霍山石斛种苗繁育技术规程LY/T2449

霍山石斛种苗繁育技术规程(正文)

1  范围

本标准规定了霍山石斛（Dendrobium huoshanense C. Z. Tang et S. J. Cheng）种苗繁育的种源、蒴果选择与处理、种苗培育、种苗质量、存放及假植、文件记录和档案管理。

本标准适用于利用霍山石斛种子，采用无菌播种技术繁育霍山石斛种苗。

2  规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 3543.2  农作物种子检验规程  扦样

GB/T 5749  生活饮用水卫生标准

3  术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

原球茎  protocorm

种子经过胚的膨大，种皮破裂后形成肉眼可见浅黄色呈球状或圆锥状的原胚。

3.2

丛生芽  multiple shoot

原球茎经诱导产生数量众多、簇生的芽。

4  种源

4.1  原植物

原植物应符合《中国植物志》收载的兰科植物霍山石斛（Dendrobium huoshanense C. Z. Tang et S. J. Cheng）的植物特征，经过鉴定确认。

4.2  留种要求

留种植株应选择生长健壮的植株，且在直径1Km内无其它种类石斛。在花期，进行异花授粉，母本在授粉后立即摘除唇瓣，及时挂牌标示。授粉当年10月份以后，蒴果开始转黄时，选择成熟饱满的蒴果采收。

5  蒴果选择及处理

5.1  蒴果选择

选择成熟饱满、无病虫害、无机械损伤、无自然开裂的蒴果。

5.2  蒴果处理

用水充分清洗蒴果表面的灰尘，所用水质执行GB/T 5749。晾干表面的水份，用洁净纸进行包裹，在4℃冰箱中保存一周。处理后的蒴果用75%酒精浸泡15min～20min后在酒精灯火焰上灼烧1S～2S，备用。

6  种苗培育

6.1  无菌播种

在无菌条件下，用镊子夹住消毒处理过的蒴果果柄，用解剖刀切开蒴果顶端，将蒴果置于培养瓶内轻轻的抖动，均匀撒播一层种子于MS培养基表面，立即封住瓶口。

6.2　种子萌发

播种的培养瓶置于温度为（25士2）℃的洁净环境中暗培养1周后，在光照强度为1500μmol·m－2·s－1～2000μmol·m－2·s－1，光照时长为10h/d～12h/d的条件下，继续培养30d～45d形成原球茎。

6.3  原球茎增殖

选取健康饱满、无污染的原球茎在改良MS培养基上,进行原球茎增殖。光照强度为1500μmol·m－2·s－1～2000μmol·m－2·s－1，光照时长为10h/d～12h/d，继代培养55d～65d。

6.4  丛生芽诱导

选择健康，无污染的原球茎在改良MS培养基上,诱导丛生芽。光照强度为1500μmol·

m－2·s－1～2000μmol·m－2·s－1，光照时长为10h/d～12h/d，培养40d～55d。

6.5  丛生芽增殖

选择健康，无污染的丛生芽在改良MS养基上,进行丛生芽增殖。光照强度为1500μmol·

m－2·s－1～2000μmol·m－2·s－1，光照时长为10h/d～12h/d，培养50d～70d。

6.6  生根壮苗

选择芽体健康，无污染，芽高1.5cm～2.5cm的丛生芽在1/2MS培养基上,生根壮苗。光照强度为1500μmol·m－2·s－1～3000μmol·m－2·s－1，光照时长为10h/d～12h/d，培养65d～75d。

6.7  继代次数

原球茎和丛生芽继代次数控制在4代以内。

7  种苗质量

7.1  炼苗

种苗在温度15℃～35℃、光照2000μmol·m－2·s－1～20000μmol·m－2·s－1范围条件下锻炼15d～20d后，种苗叶片变深绿即可出瓶。

7.2  出瓶洗苗

打开瓶口，用镊子将经过炼苗后的种苗轻轻夹出，在流动的水下进行清洗，洗净根部附着的培养基。

7.3  消毒

将清洗好的种苗用广谱性杀菌剂稀释喷雾或浸泡 5s～10s。处理后置于阴凉地方平摊存放，切忌堆放过厚。

7.4  种苗要求

用于栽培的种苗应无污染、无烂茎、无烂根、无黄叶、叶色深绿且正常展开。

7.5  种苗分级

种苗分级见表1。

表1  霍山石斛种苗分级

指  标

等   级

一级

二级

根数/条

≥3

1～2

叶片数/片

≥4

2～3

苗高/cm

＞3.5

2.5～3.5

苗径/cm

＞0.25

0.15～0.25

7.6  判定规则

7.6.1  抽样

按GB/T 3543.2执行。

7.6.2  根数

目测根数。

7.6.3  叶片数

目测叶片数。

7.6.4  株高

用分度值1mm直尺测量茎基部至最高叶片尖端的距离。

7.6.5  茎粗

用游标卡尺测量茎的最粗部位值。

7.6.6  等级判定

根数、叶片数、株高、茎粗四项指标必须同时达到本标准7.5指标要求的方可判定为一级苗或二级苗。四项指标中即使有三项指标达到一级苗标准，而另一项只达到二级苗标准，则为二级苗；四项指标中即使有三项指标达到二级苗标准，而另一项未达到二级苗标准，判定为不合格苗。

8  存放

消毒后的种苗存放时应注意通风、透气，并附上标签。存放期间应保持叶片不萎蔫，不脱水，可喷水增加叶片湿度，所用水质执行GB/T 5749。消毒后的种苗在根部晾干发白后72ｈ内栽种完毕。

9  假植

出苗后3d内不能立即外运或栽植的，要进行假植。假植设施和条件要满足石斛生长的要求，冬季配备必要的防冻保温设备。

10 文件记录和档案管理

10.1  基础资料

蒴果的来源,留种植株的栽培基质、施肥种类、施用量、次数,留种植株病虫防治的用药种类、施药方法、时间、次数,以及留种植株其它各种农事管理措施均应作详细的生产记录。蒴果采收批次、时间、处理方法、条件和时间等也应做详细记录。

10.2  生产管理记录

包括蒴果用量、育苗条件、培养时间、培养管理、炼苗情况、栽植时间、栽植后成活率等记录。

10.3  档案管理

所有基础资料及生产管理资料均应建立档案并由专人保管，长期保存，具备条件的应建立计算机档案管理系统。

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