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京郊保护地蔬菜根结线虫鉴定及种群动态调查

来源：花匠小妙招时间：2025-01-05 14:51

京郊保护地蔬菜根结线虫鉴定及种群动态调查

【摘要】： 根结线虫种类鉴定是进行其他方面研究的基础，了解根结线虫数量动态变化能够为农民科学的防治根结线虫病害提供合理的指导。本文针对京郊保护地蔬菜根结线虫种类分布，荧光定量PCR定量检测方法、通州区潞城镇温室一个生长季的黄瓜根际线虫种群结构动态等进行了研究，主要取得如下结果：京郊保护地蔬菜根结线虫以南方根结线虫（M.incognita）为主。结合形态学手段（雌虫会阴花纹）与分子生物学方法（ITS and SCAR）确定京郊保护地蔬菜根结线虫的分类地位。经鉴定，所采集的不同郊县根结线虫样本均为南方根结线虫（M.incognita）。基于Randig (Randig,2002)报道的SCAR-Maker设计特异性引物建立了针对南方根结线虫的实时荧光定量PCR检测方法，以实现对南方根结线虫更灵敏的检测并对其定量。试验结果表明该体系的检测限达0.32fg，约为96个拷贝数。对已知南方根结线虫数量的样品定量试验研究了线虫数量与循环数（Ct）之间的相关关系，结果表明二者之间存在显著的正向相关（R~2＞0.9）。同时对混合线虫悬浮液（含有根结线虫二龄幼虫）及含有二龄幼虫或卵的土壤样品进行定量检测，线虫数量与循环值之间的相关系数分别为R~2>0.8、R~2>0.7，也表现出很好的相关关系，表明该荧光定量PCR检测方法能对南方根结线虫样品准确定量分析。对通州潞城镇温室线虫种类调查发现主要有根结线虫属、小杆线虫属、短体线虫属、螺旋线虫属、剑线虫属，主要营养类群为植物寄生类和食细菌类。其中食细菌线虫主要是小杆属线虫，而其余几种常见的线虫均为植物寄生类线虫。对不同类群数量的时间动态分析结果表明：线虫总体种群数量从黄瓜定植以来呈逐渐上升趋势，至采摘初期（4月11）达到高峰，然后逐渐减少；食细菌类线虫占土壤总线虫的主要部分，其变化趋势与总线虫群体类似；植物寄生线虫变化趋势较平缓，数量保持在4500条/100g干土以下；根结线虫占植物寄生线虫的比例随时间变化波动较大（5%-60%），在黄瓜开花盛期（3月20）和结果盛期（5月17）时根结线虫为植物寄生线虫中的优势类群，所占比例分别达到42.91%和58.58%。对根结线虫在土壤中的垂直分布调查发现根结线虫集中分布在表层0–10cm的土层中，黄瓜生长后期根结线虫有向土壤深层移动的趋势。0-5cm和5-10cm这两个土层的根结线虫数量的动态分析结果表明，根结线虫在黄瓜生长期有两次高峰，分别是开花盛期（3月20）和结果盛期（5月17）。对同一层不同时期根结线虫数量进行方差分析的结果表明：0–5cm土层中的根结线虫在两次高峰时的数量没有显著差异但显著高于其他生长期（P≤0.05）；5–10cm土层的根结线虫数量随着时间的变化较为缓和，整体呈减少趋势，在结果盛期的数量约为开花盛期数量的一半。

【学位授予单位】：中国农业科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013