤。

1. 材料准备选择新鲜健康的紫甘蓝为原料，将其洗净、切碎或打碎，提高紫甘蓝花青素的溶出效果。

2. 提取常用的提取方法有水煎法、超声波法、酶解法和溶剂法等。

其中，溶剂法是目前应用最广泛的提取方法。

具体步骤如下：（1）将切碎的紫甘蓝与适量的溶剂（如乙醇、乙酸乙酯等）一起放入提取器中。

（2）在适当的温度下进行搅拌提取，一般提取时间为1-2小时。

（3）过滤提取液，得到粗提液。

3. 分离纯化粗提液中除了紫甘蓝花青素外，还存在其他杂质，需要进行进一步的分离纯化。

一般采用的方法包括减压蒸馏、聚合物吸附树脂、渗透膜分离等。

以下是几种常用的分离纯化方法：（1）减压蒸馏：通过调整温度和压力，在不同温度下提取溶剂，从而分离出紫甘蓝花青素。

（2）聚合物吸附树脂：通过溶液与吸附树脂的物理或化学作用，将紫甘蓝花青素吸附在树脂上，再通过洗脱的方式得到纯度较高的紫甘蓝花青素。

（3）渗透膜分离：利用渗透膜对不同分子大小的物质进行分离，通过调节温度和压力，将紫甘蓝花青素从其他成分中分离出来。

4. 干燥将得到的纯化的紫甘蓝花青素溶液进行蒸发浓缩，得到浓缩的紫甘蓝花青素溶液。

然后，将溶液进行低温喷雾干燥或冷冻干燥，得到固体紫甘蓝花青素。

总结起来，紫甘蓝花青素的提取工艺包括材料准备、提取、分离纯化和干燥等几个步骤。

其中，常用的提取方法是溶剂法，常用的分离纯化方法包括减压蒸馏、聚合物吸附树脂和渗透膜分离。

通过这些工艺步骤，可以得到高纯度的紫甘蓝花青素，为其进一步的应用提供保障。

花青素提取方法

*花青素的提取:花青素的提取是目前花青素研究发展的热点问题，也是花青素生产、投入使用的关键性环节。

近年来，在传统提取方法的基础之上，一些凭借新技术或经过改良后的提取方法也开始崭露头角。

1有机溶剂萃取法这是目前国内外最广泛使用的提取方法。

多数选择甲醇、乙酮、丙酮等混合溶剂对材料进行溶解过滤，通过调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。

国内吴信子等用盐酸一甲醇溶液提取，然后用纸层析法(中号)和柱层析法(聚乙酰胺)进行花色苷的分离。

目前，有机溶剂萃取法已成功地应用于诸如葡萄籽、石榴皮、蓝莓等绝大多数含花青素物质的提取分离。

有机溶剂萃取法的关键是选择有效溶剂，要求既要对被提取的有效成分有较大溶解度，又要避免大量杂质的溶解。

该方法原理简单，对设备要求较低，不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。

2水溶液提取法有机溶剂萃取的花青素多有毒性残留且生产过程环境污染大，有鉴于此，水溶液提取应运而生。

该方法一般将植物材料在常压或高压下用热水浸泡，然后用非极性大孔树脂吸附；或直接使用脱氧热水提取，再采用超滤或反渗透，浓缩得到粗提物。

它是Duncan和Gilmour(1998)发明的提取花青素的方法，此方法设备要求简单，但产品纯度低。

3超临界流体萃取法超临界流体萃取是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响进行提取。

这种方法产品提取率高，但设备成本过高。

孙传经采用超临界CO：萃取法从银杏叶、黑加仑籽及葡萄籽中提取花青素工艺进行了研究。

该工艺中CO 和改性剂可循环使用，对环境无污染。

4微波提取法该法于1986年被Ganzlert E9]等人首先用于分离各种类型化合物。

国内李风英探讨了微波技术对葡萄籽中原花青素提取量和分子结构的影响。

为微波在葡萄籽中有效成分浸提方面的研究奠定了基础。

微波提取法是利用在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到具有较小介电常数、微波吸收能力相对较差的萃取溶剂中。

葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化

富含原花青素的刺葡萄
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一、原花青素的介绍
原花青素抗氧化机理的介绍
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二、原花青素提取纯化具体方法

OPC纯化
OPC初步分离提取
①溶剂提取法 ②微波法 ③超临界C02萃取法
①大孔树脂吸附法
②超过滤法
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二、原花青素提取纯化具体方法
1、原花青素的初步分离提取 ①溶剂提取法 ●溶剂提取法是提取葡萄籽中原花青素的最常用的方法 ●方法：石油醚脱脂---乙醇粗提---调节pH---乙酸乙酯萃取 ●青葡萄籽产物纯度和得率达67.35％和7.86％；红葡萄籽产物纯度和得率达55.20％和5.36％
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二、原花青素提取纯化具体方法
2、原花青素的提纯 ②超过滤法 ●原理：超滤是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。
●最后纯度可达到99.9%
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三、综合讨论
对于原花青素(OPC)的分离纯化工艺的选择没有明确的标准，根据具体情况可以分为以下几种： ●对于花青素的初步分离提取，溶剂法明显更适合，原由它剂毒性小、副作用小、提取率较高。如对产品纯度有进一步要求，微波提取法便更合适。 ●对于花青素纯度要求很高的工艺，超临界CO2萃取和超滤法相结合便是最好选择。 ●大孔树脂分离技术是当前分离纯化研究重点，应用于大多数分离纯化工艺中，具有远大前景。
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二、原花青素提取纯化具体方法
1、原花青素的初步分离提取 ②微波法 ●原理：利用磁控管所产生的每秒24.5亿次超高频率的快速震动，使植物内分子间相互碰撞、挤压，从而有利于其有效成分的浸出 ●方法：以70％乙醇水溶液为介质，葡萄籽整粒料液比(g:mL)l:11，微波功率180 w处理10 s，然后在50℃水浴浸提30 min ●提取率达到38％，超过传统水煮法。

AB-8大孔树脂对葡萄籽原花青素的吸附过程

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! $ 吸附过程在等温下进行 " 不考虑吸附热的 + 影响 " 流体温度与吸附剂温度相等 # ! $ 流体混合物只有原花青素被吸附 " 其他杂 ) 质为隋性组分 " 对原花青素的吸附行为没有影响 " 且吸附等温线为有利的相平衡线 # $ 床层中吸附剂装填均匀 " 即各处的吸附剂 ! # 中初始浓度 & 温度均一 # $ 流体定态进料 " 即进入床层的流体浓度 & ! " 温度和流量不随时间而变 # $ 忽略床层轴向返混 ' ! 8 在图 + 所示的微分高度 G A 内"通过物料衡算得传质区长度 A + 积分表达式
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花青素

花青素的提取及纯化
一、花青素
• 花青素是一种水溶性色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色，细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝。 • 花青素在欧洲，被称为“口服的皮肤化妆品”，可防止皮肤皱纹的提早生成，它不但能防止皮肤皱纹的提早生成，更能补充营养及消除体内有害的自由基。 • 现已知的花青素有20多种，主要存在于植物中的有：天竺葵色素、矢本菊色素、飞燕草色素、芍药色素、牵牛花色素及锦葵色素。 • 花青素具有不稳定性，易溶于水和乙醇、甲醇等醇类化合物，在pH不大于3的酸性条件下稳定。不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂，遇醋酸铅试剂会沉淀，并能被活性炭吸附，其颜色随pH值的变化而变化，pH<7呈红色，pH在7～8时呈紫色，pH>11时呈蓝色。植物花青素多采用酸性的甲醇、乙醇、水等极性溶剂提取。
三、花青素的纯化
• 1.纸层析( paper chromatograph ,PC) • 花青素传统纯化方法是纸色谱,该方法具有快速、设备简单等优点。常用的展开剂有 V (丁醇) : V (酸) :V(水)=4 ∶1 ∶5 , V (正丁醇) ∶V (2mol/L HCl) = 1 ∶1 , V (浓HCl) ∶V (水) = 3 ∶97 , V (乙酸) ∶V (浓HCl) ∶V (水) = 15∶3 ∶82 ,1 %盐酸等, • 可采用单向或者双向、上行或者下行方式进行展开,展开后剪下色斑,以酸化甲(乙) 醇洗涤、浓缩,即可得到样品。
• 3.抗辐射 • 花青素还具有抗辐射的作用，花青素颜色因PH值不同会发生变化，大部分花青素具有良好的光、热、PH值稳定性，对于白领或是长期处于日晒、电辐射环境中的人群，花青素的功效可是不可或缺的。 • 4.预防癌症 • 花青素清除自由基的功效，亦可让癌细胞无法顺利扩散，借此保护更多健康的细胞免于被癌细胞侵蚀。 • 5.增进视力 • 医学临床报告显示蓝莓中的花青素可促进视网膜细胞中视紫质的再生成，可预防重度近视及视网膜剥离，并可增进视力。

花青素提取实验论文[终稿]

紫甘蓝中花青素的提取研究【摘要】蓝花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。

目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。

本文主要研究了紫甘蓝花青素的提取工艺;用大孔树脂初步纯化紫甘蓝花青素;对紫甘蓝花青素纯度鉴定。

采用“溶剂提取、萃取、树脂纯化、薄层色谱”相结合的方案对紫甘蓝花青素进行了分离纯化。

【关键词】紫甘蓝花青素提取分离纯化1.1引言花青素作为可使用色素之一，具有多种生物学作用，将广泛用于食品加工、医药保健品、化妆品行业。

虽然国内外己开展了一些研究，主要集中在花青素粗品的提取方法的研究方面，而对紫甘蓝花青素的组成及分子结构鉴定、生物学活性、药理作用的研究还很少，还需要大量数据为其进一步开发和利用提供理论依据。

2.1材料与方法2.1.1实验材料新鲜紫甘蓝2.1.2实验方法溶剂提取、萃取、树脂纯化、薄层色谱2.2主要仪器、试剂分析天平、外分光光度计、环水式多用真空泵、心机、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、无水乙醇、甲醇、孔树脂、浓盐酸。

2.3实验方法2.3.1紫甘蓝色素的提取取新鲜80G的紫甘蓝叶片于大杯中加入一定的浸提剂，吸取一定体积的浸提液于 1 Oml比色管中，用浸提剂稀释至刻度，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度。

采用溶剂提取法。

称取紫甘蓝80g，用500ml的60%乙醇和1%盐酸混合液进行捣碎浸提8层纱布过滤，4℃条件下静置3h，离心测OD 值。

2.3.2紫甘蓝色素的初步纯化大孔树脂预处理的方法:将待处理的大孔树脂装入柱中，用95%乙醇浸泡24h一用95%乙醇2}4BV冲洗一用去离子水洗至无醇味一5%氢氧化钠溶液2}4BV冲洗树脂柱一水洗至中性一10%乙酸2}4BV冲洗通过树脂柱一水洗至中性，备用。

滤液用5倍的纯水稀释，大孔吸附树脂法分离，往吸附柱中先用15%乙醇除杂，再用60%乙醇洗脱收集洗脱液；用四分之一的盐酸在90℃条件下水解1h，再加5倍纯水稀释；大孔吸附树脂再次分离，此时用水除杂，无水乙醇洗脱收集；2.3.3花青素的浓缩结晶无水乙醇洗脱液用旋转蒸发仪浓缩，放冰箱中等待是否有结晶甲醇：盐酸=4:1做展开剂测纯度3.1 实验结果及讨论3.1.1浓度计算紫甘蓝捣碎榨汁后得到深紫色溶液，过滤静置稀释40测得OD值为0.865由曲线可得到花青素含量为1.98mg/ml或 6.94mmol/ml3.1.2结果讨论关于天然色素的提取纯化。

紫甘蓝中花青素提取实验报告

紫甘蓝中花青素的提取（安徽农业大学 12青年农场主班）花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。

目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。

1、实验原理紫甘蓝花青素或花色素属于黄酮类化合物，极性较高，可溶于水或甲醇乙醇等有机溶剂中。

根据相似相溶的原则，本实验选用乙醇作为紫甘蓝花色素的浸提剂，采用大孔吸附树脂法分离提纯。

大孔吸附树脂具有吸附性能和分子筛的作用，使相对分子质量和吸附能力不同的混合物的不同成分得到分离。

紫甘蓝叶片与60%乙醇混合在组织捣碎机中破坏紫甘蓝细胞，使花色素尽可能多的溶解。

为了防止花色素的降解以提高其溶出率，可在其中加入1%盐酸。

八层纱布过滤后，留一小烧杯备用，剩余的用大孔树脂除杂，加入200ml 15%的乙醇溶液除去其他可溶性杂质，让树脂吸附花色素，再用60%乙醇洗脱，解析得到乙醇和花色素的混合液。

将过柱的溶液以HCl：混合液=1:4的比例混合至烧杯中，在90。

C的水浴锅中水解一小时，以破坏花色素的糖苷键，使花色素均以花青素的形式存在。

此时，用20ml纯水除杂，用无水乙醇洗脱，得到较为单一的花青素与乙醇混合液。

在旋转蒸发仪上蒸干。

2、材料、药品与仪器新鲜紫甘蓝15%乙醇、60%乙醇+1%HCl混合液、弄HCl、无水乙醇、AB-8打孔吸附树脂电子天平、组织捣碎机、交换柱、玻璃棒、50ml量筒漏斗、烧杯、圆底烧瓶、纱布、比色皿、分光光度计、旋转蒸发仪3、实验步骤●配制60%+1%HCl混合液与15%乙醇溶液备用●称取100.0g新鲜紫甘蓝叶片，量取60%+1%HCl混合液300ml（浸提剂），同时放入组织捣碎机中捣碎，浸提●所得固液混合物用8层纱布过滤，取一点滤液备用，剩余滤液1：5加水稀释得色素原液●将备用滤液再用滤纸过滤，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度，并作标准曲线。

板栗壳中原花青素大孔吸附树脂分离纯化工艺优化

板栗壳中原花青素大孔吸附树脂分离纯化工艺优化随着人们对健康的关注度不断提高，越来越多的天然植物和植物提取物被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。

其中，板栗壳中的原花青素是一种具有抗氧化、抗癌、抗炎、降血压等多种生物活性的天然大分子化合物，具有广泛的应用价值。

为了开发和利用板栗壳中的原花青素，需要建立一个高效的分离纯化工艺，以提高产量和纯度。

本文将介绍一种基于大孔吸附树脂的板栗壳中原花青素分离纯化工艺，并结合实验数据进行优化。

1. 建立分离纯化工艺的重要性板栗壳中的原花青素是一种多酚类化合物，具有较强的吸附和结合能力，同时也存在着多种与之相似的杂质。

因此，建立一种高效的分离纯化工艺是十分必要的。

目前，板栗壳中原花青素的分离纯化方法主要有溶剂萃取、黄龙云实验法、聚乙烯醇/盐酸盐法等。

这些方法虽然能够从板栗壳中提取到原花青素，但是其操作复杂、成本高昂、产率低，且提纯程度也有一定的限制。

2. 大孔吸附树脂的基本原理大孔吸附树脂是一种具有高效分离纯化能力的吸附剂，其基本原理是利用分子间相互作用力（如静电作用、氢键作用）对杂质进行选择性吸附，以实现对目标分子的分离纯化。

大孔吸附树脂在选择性吸附杂质的同时，也可以将目标分子的极性、结构等特征纳入考虑范畴中，从而实现对目标分子的更精确选择性吸附。

3. 大孔吸附树脂分离纯化原花青素的实验过程从板栗壳中提取原花青素后，将经过预处理的板栗原花青素水溶液连续通过列装有大孔吸附树脂的柱子，使目标分子与吸附树脂发生相互作用。

随着操作流程的进行，杂质被选择性吸附在吸附树脂的内部孔道中，而目标分子则留在流出液中。

随着反复操作的进行，目标分子会不断被从吸附树脂上剥离出来，形成纯净的分离物。

4. 实验优化结果分析通过实验不断优化，我们最终得到了以大孔吸附树脂为基础的板栗壳中原花青素分离纯化工艺。

通过实验数据统计分析，我们得到了以下结果：（1）阳离子树脂CM-Sephadex C-25对板栗壳中原花青素的吸附效果最佳；（2）pH值在7.0~8.0的范围内，可获得最好的吸附效率和纯化效果；（3）采用15%乙醇水溶液进行洗脱，可获得较好的洗脱效果和高的回收率。

原花青素的分离纯化实验方案(修改)

原花青素的分离纯化一、实验目的对上一步提取的原花青素进行分离纯化，熟悉实验相关仪器设备及过程二、仪器、材料及试剂原花青素提取液、原花青素标准品、大孔树脂、75%乙醇、60%乙醇（作解吸剂）、50%乙醇（作洗脱剂）、盐酸（磷酸或乙酸）、分析天平、带筛板的玻璃柱（可无筛板，但是要脱脂棉或者用酸式滴定管改装（尝试性），同样需要脱脂棉）、紫外分光光度计（286nm）（可用可见光分光光度计（536nm）代替）、真空干燥箱（用真空泵+密封的抽滤瓶（尝试）代替）、PH计、铁架台、漏斗（小号）、小试管若干（不少于5支）、试管架、烧杯若干（不少于3个）、玻璃棒、滴管、锥形瓶三、实验步骤大孔树脂的预处理：新购树脂含有未聚合单体、致孔剂、分散剂等残留的杂质成分，使用前必须加以处理。

将新购大孔树脂用乙醇浸泡24h，充分溶胀，取一定量湿法装柱，先用适当浓度的乙醇清洗至洗出液加等量蒸馏水无白色浑浊为止，再用蒸馏水洗至无醇味且水液澄清，备用。

通过乙醇(或甲醇)与水交替反复洗脱，可除去树脂中的残留物，一般洗脱溶剂用量为树脂体积的2～3倍，交替洗脱2～3次，最终以水洗脱后即可使用。

大孔树脂动态饱和吸附曲线图的绘制：1、将试验中需要用到的50%乙醇、60%乙醇的PH用盐酸调至5，在波长为286nm（如果采用可见光分光光度计则为536nm）测定原花青素提取液的吸光值（以75%的乙醇溶液为对照）2、取一定量的大孔树脂于烧杯中缓慢倒入50%的乙醇溶液（同时搅拌），搅拌至可流动的糊状，取一支干净的带筛板的玻璃柱，将糊状大孔树脂加入玻璃柱，用手指轻轻敲打玻璃柱，使大孔树脂均匀铺在玻璃柱底部（用烧杯接住此时流出的液体），用50%的乙醇在柱上流动清洗，不时检查流出液，直至与水混合不呈白色浑浊为止（乙醇：水一1：5）。

然后以大量蒸馏水洗去乙醇（必须洗净乙醇，否则将影响吸附效果），待用。

将样品液直接或拌入树脂中加到已处理好的大孔吸附树脂柱柱顶，拌样时样液和树脂的比例为1：（2～3）。