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菊花开放式组培快繁技术试验研究

来源：花匠小妙招时间：2025-05-24 08:27

        四川云辰园林科技有限责任公司四川宜宾 644000
        摘要：菊花是一种常用于盆栽和布置花坛栽培的草本花卉植物，花卉市场需求量非常大。本试验是以菊花为培养材料，在常规组培技术基础上，简化了菊花组织快繁技术程序和条件进行的一种试验探索，试验过程和结果可为同行提供一些技术参考。
        关键词：菊花；开入式；组培；快繁
        菊花（学名：Dendranthema morifolium (Ramat.) Tzvelev），为菊科、菊属的多年生宿根草本植物。菊花是经长期人工选择培育的名贵观赏花卉，花中四君子（梅兰竹菊）之一，排名是中国十大名花之三，也是世界四大切花（菊花、月季、康乃馨、唐菖蒲）之一，具有观赏、药用、食用、保健多种价值，花卉产量居花中之首。
        人们对菊花常规的组培繁育技术研究较早，在园艺花卉植物优良品种的快速繁育、脱毒苗工厂化生产等方面发挥了巨大作用，给菊花组培苗术生产经营者带来了可观的经济效益和社会效益。但常规的植物组培技术需要在十分苛刻的无菌环境中进行，始终存在着对设备条件要求高，且操作程序复杂、技术精细、能源消耗大、培养成本高、污染率高、外植体无菌系获取难、移栽成活率低等诸多问题，影响和制约着菊花组培快繁技术的普及应用。
        1.试验方法与步骤
        1.1培养基配方与配制
        1.1.1培养基配方
        分化培养基：MS+6-BA0.5㎎/L+NAA0.1㎎/L+琼脂5g/L+糖26g/L
        壮苗培养基：MS+琼脂5g/L+糖26g/L
        1.1.2抗菌培养基配制
        称琼脂5g、蔗糖26g，加水熬溶化后，依次倒入大量元素、微量元素、铁盐、有机物，植物生长调节剂、混合煮沸定溶，调整pH值为5.8-6.0，加入抗菌组合物，煮沸2分钟，分装凝固。
        1.1.3培养瓶、接种用具浸泡消毒
        拧开培养瓶和盖，放入2%新洁尔灭水溶液中浸泡水10分钟，放到10%奥克泰士消毒杀菌液中浸泡30分钟，取出培养瓶倒立在消毒后的工作台面上备用。剪刀、镊子等接种工具，经干热灭菌后取出直接放入75%酒精瓶中备用。
        1.1.4房间消毒
        选择光照条件好，东面和西面有窗户的房间，关好门窗密闭房间，按每平方米20-25mL用高猛酸钾1%克+甲醛15mL进行熏蒸两小时，打开门窗，通风换气，75%酒精喷雾降尘。
        1.2外植体表面清洗与消毒
        1.2.1外植体选择
        选择生长健壮无病虫害感染的当年生菊花嫩茎干，剪去叶片，再剪成带两个叶节的茎段。
        1.2.2表面清洗与消毒
        表面清洗与消毒——几滴洗洁精加水淹没材料振荡洗涤5--6分钟，自来水冲水20分钟，70%酒精浸泡8秒，0.1%氯化汞10分钟，无菌水振荡洗涤5次，每次5分钟，转入抗菌抗菌液中备用。
        2.接种与培养
        2.1接种方法
        用浸泡培养瓶的消毒液擦拭工作台，肥皂洗干净双手，再用75%酒精擦拭工作台和双手，打开瓶盖，从75%酒精瓶中取出工具，将消毒灭菌的外植体接种到抗菌培养基上，盖紧瓶盖。
        2.2室内培养
        把接种的培瓶摆放在培养架上，调控室内温度在25（±2）℃，利用室外光源，在自然光下培养，一周后外植体基部叶节处分化出腋芽，15天后，每个外植体分化从生芽达到10-20个不等。
        2.3壮苗培养
        从生芽生长到苗高2㎝左右，切下侧芽，转接到壮苗培养基上，调控室内温度在25（±2）℃，10-15天苗高5-7㎝。
        3.瓶外生根与移栽结合
        将珍珠岩、蛭石1：1比例混合，清水冲淋一道，装入50穴的育苗穴盘，从培养瓶中取出无根组培苗，用清水洗掉附着在苗上的培养基，栽植于练苗基质中，搭塑料小拱棚，保温保湿，每2-3天喷雾一次消毒生根混合液（悪霉灵2000倍+邻苯二酚5㎎/L+吲哚乙酸10㎎/L），15天后组培苗生根率达到100%。
        4.试验结果与分析
        4.1培养基污染统计
                                                                       表1 抗菌培养基污染结果统计

        4.2瓶外生根结果统计
                                                                     表2 组培苗瓶外生根试验数据统计

        4.3与常规组培对比
        采用简化组培方法与常规组培法进行对比试验，结果详见下表
                                                                   表3 简化组培与常规组培对比实验结果统计

        5.原因分析
        5.1真菌污染
        主要是房间消毒条件限制，消毒不干净，环境和空气带菌，接种时，操作不熟练，敝开瓶口和材料暴露时间过久，被空气中杂菌感染所致。
        5.2细菌污染
        主要是工作台、接种工具用具用品消毒不干净，接种人员操作不熟练、不规范，接种时操作不慎带入菌源所致。
        5.3褐变原因
        一是培养材料体内含酚类化合物，当材料被切割，切口部位的细胞外溢出酚类化合物，被多酚氧化酶氧化成醌类物质和水后，导致材料变成褐色而死亡；二是培养材料两端剪口破损，消毒液浸入材料内部造成细胞组织中毒害产生褐变而死亡。
        5.4其他原因
        外植体消毒不彻底，抗菌剂成分与配量没达到最佳，材料体内带毒，表面消毒不能彻底消除体内菌源，在培养过程中不断产生出霉菌体并漫延。
        6.讨论
        6.1简化培养程序
        普通工作台替代无菌室操作室，在消毒后的工作台面上接种替代超净工作台上接种，省去紫外灯，酒精灯，操作便捷、舒服，提高接种工作效率。室内无需配紫外灯，利用自然光源培养替代无菌室内人工灯光培养，节省能源。
        6.2缩短培养时间
        瓶外生根将生根与训化（苗炼）结合起来，简化了瓶内试管
        苗生根培养环节，省工省时，炼苗生根结合，无根菌生根早，节约生根培养时间20天，根系粗壮，移栽成活率达100%。
        6.3试验表明
        在有菌环境条件下进行开放式植物组培是可行的，操作和培养过程中产生的真菌、细菌污染、材料褐变，是可以通过其它方法和提高实验人员操作技术规范和技术熟练度，控制和降低污染以及褐变。
        6.4具有推广应用前景
        这种在常规组培技术基础上，开放式的植物组培快繁技术，在有菌环境下，利用消毒液浸泡培养瓶和在培养基中加入抗菌剂替代高压灭菌，在开放的实验环境下进行操作接种转苗，不需要无菌操作室和操净工作台，简化了设备投入，降低了成本，适合园林企业和园林专合社，有推广应用前景。
        参考文献
        [1]谭文澄，戴策刚.观赏植物组织培养技术，北京中国林业出版社，1991.
        [2]程广有.名优花卉组织培养技术，科学技术出版社出版，2000.
        作者简介
        何素芬（1956-）女，大学本科，副教授，研究方向：植物组织培技术与作物遗传。
        杨静（1981-）女，硕士研究生，园林工程师，研究方向：园林工程与植物组织培养技术。