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菊花茎段快繁技术生物技术及应用

来源：花匠小妙招时间：2025-01-04 07:44

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菊花茎段快繁技术生物技术及应用
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
江苏农林职业技术学院
毕业设计(论文)
SNL/QR-3
菊花茎段快繁技术
专业生物技术及应用
同学姓名朱杰
班级06生物技术及应用(2)班
学号061401205
指导老师宋刚
完成日期2009-6-4
成果评议
学号 061401205 姓名朱杰
题目菊花茎段快繁技术
指导老师建议成果:
评阅老师建议成果:
答辩小组建议成果:
院答辩委员会评阅意见及评定成果:
答辩委员会主任签字(盖章):
年月日
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
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菊花茎段快繁技术生物技术及应用
毕业设计(论文)任务书
姓名
朱杰
学号
061401205
班级
06生物技术及应用(2)班
题目
菊花茎段快繁技术
设计(论文)主要内容

初代培育:如何选择适当的培育基、如何添加适当比例的激素、及如何选择合适的外植体(茎段)、外植体生长状况(丛生芽);
继代/生根培育:如何选择适当的培育基、如何添加适当比例的激素、丛生芽生长状况(生根成苗)等;
,是否染菌、死亡、褐变等并如何处理及分析。
重点争辩问题
;
,初代、继代培育数据统计及其结果分析;
、褐变等处理分析
主要技术指标
植体处理达标、培育基灭菌彻底、确保无菌接种操作、合理的培育环境
其它要说明的问题

指导老师意见
指导老师签字:
年月日
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指导老师意见
对论文的简短评价:
优良中及格不及格
指导老师签字
年月日
评阅老师意见
对论文的简短评价:
优良中及格不及格
评阅老师签字
年月日
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答辩小组评议意见
学号姓名
题目
答辩小组意见:
1、对论文的评价
优良中及格不及格
答辩小组长签字
年月日
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菊花茎段快繁技术
摘要:以菊花茎段作为外植体,在初代丛生芽诱导培育基、继代培育基、生根培育基上先后诱导产生愈伤组织、丛生芽、根,最终完成植株再生。同时并对每个环节存在问题进行争辩分析、整理,从而总结出适合菊花茎段快繁的最佳方法。
关键词:菊花;外植体;快速繁殖;
Abstract:Asachrysanthemumstemexplants,theearlygenerationofproblemsinthebudinductionmedium,subculturemedium,therootingmediumhasinducedcallus,multipleshootclumps,roots,,sorting,andtosummarizefortherapidpropagationofchrysanthemumstemthebestway.
Keywords:Chrysanthemum;Explant;RapidPropagation
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
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菊花茎段快繁技术生物技术及应用
目录
……………………………………………………………………………9
………………………………………………………………………9
材料………………………………………………………………………………9
预培育……………………………………………………………………………9
………………………………………………………………9
培育基的制作与装瓶灭菌………………………………………………………9
接种室、器械及超净工作台灭菌………………………………………………9
外植体的选择与灭菌……………………………………………………………10
接种………………………………………………………………………………10
初代(丛生芽诱导)培育………………………………………………………10
继代培育…………………………………………………………………………10
生根培育…………………………………………………………………………10
试管苗的移栽……………………………………………………………………10
……………………………………………………………………………11
、继代培育结果处理…………………………………………………………11
……………………………………………………………………………11
继代培育扩大增殖方法…………………………………………………………11
细菌、真菌污染及防治…………………………………………………………11
褐变及其防治……………………………………………………………………12
玻璃化及其防治…………………………………………………………………12
…………………………………………………………………………………12
……………………………………………………………………………………13
参考文献………………………………………………………………………………13
致谢………………………………………………………………………………………13
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
菊花(ChrysanthemummorifoliumRamat.)是菊科菊属的多年生宿根草本植物。株高20-200cm,通常30-90㎝。茎色嫩绿或褐色,除悬崖菊外多为直立分枝,基部半木质化。单叶互生,卵圆至长圆形,边缘有缺刻及锯齿。头状花序顶生或腋生,一朵或数朵簇生。舌状花为雌花,筒状花为两性花。舌状花分为下、匙管、畸四类,颜色丰富,有红、黄、白、墨、紫、绿、橙、粉、棕、雪青、淡绿等。筒状花进展成为具各种颜色的"托桂瓣",花色有红、黄、白、紫、绿、粉红、复色、间色等色系。花序大小和外形各有不同,有单瓣,有重瓣;有扁形,有球形;有长絮,有短絮,有平絮和卷絮;有空心和实心;有挺直的和下垂的,式样繁多,品种简单。在我国有着悠久的栽培历史[2]。
菊花主要靠扦插繁殖,也可进行嫁接繁殖。但扦插和嫁接繁殖均需较多的母株材料,且受季节和外界环境条件的限制,繁殖速度较慢,对于一些贵重菊花品种和母株来源不足的品种,更不能准时满足生产和市场的需要。争辩和利用组织培育方法来繁殖菊花,可以在短期内大量繁殖,使得工厂化育苗成为可能,且利于新品种选育、脱毒复壮、种质资源保存等。菊花利用植物组培技术,可以使用菊花的茎尖、茎段和侧芽作为主选外植体,在不同激素水平的培育基上诱导产生愈伤组织、丛生芽和根,完成植株再生。本文以在脱毒试验中成功移栽上盆且长势健壮的一般观赏菊花的带腋芽茎段为争辩材料,从菊花丛生芽诱导、继代、生根培育着手争辩,以期寻求低成本、高效、稳定的菊花茎段增殖方法,提高其商品化生产效率,满足菊花种苗商品化生产的要求[9]。

材料:供试材料为脱毒试验中成功移栽上盆且长势健壮的一般观赏菊花。
预培育:将供试盆栽菊花移至室内阳光充分处正常恒温培育5~7天。
培育基的制作与装瓶灭菌
均以MS培育基为基本培育基,附加不同生长激素等配置而成。依据实际要求,培育基制作[7]见下表:
表-1培育基制作配比
培育基
配比
蔗糖
琼脂
pH
丛生芽诱导
3%
%
继代培育
3%
%
生根培育
3%
%
将已配好的培育基,趁热分装在培育瓶中(每瓶35~50ml),用专用透性膜封好后放入高压灭菌锅中灭菌、待用。
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
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菊花茎段快繁技术生物技术及应用
接种室、器械及超净工作台灭菌[6]
接种室的地面、墙壁要擦洗洁净,接种前用甲醛或高锰酸钾稀溶液熏蒸,也可以接受紫外灯灭菌。所需器械先用70%酒精浸泡,待接种前在酒精灯下用火灼烧到变红,冷却待用。超净工作台启动前,先用70%酒精擦拭台面,再打开紫外灯照射20min,同时打开风机。接种前关闭紫外灯,打开日光灯。
外植体的选择与灭菌
选用菊花的带腋芽茎段作为外植体。选取生长健壮的嫩茎先用洗衣粉水冲洗2次,再用自来水冲洗2次,以洗去表面泥土杂质为标准。然后移至超净工作台上,用75%酒精处理20~30秒,再用无菌水冲洗3~5次,%升汞溶液浸泡8~10分钟,再用无菌水冲洗4~6次,用滤纸吸干水分,最终将材料放入无菌的锥形瓶中封口待用。
接种
在超净工作台内,点燃酒精灯,并在酒精灯旁边工作,留意手和衣袖与酒精灯保持适当的距离,以免烧伤。在酒精灯上将操作用具烧红,待温度降至常温时进行操作。~1厘米左右带有腋芽的小段。用镊子夹取切好的外殖体材料,按极性方向直立快速接种到锥形瓶的培育基中,深约2~3mm,留意培育瓶口始终在火焰下方,尽量使切口接触培育基。每个锥形瓶可接种3~4块外殖体。接种时锥形瓶应保持倾斜,接种后要快速将瓶口在酒精灯上转动灼烧一遍进行消毒,然后快速盖上专用透性膜封好。最终在瓶壁上上标签,注明接种材料的名称、编号和接种日期。
初代(丛生芽诱导)培育
接种完成后即转入培育室,即进行初代(丛生芽诱导)培育。培育温度22~28℃,光强1000~4000Lux。外植体接种到培育基上7天左右,茎段开头变粗,基部渐渐增大,并在其切口四周消灭少量嫩绿色、质地紧密的愈伤组织,同时茎尖也渐渐伸长,腋芽开头萌动开放。经过10~15天的培育后,腋芽伸长,并形成丛生芽,渐渐长成苗丛。
继代培育
当丛生芽长至1厘米长时,在超净工作台上将芽从中的小芽切割开,分别转入相同的新颖培育基上继代增值,每一个小芽又会以同样的繁殖系数产生芽从。培育温度22~25℃,光强2500~4000Lux。一般继代培育的次数越多,从接种到长出丛生芽所需的时间越短,但不短于7天,若不准时转接,芽苗会快速长高。如此反复,在短时间内就可以繁殖出大量的无根苗。
生根培育[3]
当丛生芽长成的小苗达2—3厘米时,在超净工作台上将其切下转入生根培育基中诱导生根。培育温度22~25℃,光强2500~4000Lux。大约7~10天左右的培育,小苗开头消灭大量小根,最终有1~6条根可长的较长,芽苗也快速长高。
试管苗的移栽
芽苗生根后已在生根培育基上长至5cm左右,可将瓶塞打开,让其由无菌环境转至有菌且湿度较低的环境之中约3~5天后,便可进行移栽,移栽初期留意遮光。大规模的室外移栽需要在苗床上进行,包括整地、移栽、管理等环节。
菊花茎段快繁技术生物技术及应用
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本文试验因时间限制,初步完成了菊花茎段从初代到继代的培育过程,并对生根培育进行了理论分析,同时对初代、继代培育的试验数据进行了完善的统计。
、继代培育结果处理:
表-2初代培育记录表:
次数
接种量
真菌污染
细菌污染
褐变
玻璃化
正常
成活率
1
60
12
7
6
2
33
55%
2
60
10
13
8
1
28
47%
3
60
9
10
2
0
39
65%
4
60
11
9
3
1
36
60%
统计:
240
42
39
19
4
136
57%
表-3继代培育记录表:
次数
接种量
真菌污染
细菌污染
褐变
玻璃化
正常
成活率
1
99
21
30
3
0
45
45%
2
84
15
27
0
0
42
50%
3
117
18
33
0
3
63
54%
4
108
24
33
3
0
48
44%
统计:
408
78
123
6
3
198
49%
成活率=正常/接种量×100%
:
初代、继代培育结果统计
表-4初代、继代培育数据统计
培育类型
7天生长状况
14天生长状况
21天生长状况
28天生长状况
初代培育
茎段变粗,切口消灭少量嫩绿色愈伤组织
腋芽开头萌动,部分已有丛生芽形成
丛生芽大量形成,部分已长成苗从
苗从长势良好,可以做继代培育
继代培育
基部形成愈伤组织,丛生芽渐渐增长、增厚
新的丛生芽渐渐增多,且速度加快
丛生芽形成新的苗从,部分可以连续继代培育
苗从基本长势良好,可继代培育或部分进行生根培育
从外植体培育到长出丛生芽需要相当长的时间。但这一工作是一劳永逸的,由于大量的扩大繁殖是在丛生芽产生以后。菊花的继代培育扩大增殖可以在两个时期进行。其一是在丛生芽生长以后
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