CN102696483A绿花百合快速繁殖方法（9页）

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102696483A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102696483 A (43)申请公布日 2012.10.03 (21)申请号 201210203227.7 (22)申请日 2012.06.19 (71)申请人 西安文理学院 地址 710065 陕西省西安市雁塔区太白南路 168 号 (72)发明人 杜喜春 丁群英 孟长军 赵银萍 王芫英 (74)专利代理机构 西安创知专利事务所 61213 代理人 谭文琰 (51)Int.Cl. A01H 4/00 (2006.01) 权利要求书 2 页 说明书 6 页 权利要求书2 页 说明书6 页 (54)发明名称 绿花百合快速繁殖方法 (57)摘要 本发明公开了一种绿花百合快速繁殖方法， 该方法为：一、挑选无病斑的绿花百合地下鳞茎 上的鳞片叶，洗净，冲洗，灭菌，得到外植体；二、 将外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，培养两 个月后产生愈伤组织；三、将愈伤组织接种于继 代培养基上进行增殖培养，愈伤组织增大并有新 的愈伤组织产生；四、将增大的愈伤组织或新的 愈伤组织接种于芽分化培养基上进行芽分化诱 导，分化出丛生芽；五、将分化出的丛生芽接种于 生根培养基上，获得生根的绿花百合幼苗；六、将 生根的绿花百合幼苗移植于栽培基质中培养，得 到绿花百合再生植株。本发明的方法不受季节限 制，可常年、快速繁殖绿花百合，实现绿花百合的 规模化生产，为快速扩大其种群提供切实可行的 方法。 A 3 8 4 6 9 6 2 0 1 N C CN 102696483 A 权 利 要 求 书 1/2 页 1. 一种绿花百合快速繁殖方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 步骤一、挑选无病斑的绿花百合地下鳞茎上的鳞片叶，用洗涤剂将所述鳞片叶上的泥 土洗净，然后用流水冲洗0.5h ～1.5h，再采用常规外植体材料灭菌方法对冲洗后的鳞片叶 进行灭菌，得到外植体； 步骤二、在无菌条件下将步骤一中所述外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，培养两 个月后整个外植体产生愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基为：在MS 常规基本培养基中添 加6- 苄氨基嘌呤1.5mg/L ～2.5mg/L、萘乙酸0.05mg/L ～0.2mg/L 和琼脂6g/L ～12g/L ； 所述愈伤组织诱导培养基的pH 值为5.4 ～5.8 ；所述培养的条件为：培养温度21℃～25℃， 12h 光照与12h 黑暗交替培养，光照强度为1000Lx ～2000Lx ； 步骤三、在无菌条件下将步骤二中产生的愈伤组织接种于继代培养基上进行增殖培 养，增殖培养12 ～18 天后愈伤组织增大并有新的愈伤组织产生；所述继代培养基为：在MS 常规基本培养基中添加6- 苄氨基嘌呤0.8mg/L ～2.0mg/L、萘乙酸0.05mg/L ～0.2mg/L 和 琼脂6g/L ～12g/L ；所述继代培养基的pH 值为5.4 ～5.8 ；所述增殖培养的条件为：培养 温度21℃～25℃，12h 光照与12h 黑暗交替培养，光照强度为1000Lx ～2000Lx ； 步骤四、在无菌条件下将步骤三中所述增大的愈伤组织或新的愈伤组织接种于芽分化 培养基上进行芽分化诱导，接种40 ～50 天后分化出丛生芽；所述芽分化培养基为：在MS 常 规基本培养基中添加6- 苄氨基嘌呤0.5mg/L ～1.5mg/L、萘乙酸0.05mg/L ～0.2mg/L 和 琼脂6g/L ～12g/L ；所述芽分化培养基的pH 值为5.4 ～5.8 ；所

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