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多花黄精组织培养育苗技术规程.pdf

来源:花匠小妙招 时间:2025-02-03 16:31

DB 43/T XXXXX—2022 多花黄精组织培养育苗技术规程 1 范围 本文件规定了多花黄精组织培养育苗过程中组培室消毒处理、外植体采集、外植体处理、培养基 制备、组织培养、炼苗与移栽、出苗、包装运输、档案管理等技术要求。 本文件适用于湖南省多花黄精组织培养育苗。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本 (包括所有的修改单)适 用于本文件。 GB 4285 农药安全使用标准 GB/T 8321 农药合理使用准则 (所有部分) LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 多花黄精 Polygonatum cyrtonema Hua 百合科黄精属的多年生草本植物,中药材黄精基源植物。根状茎肥厚,少有近圆柱形,茎高可达 100 cm,叶互生,椭圆形、卵状披针形至矩圆状披针形,伞形花序,花被黄绿色,浆果黑色,5月-6月 开花,8月-10月结果。 4 组培室消毒处理 组培室用 84 消毒液稀释至 1000 倍或 75%乙醇喷洒洗涤组培室地面,保持室内清洁。超净工作 台用紫外灯照射 30 min,随后关闭紫外灯通风 20 min 以上,用湿拖把轻轻打扫超净工作台四周,降 低尘埃,接着用 75%乙醇擦拭台面操作区域。 5 外植体采集 5.1 取种子萌发形成的幼芽,用解剖刀从芽的萌发的基部切下; 5.2 取无病害,无腐烂,根系发达的多花黄精根状茎健壮芽头,在芽点以下2 cm-3 cm处,用解剖刀 切下。 6 外植体处理 1 DB 43/T XXXXX—2022 6.1 清洗 放入器皿中用洗衣粉等清洁剂冲洗20 min。 6.2 灭菌 清洗好的外植体转入超净工作台进行操作,将芽块放入灭菌后的烧杯内,用75%酒精清洗30 s,无 菌水冲洗3-5次,0.1%HgCl溶液浸泡10min-15min,最后用无菌水冲洗5次-6次。 7 培养基制备 7.1 培养基配方 诱导培养基、增殖培养基、生根培养基的配方见附录A。 7.2 培养基配置、灭菌与保存 参照LY/T 1882执行。 8 组织培养 8.1 培养条件 培养温度 25℃±2℃培养室中,光照时间 12 h/d,光照强度1500 lx-2000 lx。 8.2 诱导培养 黄精芽块灭菌后在接种盘中切掉芽块下部,只留取0.5 cm-1 cm大小的芽点,迅速接种到诱导培养 基中,培养30 d-50 d,分化产生5 个左右丛生芽时,转入增殖培养基中进行培养。 8.3 增殖培养 切取其丛生芽转入增殖培养基中进行增殖培养,反复接种继代培养4-5次后,转入生根培养基中进 行生根培养。增殖培养的周期以30 d-45 d为宜,增殖率为4-7,可继代4-5次。 8.4 生根培养 将诱导形成的大小相近的继代苗,在超净工作台上切割为单株,接种到生根培养基中培养,培养 25 d-30 d根系铺满培养瓶底部即进行炼苗移栽。 8.5 炼苗 8.5.1 炼苗标准 当组培苗拥有1个以上的健壮芽点,生长4条-5条根以上时,可进行炼苗处理。 8.5.2 驯化 将装组培苗的培养瓶从培养架上取下,转移到日光温室中,自然散射光下炼苗,温度控制在 20℃-25℃,封口炼苗3 d-5 d,开瓶炼苗1 d-2 d后即可移栽。 9 移栽 9.1 容器 2 DB 43/T XXXXX—2022 选用穴盘或底部有空的育苗盘。 9.2 基质 按照体积比珍珠岩:蛭石:泥炭土 1:2:3。

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