岷江百合响应尖孢镰刀菌的基因表达谱分析

百合是是世界主要的鲜切花之一,有球根花卉之王的美誉。然而,百合作为一种名贵花卉,属于易感病的花卉品种。随着百合种植面积的不断扩大,百合病害已成为限制百合产业发展的主要因素。由致病真菌镰刀菌(Fusarium)引起的百合鳞茎腐烂病(又称为基腐病)是百合生产中危害最严重的病害,给百合鲜切花生产以及种球繁育带来了极大的经济损失。原产于我国川西岷江流域的岷江百合(Lilium regale)对尖孢镰刀菌有极强的抗性,但是对岷江百合抗病分子机理的研究却鲜见报道。本论文利用抑制差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)和基因芯片技术对岷江百合响应尖孢镰刀菌的分子机理进行了初步研究,并对其中的一个抗病相关转录因子进行了克隆和表达特性分析,研究内容和结果分为以下几个方面：1.以岷江百合接种尖孢镰刀菌后6h、12h、24h、36h、72h的根组织为Tester,以无菌水接种处理得到的根组织为Driver,利用SSH技术成功构建了岷江百合根组织受尖孢镰刀菌侵染过程的SSH cDNA文库。文库包含了3168个随机挑选的克隆。插入片段分析结果显示,大部分克隆的插入片段大小分布在200-800bp,平均长度在400bp左右。挑选其中的1706个单克隆送交测序,测序完成后得到有效序列1101条,序列经过比对和拼接处理后得到了585条高质量的单一序列,包括了194条contigs和391条singlets。所有单一序列经过BLAST x分析,结果有243条序列能检索到功能匹配序列,而其余342条序列没有同源匹配序列或匹配序列功能未知。依据拟南芥中功能分类标准,将243条有功能匹配的序列分为了病害和防卫反应相关、代谢相关、运输相关、次生代谢相关、蛋白合成相关等14大类,其中最大的一类为病害和防卫反应(30%),其次是代谢(13%)、蛋白... （共96页)

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