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一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法与流程

来源：花匠小妙招时间：2025-05-01 14:27

技术特征：
1.一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制备甜灵芝原种；母种培养基包括以下成分：土豆400g/l、葡萄糖40g/l、琼脂25g/l、蛋白胨12g/l、硫酸镁1.5g/l、磷酸二氢钾3g/l、vb11 mg/l，ph自然；在28～30℃下恒温黑暗培养；在母种培养基中培养起甜灵芝母种后，将甜灵芝母种接种至原种培养基培养，得到甜灵芝原种；所述原种培养基包括以下重量份的成分：茶蒲屑30～45％、茶籽壳屑15～20％、麦麸10～15％，玉米粉10％、石膏1％、石灰粉1％、蔗渣10～18％、过磷酸钙2％；在25～28℃、相对湿度85～95％下恒温黑暗培养；2)将甜灵芝原种接种至栽培种培养基中培养，获得甜灵芝栽培种；所述栽培种培养基包括以下重量份的原料：杂木屑70～80份、麸皮10～15份、米糖4～7份、黄豆粉1～3份、石膏粉2份，ph5-6，含水量50-60％，之后置27℃室内培养，培养时间约30～60天，可长满全瓶，得到甜灵芝栽培种；3)将所述甜灵芝栽培种进行代料栽培，获得甜灵芝；所述代料栽培的培养基与所述栽培种培养基相同，所述代料栽培条件为在26～27℃、相对湿度80～90％下恒温培养，保持co2体积分数在0.3％，待菌柄长至4cm～5cm时修枝，修枝后co2体积分数降低至0.08％～0.1％，继续培养，得到甜灵芝。2.如权利要求1所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，所述原种培养基中还包括20～30％的花生根，在制备所述原种培养基时，包括以下步骤：将茶蒲屑、茶籽壳屑经过自然堆积发酵，堆高2.5m，保持推料湿润，每1个月翻堆依次，堆制6个月，使其中的单宁、油脂等对甜灵芝生长有害的物质消除，堆制结束后，将茶蒲屑、茶籽壳屑晒干，将茶蒲屑、茶籽壳屑充分软化后备用；将收集的花生根晒干，粉碎成花生根屑，备用；将晒干后的茶蒲屑、茶籽壳屑与粉碎后的花生根屑搅拌均匀，然后将石膏、过磷酸钙、石灰粉、玉米粉、麦麸溶解于水，再加入拌匀后的茶蒲屑、茶籽壳屑和花生根屑，配置好的料堆闷5小时，使原种培养基的含水量保持在63％～65％，ph5～6.5。3.如权利要求2所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，在将甜灵芝母种接种至原种培养基培养时：按原种培养基质量5％～10％接种量接种到斜面的原种培养基上，在25～28℃、相对湿度85～95％下恒温黑暗培养20～35d，至菌丝长满斜面，挑取长势旺盛、粗壮均一的作为甜灵芝原种于4℃保藏备用或进一步培养。4.如权利要求3所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，在将甜灵芝原种接种至栽培种培养基中培养时：按栽培种培养基质量5～10％接种量接种到栽培种培养基上，在27℃、相对湿度85～95％下恒温黑暗培养30～60d，至菌丝充满栽培生产用的瓶子，得到甜灵芝栽培种。5.如权利要求4所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，在将甜灵芝母种接种至母种培养基之前，还包括制备甜灵芝母种，包括以下步骤：取甜灵芝子实体，浸泡于超净台上的生物消毒液中进行消毒，浸泡时间为3分钟，然后取出；用无菌手术刀切开消毒后的子实体，在菌柄和菌盖之间显露出的菌肉中切取米粒大小
作为外植体，然后取外植体喷洒保鲜液，再密封以保持无菌状态，接着置于8℃下冷藏8～10小时，取出后再置于30～32℃下活化10～12小时，重复进行冷藏和活化5次，得激活外植体；将激活外植体接种于母种培养基上，在28～30℃培养10～20天，使培养基长满菌丝体，得母种；培养期间为恒温黑暗培养。6.如权利要求5所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，在进行代料栽培时，包括以下步骤：在代料栽培初期，co2体积分数在0.3％的阶段，避光培养；当修枝后且co2体积分数降低至0.08％～0.1％时，每天采用波长为670～720nm的红光和波长为512～520nm的绿光交替照射，设置光照强度为300～500lx，先利用红光照射60分钟，再切换至黑暗无光照条件，替换至利用绿光照射60分钟，再切换至黑暗无光照条件，控制红光和绿光在一天内的总光照时间为480～600分钟，红光和绿光之间的间隔时间为30分钟。7.如权利要求6所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，所述栽培种培养基还包括重量份为12～15份的蜜环菌发酵液，所述蜜环菌发酵液中有效活菌数为1.0～5.0
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106/ml。8.如权利要求7所述的一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，其特征在于，所述栽培种培养基还包括重量份为1～5份的漆酶液，所述漆酶液的漆酶活力为500～800u/g。

技术总结
本发明公开一种组织培养快速繁殖甜灵芝的方法，包括以下步骤：在母种培养基中培养起甜灵芝母种后，将甜灵芝母种接种至原种培养基培养，得到甜灵芝原种；将甜灵芝原种接种至栽培种培养基中培养，获得甜灵芝栽培种；将所述甜灵芝栽培种进行代料栽培，获得甜灵芝。本发明利用茶蒲屑和茶籽壳屑来配制原种培养基，减少木屑使用量，经过栽培种培养基的培养后，利用代料栽培培养基进行代料栽培，在不同培养阶段控制不同的CO2浓度，使产出的甜灵芝的生长速度更快，产出稳定性高，质量好。质量好。

技术研发人员：陈晔颜桂萍吴基城廖燕平何文彩
受保护的技术使用者：韶关市五马寨菌业有限公司
技术研发日：2022.10.14
技术公布日：2022/12/29