阿利新蓝染色步骤及结果展示
发布于 2019-01-28 · 浏览 1.1 万 · IP 湖北湖北
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一、染色原理
阿利新蓝是一类铜酞花青染料,易溶于水,由于分子内含铜,所以呈蓝色。阿利新蓝为氟盐,带阳电荷,是一个碱性染料,与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根的酸性粘液物质形成不溶性复合物。即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合而呈蓝色,其结合又与pH有关。常采用pH2.5和pH1.0的阿利新蓝液。pH2.5时,含羧基和弱硫酸根的粘液物质染蓝色,强硫酸化黏液物质不着染或淡染;相反,pH1.0时,羧基不能离子化,无法与染料结合而不着染,而硫酸化黏液物质则可与染料结合而呈蓝色;软骨组织中含有硫酸软骨素,同样对阿利新蓝的碱性基团有很强的结合能力。
二、染色应用
用以区分羧基黏液还是硫酸化黏液物质,常用于黏液性上皮肿瘤的鉴别和证明肿瘤是否含有粘液物质;在骨组织中能有够清晰的标记出软骨。
三、染色步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、阿利新蓝染色:切片入阿利新蓝染液中染色10-15min,自来水洗。
3、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
4、显微镜镜检,图像采集分析。
四、染色结果
软骨、酸性粘液物质呈蓝色。
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最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1.1 万
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