分子育种技术创制高香型矮牵牛的初步研究

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第一章 引言

1.1 植物挥发性有机化合物（VOCs）概述

1.2 观赏植物主要香气物质生物合成途径

1.2.1 萜类化合物生物合成途径

1.2.2 苯环类/苯丙烷类物质生物合成途径

1.2.3 脂肪酸衍生物生物合成途径

1.3 萜类和苯环类/苯丙烷类香气物质生物合成相关基因研究进展

1.3.1 萜类合成酶基因

1.3.2 苯环类/苯丙烷类合成途径结构基因

1.4 矮牵牛研究现状

1.4.1 矮牵牛概述

1.4.2 矮牵牛‘Mitchell Diploid’香气物质研究现状

1.5 分子育种技术在花香育种中的应用

1.6 本研究的目的意义和研究内容

1.6.1 研究目的与意义

1.6.2 研究内容

第二章 花特异性表达载体的构建

2.1 实验材料与仪器

2.1.1 实验材料及试剂

2.1.2 主要仪器

2.2 实验方法

2.2.1 花特异表达启动子的获得

2.2.2 花特异表达载体的构建

2.3 结果与分析

2.3.1 构建pK7FWG2.0-proCbLIS载体

2.3.2 构建pK7FWG2.0-LisPro:JsTPS4载体

2.4 小结

第三章 转基因矮牵牛材料的获得及初步鉴定

3.1 实验材料与仪器

3.1.1 植物材料

3.1.2 主要药品和试剂

3.1.3 组织培养培养基配方

3.1.4 主要仪器

3.2 实验方法

3.2.1 pK7FWG2.0-LisPro:JsTPS4载体转化农杆菌

3.2.2 植物表达载体pK7FWG2.0-LisPro:JsTPS4转化矮牵牛

3.2.3 转基因矮牵牛材料T0代基因组DNA提取及抗性基因PCR检测

3.2.4 转基因矮牵牛材料JsTPS4表达量测定

3.2.5 转基因矮牵牛材料T1代的获得

3.3 结果与分析

3.3.1 转基因矮牵牛材料T0代的获得

3.3.2 转基因矮牵牛材料T0代植株形态观察

3.3.3 转基因矮牵牛材料T0代基因组DNA抗性基因检测

3.3.4 转基因矮牵牛材料T0代JsTPS4表达量测定

3.3.5 转基因矮牵牛材料T1代筛选

3.3.6 转基因矮牵牛材料T1代植株形态观察

3.3.7 转基因矮牵牛材料T1代基因组DNA抗性基因检测

3.4 小结

第四章 转基因矮牵牛材料香气测定

4.1 实验材料与仪器

4.1.1 植物材料

4.1.2 试剂与仪器

4.2 实验方法

4.2.1 转基因矮牵牛材料香气物质提取

4.2.2 转基因矮牵牛材料香气物质分析

4.3 结果与分析

4.4 小结

第五章 转基因矮牵牛材料香气合成相关基因表达量分析

5.1 实验材料与仪器

5.1.1 植物材料

5.1.2 试剂

5.1.3 实验仪器

5.2 实验方法

5.2.1 转基因矮牵牛材料RNA的提取及cDNA第一链的合成

5.2.2 荧光定量PCR

5.3 结果与分析

5.3.1 荧光定量PCR引物检测

5.3.2 转基因矮牵牛材料PhEPSPS、PhCM1、PhADT、PhPAAS、PhPAL、PhKAT1、PhBPBT、PhBMST1表达模式分析

5.2.3 转基因矮牵牛材料转录因子PhODOⅠ、PhEOBⅠ、PhEOBⅡ表达模式分析

5.4 小结

第六章 总结与讨论

6.1 总结

6.2 讨论与展望

参考文献

致谢

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