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一种兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂及其应用的制作方法

来源：花匠小妙招时间：2025-01-05 14:11

1.本发明涉及肥料技术领域，尤其涉及一种兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂及其应用。

背景技术：

2.随着有机农业的兴起，绿色防控手段在农业中的使用越来越多，其中，采用微生物进行病害防控是较为常用且效果较好的技术手段。但是当前在农业病害防控中，一种生物防控产品一般都只对一种病害发生作用，在田间使用时若无法准确辨识病害种类，经常出现无法准确防治病害的情况，尤其是对于发病症状相似的病害，若当前还没有田间快速检测技术，经常造成药剂选择错误，延误防控时机的情况。
3.基于当前的田间辨识检测手段，十字花科根肿病和根结线虫病无法在田间进行快速辨识与检测。十字花科蔬菜根部发生根结线虫病害后，地上部分表现的病状与根肿病极其相似，均表现为使植株生长缓慢，因此当十字花科蔬菜产生根瘤时，只能通过解剖根部的肿瘤或根结进行区别，以肿瘤内是否有乳白色洋梨状的根结线虫的成虫进行判断，这是目前最准确的判断依据，但需要一定的仪器设备和检验时间，当前无法实现田间快速检测。
4.由于两种病害病原及发病条件不同，当前农业生产中对两种病害的防治手段差异很大，正确诊断根肿病和根结线虫病对其防治非常重要。经市场调查，当前针对两种病害未见较好的生物防控产品，在实际生产中主要采用化学防治。根肿病主要使用15％恶霉灵水剂500倍液或70％甲基托布津可湿性粉剂600倍液浇根处理，每7天1次，连灌2～3次；根结线虫病发病初期可选用1.8％阿维菌素乳油2000倍液、50％辛硫磷乳油1800倍液、90％敌百虫结晶800倍液或80％敌敌畏乳油1000倍液灌根，每株灌药液0.2～0.3kg，在蔬菜生长季节，也可用1％海正灭虫灵乳油80倍液土表喷雾防治。基于以上防控手段可知，病害的快速准确识别非常重要，若无法正确识别病害，就无法准确选择药剂。
5.同时在实际生产中，根结线虫病的发生会降低植物抵抗力，常导致根肿病的同时发生，当二者同时发生时往往更加难以防治。因为两种病害的防控药剂完全不同，如果只针对单一病害进行防控，完全无法改善患病症状。两种病害一旦共同发生，就意味着当季蔬菜灭产，给农户带来巨大损失。因此，如何进行两种病害的综合防控，这在当前农业生产中是亟待解决的技术难题。
6.针对二者田间病状的相似性，防控手段的差异性，在十字花科蔬菜上同时发生的可能性，当前亟需一种可以对两种病害进行统防统治的产品，同时规避两种病害在田间难以快速区分的技术难点，以对两种病害进行有效防控。

技术实现要素：

7.本发明的目的是提出一种兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂及其应用，解决了现有技术中根结线虫病和根肿病的田间病状相似难以快速区别并准确选择药剂以及根结线虫病和根肿病易同时发生且难以及时防控的技术问题。本发明优选技术方案所能产生
的诸多技术效果详见下文阐述。
8.为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：
9.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂，包括如下菌株：甲基营养型芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和枯草芽孢杆菌，并且所述微生物菌剂是由甲基营养型芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和枯草芽孢杆菌的菌粉复配制得的复合菌剂。
10.本发明的甲基营养型芽孢杆菌(bacillus methylotrophicus)，其编号为wswfj-29，保藏登记号为cgmcc no.18269，保藏日期2019年07月22日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。甲基营养型芽孢杆菌wswfj-29形态特征：黑暗条件下，在lb培养基上培养3d后呈乳白色圆形菌落，表面及边缘粗糙，有皱褶，菌落半透明，较为浓稠。
11.本发明的淡紫拟青霉菌(paecilomyces lilacinus)，其编号为wswfj-28，保藏登记号为cgmcc no.18274，保藏日期2019年07月22日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。淡紫拟青霉菌wswfj-28形态特征：黑暗条件下，在pda平板培养3d后长出白色圆形菌落，产孢后逐渐变成浅粉红色，培养7d后，菌落呈紫红色、圆形、隆起、粉状，表面没有分泌物，产孢量越多，菌落颜色越深。
12.本发明的枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)，其编号为wswfj44，保藏登记号为cgmcc no.20144，保藏日期2020年06月28日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。枯草芽孢杆菌wswfj44形态特征：黑暗条件下，在lb培养基上培养3d后呈微黄色菌落，菌落形状不规则，菌落表面粗糙有皱褶，菌落不透明，较为浓稠。
13.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌采用有效活菌数不小于1
×
10
11
cfu/g的芽孢杆菌微生物菌粉；淡紫拟青霉菌采用孢子量达到1
×
10
10
cfu/g的淡紫拟青霉孢子粉。
14.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉按如下重量份数复配：甲基营养型芽孢杆菌菌粉3～8份，淡紫拟青霉孢子粉1份，枯草芽孢杆菌菌粉2～5份。
15.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉按如下重量份数复配：甲基营养型芽孢杆菌菌粉3份，淡紫拟青霉孢子粉1份，枯草芽孢杆菌菌粉5份。
16.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉按如下重量份数复配：甲基营养型芽孢杆菌菌粉8份，淡紫拟青霉孢子粉1份，枯草芽孢杆菌菌粉2份。
17.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉按如下重量份数复配：甲基营养型芽孢杆菌菌粉5份，淡紫拟青霉孢子粉1份，枯草芽孢杆菌菌粉4份。
18.本发明中任一项技术方案所述的兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂在十字花科植物种植中的应用。
19.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉分别包装保存，在使用时进行混配。
20.根据一个优选实施方式，甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉混配后，在48h内进行使用。
21.根据一个优选实施方式，所述微生物菌剂通过蘸根、灌根、浇施、穴施中的一种或多种方法向作物施用；或者所述微生物菌剂与基质和肥料配伍制成功能育苗基质和生物肥料进行使用。
22.本发明提供的兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂及其应用至少具有如下有益技术效果：
23.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂，包括如下菌株：甲基营养型芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和枯草芽孢杆菌，并且所述微生物菌剂是由甲基营养型芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和枯草芽孢杆菌的菌粉复配制得的复合菌剂，微生物菌剂使用进入土壤或基质后，在适宜的条件下，具有防控根肿病功能的甲基营养型芽孢杆菌和具有活化土壤、抑制土传病害功能的枯草芽孢杆菌在1～2天内芽孢迅速萌发繁殖，在土壤中形成芽孢杆菌菌种定殖，并通过作物根系进入作物内部，成为作物内生菌，甲基营养型芽孢杆菌在土壤中和作物内部可对芸薹根肿菌进行抑制杀灭，枯草芽孢杆菌可活化土壤中的养分，刺激作物根系的生长，以提高作物对土壤中水肥的吸收利用，促使作物抗性提升；而具有防治根结线虫病功能的淡紫拟青霉菌在3～5天内孢子可以繁殖成为营养菌丝体，寄生在根结线虫的虫卵中，有效杀灭线虫，同时该菌能产生丰富的衍生物，其中一种类似吲哚乙酸的产物，它最显著的生理功效是低浓度时促进植物根系与植株的生长，因此在植物根系施用菌种不仅能明显抑制线虫侵染，而且能促进植株营养器官的生长，同时对种子的萌发与生长也有促进作用。
24.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂，将三种菌种进行复配使用，可在使用前期就实现根肿病的有效防控、土壤养分的活化和作物根系的促生，随后对根结线虫也能达到有效抑制，同时进一步促使作物根系的生长发育，在有效防控病害后增强作物的营养吸收，进一步减少作物因病害导致的产量损失。本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂，针对这两种病害发生的特点和难以区分的早期特性，进行两种病害的统防统控，彻底解决了采用化学药剂无法进行两种病害统防统控的技术难题。采用本菌剂进行防控，无论是根肿病和根结线虫病单一发病，还是二者同时发病，都可以进行有效防控，同时避免了田间生产中难以快速检测区分两种病害的难题，既保障了农业生产中的快速防控、早期防控的要求，又避免了农药滥用造成的污染和残留，是一种经济实惠、快速有效、绿色健康的新型防控模式。
25.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂，是一种较为新颖的菌种之间功效促进协同的生物防控技术，对于未来功能菌剂的协同使用提供了技术思路，指出了技术方向，具有较强的技术创新性和较好的应用推广价值。
26.此外，本发明优选技术方案还可以产生如下技术效果：
27.本发明优选技术方案将甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉和枯草芽孢杆菌菌粉分别包装保存，在使用时进行混配，并且混配后在48h内进行使用，可避免三种菌粉因混合时间过长，使得菌种之间相互影响，导致有效活菌数减少，影响防治效果的问题。
具体实施方式
28.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行
29(保藏登记号为cgmcc no.18269)、淡紫拟青霉菌wswfj-28(保藏登记号为cgmcc no.18274)、枯草芽孢杆菌wswfj44(保藏登记号为cgmcc no.20144)三种菌种的菌粉复配而成。甲基营养型芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌采用有效活菌数不小于1
×
10
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cfu/g的芽孢杆菌微生物菌粉，淡紫拟青霉菌采用孢子量达到1
×
10
10
cfu/g的淡紫拟青霉孢子粉。将甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉、枯草芽孢杆菌菌粉按照重量份数分别为8份：1份：2份进行物理混配，混匀后即为兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂。
43.进一步的：三种菌粉分别包装，在使用时进行混配，混配后在48h内进行使用，避免因混合时间过长，菌种之间相互影响，导致有效活菌数减少。
44.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂可与基质进行配伍制成功能育苗基质进行使用，在育苗阶段进行病害的防控，可以有效减少作物移栽后病害的爆发。具体使用方法如下：
45.将微生物菌剂与育苗基质按照重量比为1～5∶1000的比例进行混配，混合均匀后用于作物的育苗，按照常规育苗方式进行育苗即可。使用本方法得到的作物小苗，在移栽时根系基质土和植株内已具有抗病菌种，移栽后可对根结线虫病和根肿病形成有效防控。移栽后可使用微生物菌剂再进行1～2次灌根或者浇施，能够提高防控效果10％以上。
46.实施例3
47.本实施例提供了一种兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂及其与有机肥料进行配伍制成功能生物有机肥的使用方法。
48.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂采用甲基营养型芽孢杆菌wswfj-29(保藏登记号为cgmcc no.18269)、淡紫拟青霉菌wswfj-28(保藏登记号为cgmcc no.18274)、枯草芽孢杆菌wswfj44(保藏登记号为cgmcc no.20144)三种菌种的菌粉复配而成。甲基营养型芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌采用有效活菌数不小于1
×
10
11
cfu/g的芽孢杆菌微生物菌粉，淡紫拟青霉菌采用孢子量达到1
×
10
10
cfu/g的淡紫拟青霉孢子粉。将甲基营养型芽孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉孢子粉、枯草芽孢杆菌菌粉按照重量份数分别为5份：1份：4份进行物理混配，混匀后即为兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂。
49.进一步的：三种菌粉分别包装，在使用时进行混配，混配后在48h内进行使用，避免因混合时间过长，菌种之间相互影响，导致有效活菌数减少。
50.本发明兼防根结线虫病和根肿病的微生物菌剂可与有机肥料进行配伍制成功能生物有机肥进行使用，在施用基肥时进入土壤，在作物移栽阶段进行病害的防控，可以有效减少作物移栽后病害的爆发。具体使用方法如下：
51.将微生物菌剂与有机肥料按照重量比为4～7∶1000的比例进行混配，混合均匀后作为基肥，在作物移栽时进行使用。具体方法为：
52.根据作物需肥特性，在作物移栽时使用本实施例中的生物有机肥作为基肥进行使用，施用量为50～200kg/亩，可采用穴施，条施，沟施等常规基肥施用方法，施用后及时移栽浇水，促使生物有机肥中的芽孢和孢子在潮湿的环境中快速萌发，形成生物防控，其他措施按照常规农事操作即可。按照本方法进行作物种植，在移栽时根系周围土壤中就可以形成抗病菌种的定殖，移栽后可对根结线虫病和根肿病形成有效防控。移栽后可使用微生物菌剂再进行1～2次灌根或者浇施，能提高防控效果10％以上。若移栽的作物幼苗为实施例2中的育苗基质培育而成的，可对作物形成全程病害防控，能提高防控效果50％以上。
53.以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。