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罗布麻花提取液的制备方法及其在美白护肤产品中的应用与流程

来源：花匠小妙招时间：2025-04-06 14:36

本发明属于天然植物化妆品添加剂领域，涉及一种具有美白和抗氧化功效的罗布麻花水提取液和醇提取液及其在护肤产品中的应用。

背景技术：

据《中国植物志》记载，罗布麻为罗布麻属夹竹桃科植物罗布麻apocynumvenetuml.(又名罗布红麻)、白麻属植物大叶罗布麻poacynumhendersonii(hook.f)woodson(又名罗布白麻)和白麻poacynumpictum(schrenk)baill.，各类型罗布麻的成分存在明显不同。15版药典罗布麻来源于罗布麻(apocynumvenetuml.)。《本草纲目》记载罗布麻有平心悸、止眩晕、消喘止咳、安神助眠和强心利尿之功效。现代研究表明，罗布麻含有黄酮苷、酚性物质、有机酸、氨基酸、多糖苷、糅质、甾醇和甾体皂苷等物质。黄酮苷类具有很好的保护肌肤作用，罗布麻中的黄酮苷主要有金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮苷。金丝桃苷能够抑制酪氨酸合成，进而干扰黑色素产生；异槲皮素具有清除羟自由基和超氧阴离子的作用。

b16黑素瘤细胞株的黑素合成功能与人正常的皮肤黑素细胞基本一致，在人体原代皮肤黑素细胞培养非常困难和动物研究逐渐退出的实验研究情况下，国外化妆品生产企业和科研单位在筛选美白剂的过程中，广泛采用该细胞株作为美白成分功效测定的受试细胞。另一方面，黑色素是影响皮肤美白的主要因素，本发明探讨了罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16黑素瘤细胞株黑色素的影响。

自由基是人体自身代谢及生命活动过程产生的生化物质，过量的自由基会导致许多疾病的发生，在皮肤方面的表现为松弛衰老。皮肤的衰老是指皮肤出现功能或者器质性的退行性改变，表现为干燥、皱纹、松弛、色斑或起屑等。因此，具有清除自由基能力的天然产物，能够被广泛用于抗皮肤衰老的化妆品。罗布麻叶被广泛应用于茶饮、保健品和化妆品，而罗布麻花的开发较少。本发明针对罗布麻花水提取液和乙醇提取液的美白和抗氧化作用进行研究，旨在开发罗布麻花在化妆品领域的新用途。

技术实现要素：

本发明目的是提供一种罗布麻花水液取和醇提取液的美白和抗氧化功效及其在护肤产品中的新应用。

具体技术方案如下：

本发明提供一种罗布麻花提取液的制备方法，所述罗布麻花提取液包括罗布麻花水提取液和罗布麻花乙醇提取液，所述制备方法包括下列步骤：

a.新鲜或干燥罗布麻花除去杂质、清洗；

b.制备罗布麻花水提取液：将罗布麻花与水重量比为1:10-1:100(以干燥重量计)，浸泡时间为10-60min，提取温度90-110℃，提取时间为60-120min，过滤得滤液，浓缩至相当于原药材100mg/ml即得；

c.制备罗布麻花乙醇提取液：罗布麻花与乙醇比为1:10-1:50(以干燥重量计)，回流提取，提取温度50-70℃，提取时间为60-120min，过滤得滤液，浓缩至相当于原药材100mg/ml即得。

本发明另一方面还提供一种根据如上所述的制备方法制备的罗布麻花提取液，所述罗布麻花水提取液和所述罗布麻花乙醇提取液对b16细胞无细胞毒性。

本发明另一方面还提供一种根据如上所述的制备方法制备的罗布麻花提取液，所述罗布麻花水提取液和所述罗布麻花乙醇提取液具有抑制胞内黑色素的功效。

本发明另一方面还提供一种根据如上所述的制备方法制备的罗布麻花提取液的应用，所述罗布麻花水提取液具有抑制酪氨酸酶抑制和抗氧化的功效。

本发明另一方面还提供一种根据如上所述的制备方法制备的罗布麻花提取液的应用，所述罗布麻花提取液可作为美白和抗衰老成分，添加到化妆品中。

在本发明的应用中，所述罗布麻花提取液添加到膏霜类化妆品中时，添加量的质量百分比计为0.1～10％。

在本发明的应用中，所述罗布麻花提取液添加到洗涤类化妆品中时，添加量的质量百分比计为0.1～10％。

本发明提高的罗布麻花提取液的制备方法及其在美白护肤产品中的应用，具有以下有益效果：经过实验研究发现，本发明提高的罗布麻花提取液具有美白护肤功效；研究显示，罗布麻花的水提取液和乙醇提取液对b16细胞黑色素具有显著或极显著的抑制作用，且对b16细胞没有任何毒性作用；水提取液同时表现出清除氧自由基和抑制酪氨酸酶的能力；因此，罗布麻花具有美白、护肤和抗衰老功效，能够应用于化妆品行业。

附图说明

图1为实施例1的罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16细胞的毒性作用示意图；

图2为实施例2罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16细胞内黑色素的抑制率示意图；

图3为实施例3的罗布麻花水提取液的抗氧化强度示意图；

图4为实施例4的罗布麻花水提取液对酪氨酸酶的抑制率示意图；

图5为实施例5中含不同浓度罗布麻花提取液啫喱的侧面图；

图6为实施例5中含不同浓度罗布麻花提取液啫喱的俯视图。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。

实施例1：罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16细胞的毒性作用

将复苏培养3代以上的b16细胞进行消化，制备成单细胞悬液，以100μl3×103/孔加入到96孔板中，过夜贴壁后，去上清，分为空白对照和加药组。空白对照加入200μldmem培养基，加药组加入200μl以培养液稀释好不同浓度的罗布麻花水或乙醇提取液。培养48h后，去上清，加入100μl0.5mg/mlmtt染色，染色4h后，去上清，加入150μldmso，使用酶标仪于570nm处测定吸光度。

实验结果见表1，结果显示浓度为100-10000mg/l的罗布麻花水提取液或乙醇提取液对b16细胞没有毒性作用，用于美白护肤品无毒副作用(图1)。

表1罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16细胞的毒性作用(n＝6)

实施例2：罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16细胞内黑色素的抑制

将复苏培养3代以上的b16细胞进行消化，制备单细胞悬液，以4×104细胞/孔加入12孔板中，37℃、5％co2培养箱培养，过夜贴壁，去上清。分为空白对照、阳性对照和加药组，空白对照加入1mldmem培养基，阳性对照加入1ml以培养液稀释浓度为100mg/l的l-抗坏血酸，加药组分别加入1ml以培养液稀释好不同浓度的罗布麻花水或乙醇提取液。培养48h后，去上清，pbs缓冲盐洗涤2遍，胰酶消化，加入1.2mlpbs缓冲盐制备单细胞悬液，取200μl，进行蛋白含量测定。剩余以3000r/min离心5min，弃上清，加入250μl含10％dmso浓度为1mol/l的naoh溶液，80℃水浴裂解30min。取200μl在405nm处测定吸光度，根据下式计算。细胞内黑色素相对表达抑制率＝1-(a加药组405nm/蛋白含量)/(a空白组405nm/蛋白含量)。实验结果见表2和图3。

从表2可以看出，l-抗坏血酸在浓度为100mg/l时，对b16细胞的胞内黑色素有极显著的抑制作用(p<0.001)，抑制率为32.9％；罗布麻花的水和乙醇提取液在浓度为100-1000mg/l时，对b16细胞黑色素均具有显著抑制作用抑制作用(p<0.05)，且呈现出浓度依赖性。其中，罗布麻水提取液在浓度为300mg/l时，对黑色素的抑制率强于阳性对照。

表2罗布麻花水提取液和乙醇提取液对b16细胞胞内黑色素的抑制率(n＝3)

实施例3罗布麻花水提取液的抗氧化能力测试

以不同浓度的trolox(一种维生素e的替代物)的抗铁离子氧化能力来建立标准曲线如图3。

采用试剂盒(totalantioxidantcapacity(tac)colorimetricassaykit)购自biovision检测罗布麻花水提取液的抗氧化能力图4。

实验结果见表3。

从表3可以看出，浓度为250-1000mg/l的罗布麻花水提取液具有一定的清除氧自由基能力，清除能力与2.44-4.8nmoltrolox的强度相当，具有开发抗衰老护肤产品的潜力。

表3罗布麻花水提取液的抗氧化功效评价结果(n＝3)

实施例4罗布麻花水提取液对酪氨酸酶的抑制实验

将0.5mm左旋多巴置于50mm的磷酸钠(ph＝6.8)中，加入并调整酪氨酸酶浓度为0.2mg/ml，同时加入100μl浓度分别为250、500和1000mg/l的罗布麻花水提取，并调整总反应溶剂量为200μl。以5mm维生素c为阳性对照，于室温及避光的条件下放置20分钟，置于492nm波长下测定吸光度(a)：空白组步骤与处理组相同，没有加入任何抑制剂的酪氨酸酶活性为100％(29.75μm左旋多巴/分钟)(b)：阳性对照组步骤与罗布麻花组相同，以维生素c取代萃取液(a)。抑制率(％)＝a/b×100％。实验结果见表4和图5。

从表4可以看出，罗布麻花的水提液在浓度为250-1000mg/l时能够抑制酪氨酸酶活性，在浓度为250mg/l时的活性最强。

表4罗布麻花水提取液对酪氨酸酶的抑制率(n＝3)

实施例5罗布麻花啫喱的制备

工艺如下：

(1)将a相u30均匀撒入水面，待其基本润湿后(大部分透明，才开始搅拌)，再投入其他物料，边加热到85℃，边搅拌30min(300r/min)，均质后取出搅拌降温；

(2)预先用小烧杯配制好b相，当a相60℃左右时加入，搅拌均匀；

(3)45℃加入c相，搅拌均匀即可。

(4)测定ph，留样。

注意：①此体系中如果有其他活物加入，若离子性较大，则容易出现粘度降低，不能成啫喱；②配制样品前，所有物品都需要消毒(适用所有配方实验)。

表5罗布麻花啫喱的制备配方如下

根据以上工艺获得的啫喱体系稳定，啫喱的侧面图和俯视图见图6。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。