2022年5月31日16:28:25 967
番茄（Lycopersicon esculentum Miller）是茄科、番茄属一年生或多年生草本植物，不断培育番茄新品种以及保存其优良种质是番茄种植业健康发展的根本保证；而番茄高效再生体系的建立是番茄基因工程育种，杂种优势固定和优异种质保存的前提。本试验以下胚轴、子叶作为外植体建立番茄高效体系。
1 试验材料
以番茄的子叶和下胚轴为实验材料。
2 试验方法
2.1 外植体消毒将番茄种子用次氯酸钠溶液消毒30分钟，用无菌水冲洗4-5遍，播种于MS + 蔗糖20g/L pH＝5．8培养基中，待其萌芽。取番茄的子叶和下胚轴，将子叶切成直径3-5毫米的大小，下胚轴切成3-5毫米长小茎段，备用。
2.2 愈伤组织诱导培养将上述处理后的外植体接种到愈伤组织诱导培养基MS + NAA 0.05mg/L + 6-BA 3.0mg/L上，6天后叶片开始膨大，边缘有许多小突起，并向外反卷．在光照中，叶片上出现一些紫红色的小点，但在暗箱中，小点出现稍少一些。12天后，子叶膨大成圆球状，周围生长了大量的愈伤组织，为淡白色或淡绿色，质地紧密，但无芽产生。18天后，愈伤组织长到半径约1厘米长时，愈伤组织分化为胚状体，由淡白色向淡绿色转变，这时愈伤组织上产生许多绿色的小突起，愈伤组织的生长进入高速增长阶段。第22天，将愈伤组织转入分化培养对其进行继代。
2.3 继代增殖培养将愈伤组织切块继续转接到上述培养基中进行继代增殖培养，培养周期以25天为宜。
2.4 芽分化诱导培养将愈伤组织转接到芽分化诱导培养基MS + IAA 0.1mg/L + 6-BA 2.0mg/L上，让其绿色的胚状体继续增长，7-8天后胚状体上面布满了许多小突点，13天后小突点变成小芽群。
2.5 生根培养将较大的分化苗（约3厘米高）转接到生根培养基MS + IAA 0.1mg/L上，5天后，底部产生白色的小点，并逐渐形成白色的根，13天后形成完整的小植株。
2.6 培养条件以上培养基均附加30g/L蔗糖（生根培养基为20g/L），7g/L琼脂，pH值5.8。培养温度为20-25℃，光照度为1500-2000lx，光照12小时/天。
