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SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4722—2016泰国根结线虫检疫鉴定方法Detection and identification of Meloidogyne thailandica2016-12-12发布2017-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T4722—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王旭、葛建军、熊玉芬、陈吴健、边勇。 SN/T 4722—2016泰国根结线虫检疫鉴定方法1范围本标准规定了泰国根结线虫Meloidogynethailandica的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物、植物产品、土壤和栽培介质中传带的泰国根结线虫的检疫和鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T24831一2009香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法SN/T2117一2008伪哥伦比亚根结线虫检疫鉴定方法SN/T2122一2008进出境植物及植物产品检疫抽样3泰国根结线虫基本信息学名:Meloidogyne thailandica Handoo,Skantar,Carta Erbe,2005分类地位：线虫门Nematoda、侧尾腺纲Secernentea、垫刃目Tylenchida、垫刃亚目Tylenchina、胞囊科Heteroderidae，根结线虫亚科Meloidogyninae，根结线虫属Meloidogyne。传播途径：携带泰国根结线虫的植物组织和被污染的土壤都是根结线虫传播的主要载体，其远距离传播主要借助于植物繁殖材料的调运。生姜是泰国根结线虫的主要寄主，目前仅在泰国有报道发生。根结线虫属有98个有效种，泰国根结线虫属于76个非中国种中危害较为严重的种类之一4方法原理泰国根结线虫成虫和幼虫的形态学特征，寄主范用和地理分布是种类鉴定的主要依据。5符号下列符号适用于本文件。L体长（μm，头端至尾端的中线距离，不包括尾尖突）；W最大体宽（μm)；a体长与最大体宽之比；b体长与体前端至食道与肠连接处的距离之比；c体长与尾长（尾长是指肛门或泄殖腔口至尾端的长度，不包括尾尖突）之比；St.口针长度（μm）；Sp.交合刺长度（μm）；h尾部透明区的长度（μm）；T尾长（μm）；1 SN/T4722—2016EP排泄孔至虫体前端的距离（μm）；一VA阴门至肛门的距离（μm）；VL阴门宽度（μm）；DGO背食道腺开口至口针基球的距离（μm）。6仪器设备、器具和试剂6.1仪器设备生物显微镜、体视显微镜（具透射光）、恒温烘箱、加热板、离心机、冰箱。6.2器具载玻片和凹玻片、盖玻片、网筛425um（40目）、250um（100目）、150μm（500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镊子、剪刀、手术刀、挑针、浅盘、线虫滤纸、酒精灯、钟面血或培养皿、干燥器、试管、玻璃纤维丝。6.3试剂4%甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、石蜡、7现场检查将其主要寄主植物作为现场检疫最重要的对象。注意观察植株的生长状况，根部是否有根瘤的症状；块茎类植物产品是否有腐烂或变色的症状；以及寄主植物及其产品是否带土壤或栽培介质。重点选择上述可疑植物材料及土壤或栽培介质取样。如无可疑症状则按要求随机取样。具体抽样方法详见：SN/T2122—2008中5.58实验室检验8.1线虫分离等植物组织样品采用直接剥离法分离线虫（具体分离方法见：有症状的植物根系及块茎SN/附录C)。无症状的植物组织及其携带的土壤等，可采用法贝尔曼漏斗法或浅盘法分离线虫（具体分离方法见：GB/T24831一2009中附录A）。8.2体视显微镜镜检在体视显微镜下观察分离获得的线虫样品。泰国根结线虫的雌虫为梨形至球形，需切会阴花纹进行鉴定；雄虫和幼虫为长蠕虫形。挑取雄虫、2龄幼虫以及雌虫会阴花纹切片若干，制成临时玻片或永久玻片在生物显微镜下观察、测计。会阴花纹切片的具体制作方法和玻片的制作方法见：SN/T2117一2008中附录C。8.3生物显微镜镜检和测计在生物显微镜下对照泰国根结线虫雌虫、雄虫、幼虫的主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测量和计算。在线虫样品数量充足时，应观察雌虫、雄虫、2龄幼虫各20条以上。2 SN/T4722—20169形态鉴定特征9.1根结线虫属形态鉴定特征9.1.1雌虫梨形至球形，具突出的颈，无线形成虫前期，无胞囊期；头架弱，口针细、长度一般小

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