独花兰的快速繁殖方法.pdf
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域,更具体涉及一种借助基本培养基和附加不同成份对独花兰进行快速繁殖的方法。
背景技术
独花兰〔Changnienia amoena Chien〕又名独蒜兰,兰科独花兰属植物,分布于江苏、浙江、安徽、江西、湖南、湖北、陕西、四川、生于海拔400-1500m处的阴坡常绿阔叶林和常绿、落叶阔叶混交林下,潮湿的沟边和山谷岩壁下。是国家二级保护稀有种。
为我国特有的单种属植物,近年因生境破碎化和过度采挖,迄今对独花兰极为有限的研究表明,其结实率很低或根本不结实,其传粉媒介也一直未被发现。独花兰为陆生多年生直立草本,生于林下或林边阴湿处及岩石上。高10-15厘米,为我国特有的稀有植物。花仅顶生一朵,大而色艳丽,淡紫色,观赏价值颇高;全草皆可入药,假面具鳞茎能用来治疗疮毒和蛇毒,具凉血、清热、解毒之功能,又是珍贵的药用植物和优良的野生花卉。生长于我省陕南地区,是一种野生资源极为丰富的花卉。但由于人们为了得到新奇的珍品,不惜以破坏资源为代价,乱采滥挖,致使野生资源破坏极为严重,有的已致濒危。
独花兰种子繁殖比较困难,一般采用分株法,由于在自然条件下的繁殖系数极低,一般年繁殖系数在1-2左右,有的品种繁殖系数甚至达不到1,因此,一些优良品种虽然栽种了几百年的历史,现今存世的单株依然十分稀少,已经超越了自身应有的观赏价值。
发明内容
本发明的目的是在于提供了一种独花兰的快速繁殖方法,方法易行,操作方便,繁殖速度快,可加快独花兰优良单株的快速繁殖。
为了达到上述目的,本发明采用以下技术措施:以独花兰的球茎、侧芽作为外植体,首先将植株洗净,用75%酒精浸泡10~30秒钟,用0.1%氯化汞消毒10~20分钟,用无菌水冲洗4~6次,其次是将消毒好的球茎和侧芽接入配制好的改良MS培养基中,这种培养基包括MS基本培养基和附加不同成份的物质,其中改良成份是硝酸钾(KNO3)600-1200mg/L、硝酸氨(NH4NO3)650-1200mg/L、氯化钙(CaCl2.2H2O)110-300mg/L、硫酸镁(MgSO4.7H2O)120-230mg/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)60-110mg/L;附加成份为6-苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine简称BA)0.5~5mg/L、萘乙酸(I-NaphthyIacetic acid简称NAA)0.05~1mg/L、性碳琼脂6000~8000mg/L、糖20000~30000mg/L、椰子汁5-15%、活性碳0.1-0.5%、香蕉泥5-15%、土豆泥5-15%、西红柿汁1-5%混配;第三是光照培养,温度为20~28℃,光强1500~3000Lx,每天室内光照10~16小时,培养30~90天,从球茎长出新侧芽,以后每30~40天扩繁一次。
本发明与现有技术相比,具有以下优点和效果,方法易行,操作方便,繁殖速度快,不受季节限制,30~60天的增殖倍数达到2~3倍,一年一个芽可繁殖200多株种苗。
具体实施方式
实施例1:
以植物独花兰作为外植体,首先将植株洗净,将一个个地小球茎侧芽,用75%酒精浸泡12或16或18或22或26或30秒钟,用0.1%氯化汞消毒10或14或16或20分钟,用无菌水冲6次;并将消毒好的球茎和侧芽接入配制好的培养基中,这种培养基包括MS基本培养基和附加不同成份的物质,其中改良成份是硝酸钾(KNO3)1200mg/L、硝酸氨(NH4NO3)1100mg/L、氯化钙(CaCl2.2H2O)300mg/L、硫酸镁(MgSO4.7H2O)230mg/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)110mg/L;附加成份为6-苄氨基嘌呤(6-Benzyl aminopurine简称BA)5mg/L、萘乙酸(I-NaphthyIacetic acid简称NAA)0.5mg/L、琼脂7000mg/L、糖20000mg/L、土豆泥10%、活性碳0.3%混配;以下成份见MS基本培养基.光照培养10~16小时,温度为20或24或26或28℃,光强1500~3000Lx,每天光照10~16小时,培养30~90天,使长出新芽,以后每30~50天扩繁一次。
MS基本培养基的成份(单位:mg/L):
硝酸氨 1650
硝酸钾 1900
二水氯化钙 440
七水硫酸镁 370
磷酸二氢钾 170
碘化钾 0.83
硼酸 6.2
四水硫酸锰 22.3
七水硫酸锌 8.6
二水钼酸钠 0.25
五水硫酸铜 0.025
六水氯化钴 0.025
七水硫酸亚铁 27.8
乙二胺四乙酸二钠 37.3
肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇 0.5
盐酸硫胺素 0.1
甘氨酸 2
实施例2:
以植物独花兰作为外植体,首先将球茎及侧芽洗净,将一个个的小球茎,用75%酒精浸泡15或20或25或30秒钟,用0.1%氯化汞消毒12或15或18或20分钟,用无菌水冲洗5次;并将消毒好的球茎和侧芽接入配制好的培养基中,这种培养基包括MS基本培养基和附加不同成份的物质,其中改良成份是硝酸钾800mg/L、硝酸氨700mg/L、氯化钙150mg/L、硫酸镁120mg/L、磷酸二氢钾800mg/L;附加成份为BA 5mg/L、NAA 0.5mg/L、2,4--二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxy aceticacid简称2,4-D)2mg/L、琼脂7000mg/L、糖20000mg/L、西红柿汁0.1%、活性碳0.3%混配;光照培养10~16小时,温度为20或22或25或27或28℃,光强1500~3000Lx,每天光照10~16小时,培养30~90天,使长出原球茎,以后每30~50天扩繁一次。
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