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侗药黑老虎的研究进展

来源:花匠小妙招 时间:2025-05-04 07:41

侗药黑老虎的研究进展

侗药黑老虎的研究进展

朱俊秀等

基金项目:湖南医药学院“2020年大学生创新创业训练计划项目” (53)

侗药黑老虎是一种历史悠久的民间药用植物,为五味子科南五味子属植物厚叶五味子的干燥根和藤茎 ;又为木兰科南五味子属植物绯红南五味的根或藤茎 。其性温,味辛、微苦,主治肠胃疾病、风湿性关节炎、痛经和产后瘀血阻滞腹痛等 。现代药理研究显示其提取物具有抗肿瘤 、抗HIV 、抗氧化 、调节血脂 及保肝 等作用。

黑老虎拉丁文学名为Kadsura coccinea(Lem.)A. C. Smith,基原较统一。有一个变种名为四川黑老虎(K. coccinea var.Sichuanaensis),以雄蕊群花托顶端无附属体区别于黑老虎,主要分布在四川峨眉山 。在名称上,以“黑老虎”和“黑老虎根”居多,但因黑老虎的分布范围较广、方言迥异及各产地之间差异等原因,有较多别名,如“冷饭团” “臭饭团” “过山龙藤” “布福娜”等(见表1),极大地限制了黑老虎的研究和开发。故笔者对黑老虎药材基原、栽培、化学成分及药理作用等方面研究进展及所存在的问题进行综述和剖析,以期为黑老虎后期的研究和开发提供参考。

表 1 黑老虎的种类

1 侗药黑老虎的鉴定

1.1 黑老虎历史渊源研究黑老虎药用始载于《岭南采药录》 ,“妇女经期前后肚痛,酒煎饮之,水煎亦可,并治妇人产后风。颇验……霍乱吐泻抽筋,以根煎服。” “过山风”最早记载于《生草药性备要》,其被描述为“过山风,味辛,性平。祛风湿,浸酒,壮筋骨。又名钻地风。” “黑老虎根”收载于1977年版《中华人民共和国药典》。《新编中药志》中记载黑老虎根“味辛,性温。有行气活血、祛风止痛功能。”《全国中草药汇编》载:“主治胃、十二指肠溃疡,慢性胃炎,急性胃肠炎,风湿性关节炎。” 《湖南药物志》载:“治闭经,病久无力,劳伤腰痛”。《中华本草》中记载黑老虎药性为“味辛、微苦,性温”;其功能与主治为“行气止痛,散瘀通络”。 《中国药材学》中记载黑老虎性味功效为“辛、微苦,温。行气活血,祛风止痛”。《广西中草药》第2册 [19] 中记载黑老虎(冷饭团)性味功用为“味辛,气香,性微温。活血散瘀,行气止痛,祛风湿”。

1.2 黑老虎的性状鉴定黑老虎根呈圆柱形,略扭曲;表面深棕色至黑褐色,具椭圆形皮孔及横向裂纹,皮部宽厚,易剥离;质坚韧,不易折断;断面皮部厚,粗纤维性,灰棕色或棕褐色,有淡黄色小点散在;木部黄白色或棕黄色,密布导管细孔。藤茎圆柱形,表面灰褐色或棕褐色;质坚韧,不易折断,断面粗纤维性,皮部易剥离,嚼之有生番石榴味,渣滓很少;木部棕黄色或浅棕色,可见放射状排列的小孔(导管),中央有深棕色的髓部。气微香,味微甘辛。以条大小均匀,皮厚色黑,气味浓者为佳 。

1.3 黑老虎的显微鉴定粉末鉴别 :黑老虎药材粉末为红棕色至黑褐色。木纤维细胞壁较平直,壁较薄,胞腔大,有一字或人字形纹孔。草酸钙小方晶密布在纤维壁中,构成嵌晶纤维,直径20~80 %u3BCm。多破碎的网纹导管和具缘纹孔导管,直径30~50 %u3BCm。油细胞多破损,完整者类圆形,内含圆形黄色油滴。淀粉粒单粒或复粒,半圆形、椭圆形、三角形或鸟嘴形,直径5~25 %u3BCm。石细胞类方形或椭圆形,偶有嵌晶,壁孔明显。

1.4 黑老虎的理化鉴定

1.4.1 显色鉴别取样品粉末1 g,加蒸馏水10 mL,混匀,浸泡30 min,滤过,得供试品溶液。另取2只试管,分别加入供试品溶液1 mL,一只滴入三氯化铁试液3~5滴;另一只滴入碘化秘钾试液5滴。结果黑老虎供试品溶液遇三氯化铁试液生成棕色沉淀,遇碘化秘钾试液生成红棕色沉淀 。

1.4.2 泡沫鉴别取黑老虎样品粉末1 g,加蒸馏水10 mL浸泡30 min,滤过,得供试品溶液。取供试品溶液2 mL,置于试管内,用力激烈振摇。结果黑老虎供试品溶液经振摇产生大量泡沫,且在2 h内气泡没有消失 。

1.4.3 薄层色谱鉴别取样品粉末各1 g,加乙醇30 mL,超声处理30 min,滤过,浓缩,定容至5 mL,即得供试品溶液。另取化合物Manwuweizic acid对照品2 mg,置于5 mL容量瓶并用乙醇定容,作为对照药材溶液。薄层色谱法试验,吸取上述2种溶液各5~10 %u3BCL,分别点于GF245硅胶薄层板上,展开剂为石油醚、甲酸乙酯、甲酸混合液(体积比为12∶7∶1),展开,取出,晾干,再置于254 nm紫外灯下观察现象。供试品有淡淡的暗斑及色谱带,不同产地由于成分含量不同颜色显示深浅不一。除此之外,喷以10%硫酸-乙醇,在105 ℃的烘箱中显色3 min,在365 nm紫外灯下观察 。此时斑点清晰明亮,不同产地之间出现了相同的色谱带,而由于成分含量不同,故斑点清晰度不一。

1.5 湖南通道黑老虎新品种繁育研究黑老虎侗语被称为“高宁”,而湖南通道县的黑老虎还获评为国家农产品地理标志。通道黑老虎中药材专业合作社采用品种繁育技术人工繁育了22个栽培品种,根据果实外皮颜色、大小、果肉含糖分水平分别将其命名。 目前黑老虎在生产、种植的技术方面已经取得较好的经济效益。只有在品种优化、口感、耐储运和加工等方面作进一步改良,并且提高附加值,黑老虎的手工皂、精油、果汁、药酒、中药面膜等系列产品才会得到全面的发展。

2 侗药黑老虎的栽培

2.1 种苗繁殖根据黑老虎生长发育过程的优点,黑老虎的繁殖可采用实生繁殖、扦插繁殖、嫁接繁殖和压条繁殖等4种育苗方式 ,各种繁殖方法都有不同的优缺点。扦插繁殖的成活率高,但是根部能力弱、长势差,要适当密植。嫁接繁殖虽然集齐了实生、扦插的优点,但嫁接程度比较复杂。实际生产中黑老虎的繁殖多以种子育苗为主,其操作技术简单,且苗木根系好,移栽成活率较高。由于其喜湿,生态环境湿度大的条件更有利于种子萌发、幼苗生长。其根系浅,不耐瘠,故黑老虎应种植在地势平缓、土层厚、保水保肥、质地疏松、排水优良的砂质壤土中 。

2.1.1 出苗率研究研究者从浸种药剂种类与浓度、温度、浸种时间、不同施肥方式等方面观察了不同预处理对黑老虎发芽和出苗率的影响。赵艳等 对采自贵州省剑河县的冷饭团种子进行了4种不同催芽处理试验研究,发现以40 ℃的温水浸种8 h为对照;用50 %u3BCg/mL赤霉素(Gibberellin,GA)溶液浸种8 h沙藏处理,发芽较早,发芽率最高;以0.5ÊCl 2 +50 %u3BCg/mL GA混合液浸种8 h沙藏处理,种子萌发效果不明显,但出苗率最高且生长健壮;以100 ppm(百万分之一)智能100溶液浸种8 h处理,对萌芽及出苗有一定的抑制作用。

表明GA溶液和氯化钙对冷饭团种子萌芽和出苗率均有不同程度影响,这对冷饭团的种植栽培有一定指导意义。李有清等 用湖南通道县品种紫黑一号,设计不同种子预处理及不同施肥,探索提高黑老虎种子繁殖出苗率及促进黑老虎幼苗生长的有效途径。结果显示在赤霉素浓度30 mg/L,浸泡48 h,种子出苗率最高,达到91%。综上,浸种药剂种类与浓度、浸种时间、贮藏以及施肥方式均可影响黑老虎发芽和出苗率。故在黑老虎的种苗繁殖时,各研究学者应再深入研究,探索在不同条件下,筛选影响种子出苗率的最佳育苗组合条件。

2.1.2 扦插繁殖技术研究 扦插繁殖技术会影响黑老虎生根率、生根数、根长等,其原因主要与扦插基质和茎枝木质化程度等有关。黄意成等 研究黑老虎扦插生根的最佳条件,探讨了扦插基质、插穗木质化程度和植物生长调节剂对黑老虎扦插生根的影响。结果表明黄心土、园土、腐殖质土和珍珠岩4种基质中,腐殖质土作为扦插基质最优;全木质化、半木质化、幼嫩插穗3种不同木质化程度的插穗中,幼嫩的未木质化插穗生根率、生根数、平均根长最高;分别采用植物生长调节剂萘乙酸、吲哚丁酸、生根粉和高锰酸钾的3种浓度(50、100、200 mg/L)处理,在萘乙酸浓度为100 mg/L时黑老虎生根率为(75.99%uB10.30)%。因此,采用幼嫩的未木质化黑老虎插穗,经100 mg/L萘乙酸处理后,扦插于腐殖质土中生根效果最好。综上,因不同扦插基质的持水力、透气性、土壤理化性质等有所不同选择合适的扦插基质是扦插成功的关键;茎枝木质化程度影响着插穗的再生能力与活力,从而影响插穗扦插过程的适应过程和根系的萌发;合适的植物生长调节剂能显著促进生根率。

2.1.3 黑老虎苗木质量分级标准研究苗木质量评价一般从有无病虫害、机械损伤、顶芽饱满情况、叶色、木质化程度等形态指标正常与否进行评价;另外苗木质量可从苗木鲜重、苗高、地径等进行综合评价。尹艾萍等 为解决人工培育藤本植物黑老虎的苗木质量问题,采用云南省6个产地的黑老虎种子,在相同培育措施下,以不同种源8个月龄的黑老虎的藤高和地径作为其苗木质量的数量评价指标。结果表明,在相同的培育措施下,不同种源黑老虎苗木分级结果存在差异;不同种源8个月龄的苗木合格苗比例也有差异;不同产地之间8个月龄的苗木藤高和地径差异都极显著。郑彦歆等 研究了不同处理方法对布福娜种子出苗率和苗木质量的影响。该试验从不同浸种溶液、浸种时间和处理方式探讨其对黑老虎种子出苗率与苗木质量的交互作用及最佳配比处理组合。结果表明1ÊCl 2 +100 mg/L GA3溶液、浸种12 h与冬季室外沙藏的组合,出苗率最好,种苗质量最高。故要得到优良的苗木质量,应综合考虑黑老虎种源、培育地气候环境等,且还应考虑不同浸种溶液与浸种时间对苗木质量的影响。

2.2 生长发育 梁忠厚等 通过观察黑老虎形态特征和生长发育特性,发现黑老虎年生长发育阶段过程具有明显的萌芽、快速生长、缓慢生长、休眠等规律。黑老虎在微酸性至中性土壤、20~25 ℃温度、温暖湿润的条件下生长良好,适应性较强。

2.2.1 光照对黑老虎生长的研究同种植物在不同的光照下和不同的植物在相同的光照下生长状况都会有差异,可通过植物基茎粗细、植株高矮等方面综合分析其适宜生长的光照条件。漆小雪等 研究了不同光照对黑老虎生长及叶片叶绿素含量相对值(SPAD值)的影响,其将盆栽成活后的黑老虎幼苗分别进行不同的光照处理,其光照分别为全光照(100%)、10%光照、30%光照、50%光照。根据基径粗细、植株高矮、叶片数量、叶面积和冠幅大小以及叶片SPAD值,综合分析可知黑老虎属于喜阴植物,当光照30%~50%是其最适宜的遮荫度,且强光和弱光都不利于黑老虎的生长发育。光照强度、光照时间和光谱成分的改变都将对黑老虎的生长产生影响,因此只有在最适光照下才最有利于植物生长。

2.2.2 气候条件对黑老虎生长的影响黑老虎的健康生长与多种因素有关,其中气候与土壤条件在黑老虎生长过程中具有重要作用,主要影响其存活率。杨云洁等 对湖南省新晃县种植黑老虎的气候条件进行了分析。新晃县森林覆盖率广,热量资源丰富,四季分明,气温适宜,雨水充沛,温暖湿润,拥有独特山地地形。1981—2018年新晃县年平均气温为16.6 ℃,年平均降水为1 164.7 mm。而黑老虎生育期主要受干旱的影响,以及定植第一年内受低温冷害、高温热害的影响较大。故为防止干旱,提高存活率,规模种植黑老虎应尽量选择离水源比较近的疏林中;为避免低温冷害,提高幼藤保存率,黑老虎定植时间安排在3月后;采取仿生态栽培技术,将黑老虎种植在疏林下或者搭建遮阳网,可避免高温灼伤,提高保存率。

2.2.3 黑老虎果实的生长发育研究黑老虎年生长发育阶段过程具有明显的萌芽、快速生长、缓慢生长、休眠等规律。陶光林 通过对贵州省东南部剑河县冷饭团开花结实的调查研究发现,冷饭团果实生长发育可划分为5个阶段:受精结实期、速生期、缓生期、充实期、熟前生长期。落果期为6月中、下旬至7月下旬,7月上旬出现落果高峰,8月及以后很少落果。开花期为6月上旬至7月下旬,历时约60 d,6月下旬为盛花期。

2.3 病虫防治药用植物在栽培过程中,若受到有害生物的侵染或不良环境条件的影响,正常新陈代谢会受到干扰,从生理机能到组织结构均会发生一系列的变化和破坏,以至在外部形态上呈现反常的病变现象,如枯萎、腐烂、斑点、霉粉、花叶等,统称病害。危害药用植物的动物种类很多,主要是昆虫,另外有螨类、蜗牛、鼠类等。梁忠厚等 发现危害黑老虎的病虫害共有22种,其中虫害18种,病害4种。在黑老虎推广栽培过程中,应重点加强预防为主,综合施治为辅。如为了减少病虫害的发生,应综合考虑土壤、地形、海拔及小气候等环境条件,选择适宜的种植地;积极利用天敌防治虫害,进行生态防治;在危害严重时,还可利用灯光、黄板等设施于成虫羽化期引诱害虫进行捕杀 。下面主要以枝枯病、轮斑病来介绍黑老虎的病虫害发病与防治。

2.3.1 枝枯病枝枯病是由真菌引起的危害植物枝干的一种病害。病部树皮微肿胀,淡褐色,随着病情发展,树皮呈明显长凹陷斑,皮层松软腐烂,枝条枯死。石春发等 研究结果表明发病的黑老虎枝条从伤口处开始褪色,初期颜色呈浅褐色,病斑不规则,后病斑逐渐扩大至整个枝条变黑褐色;根据病原菌形态特征、致病力测定及多基因系统发育分析,引起黑老虎枝枯病的病原菌为小新壳梭孢Neofusicoccum parvum;该菌在不同的碳源中均能正常生长,菌落直径及颜色有显著差异,而在氮源为碳酸铵的培养基中不能生长,在其他氮源培养基中均能正常生长。

2.3.2 轮斑病谢津 发现黑老虎轮斑病是黑老虎的一种严重的新病害,故开展了病原分离、致病性测定和病原鉴定,并对该病原产生的毒素进行了研究,还进行了黑老虎轮斑病的防治试验。此病菌为棒状新拟盘多毛孢(Neopestalotiopsis clav-ispora)。黑老虎轮斑病病菌鉴定最终分离出了3个毒素,以oxys-porone含量最多,且对黑老虎的伤害最强,其次是afritoxinone B,afritoxinone A活性最弱。80%代森锰锌可湿性粉剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、25%嘧菌酯悬浮剂、45%咪鲜胺水乳剂、40%苯醚甲环唑悬浮剂和25%丙环唑乳油等6种杀菌剂中味鲜胺对黑老虎轮斑病的室内毒力最好,但大田防治效果不佳。嘧菌酯的室内毒力一般,但田间防效最好。

3 黑老虎的化学成分及药理作用

现代研究表明,黑老虎化学成分主要为木脂素类(以联苯环辛二烯类为主)、三萜类、花色苷、单萜类、倍半萜类、甾体类和氨基酸等。现代药理研究证实,黑老虎及其提取物具有抗肿瘤、抗HIV、抗炎、保肝及抗氧化等作用。现将黑老虎中所含主要化学成分及其药理作用整理如下。

4 黑老虎的临床应用

4.1 风湿性疾病黑老虎因能行气活血,祛风除湿止痛,具有祛风湿和抗炎作用,可用于治疗痛风、肩周炎和关节炎等。胡子衡等 采用黑老虎经穴导入脉冲电磁法治疗痛风性关节炎,与单纯电针组进行比较,发现其疗效持久性更具优势。邓利旺 探讨了肩周炎的中西医结合治疗方法,采用痛点注射健骨注射液、口服驱风痛片治疗肩周炎,疗效高、复发率低。施旭光等 研究了白虎追风胶囊对大鼠佐剂性关节炎(Adjuvant-induced arthritis,AA)的治疗作用,结果表明其大鼠AA原发病变和继发病变都有较好的治疗作用。

4.2 妇科类疾病黑老虎对妇科类疾病有一定治疗作用,尤其是治疗痛经有显著疗效,此外,对治疗不孕症也有一定效果。毒副作用少是其显著优点,而黑老虎治疗妇科疾病的药理机制尚不明确,有待于进一步研究。梁立等 应用驱风痛片治疗原发性痛经患者45例,有效率为91.11%,且无明显毒副作用。黄建海 采用冷饭团30 g,山苍子根15 g,以水煎服,治疗痛经患者,疗效较好。王冰洁等 为研究中药黑老虎汤的临床应用效果,选取126例中、轻度子宫内膜异位症伴不孕患者进行中西药对比治疗,中药组受孕率为59.7%,明显优于西药组(43.7%)。

4.3 肝病研究表明,黑老虎有较好的降酶、保护肝细胞和抗肝纤维化作用,其作用机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。朱树凡 观察了中药冷饭团对大鼠实验性肝损伤的治疗效果,结果发现其能明显降低实验性肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),降低肝组织丙二醛(MDA)含量,提高肝组织和血清超氧化物歧化酶(SOD)水平。黄继海等 探讨了冷饭团的抗肝纤维化作用,发现其能明显降低实验性肝纤维化大鼠ALT和AST活性,升高血清白蛋白(Alb),降低肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,减轻大鼠肝细胞损害、肝脏脂肪变性和胶原纤维增生的程度。徐卫权等 为探讨冷饭团抗肝纤维化的作用机制,观察其对实验性肝纤维化大鼠肝组织B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax基因(Bax)及增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达的影响,发现冷饭团能明显减轻实验性肝纤维化大鼠肝组织损伤和肝纤维化程度。

5 总结与展望

黑老虎为侗族民间特色药材,主要含有木脂素类、三萜类、花色苷、单萜类、倍半萜类、甾体类和氨基酸等多种有效成分,具有抗肿瘤、抗HIV、抗炎、保肝、抗氧化等作用。目前研究主要集中在化学成分及药理作用方面,尚缺乏药材及其产品的质量控制,鲜有与疾病相关的药效物质基础及作用机制等系统性的深入研究。黑老虎的种植随着气候、海拔等环境的不同,以及各地种质资源存在差异,产量及存活率均不高。黑老虎具有较高药食保健价值和观赏价值,应在开展黑老虎相关产品质量控制和药效物质基础的同时,设计黑老虎种植的最优方法。这对综合利用黑老虎资源、促进其产业发展具有一定促进作用,可推动黑老虎的可持续发展。

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