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多肉植物因其观赏性和耐旱易栽培的特点受到越来越多人的喜爱。研究人员以叶插繁殖能力强的多肉植物长寿花为实验材料，通过使用改良的“切

来源：花匠小妙招时间：2025-01-04 07:19

题型：非选择题-解答题难度：0.65 引用次数：49 题号：23886883

多肉植物因其观赏性和耐旱易栽培的特点受到越来越多人的喜爱。研究人员以叶插繁殖能力强的多肉植物长寿花为实验材料，通过使用改良的“切-浸-芽”（CDB）方法实现了多肉植物的遗传转化和基因编辑，为多肉植物的遗传改良开辟了新途径。下图甲、乙分别表示利用常规转化法和CDB法对长寿花进行基因改造的一般流程。

(1)无菌操作是图甲操作成功的关键，诱导愈伤组织的固体培养基分装后应采用

___

法灭菌。当①过程的培养基中细胞分裂素和生长素的比例大于1时，有利于诱导

___

（填“生根”或“生芽”）；该过程还需要提供光照，目的是

___

。
(2)为测试图乙CDB方法能否对长寿花实现遗传转化，研究人员用携带绿色荧光蛋白基因（EGFP）和除草剂抗性基因（bar）的农杆菌K599侵染外植体B，再将被侵染的外植体放入充满湿润土壤的培养箱中培养。紫外灯下，实现遗传转化的转基因芽表现为

___

；农杆菌侵染能将EGFP和bar等外源基因递送到外植体B细胞中的原理是

___

。为确定转化效率，研究人员以感染农杆菌的100个外植体培养获得的转基因长寿花B1为材料，采取下表多种方式进行鉴定，下表中①~③依次代表

___

；表中检测目标的检出比例从大到小依次是

___

。

方法检测对象检测目标检出比例PCR扩增基因组DNAbar基因a1分子杂交①bar基因转录产物a2②总蛋白质bar基因翻译产物a3③幼苗抗除草剂幼苗a4

(3)为了进一步确定CDB方法能否用于传递基因编辑工具，研究人员选择与叶绿素合成有关的叶绿烯去饱和酶基因（PDS）作为靶基因进行基因编辑实验，构建了用于敲除PDS的CRISPR/Cas9基因编辑载体。鉴定导入长寿花B1中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是

___

，依据是

___

。
(4)与图甲相比，图乙通过CDB方法对长寿花进行的遗传转化不需要经过

___

过程，因而具有操作简单、培养周期短的优点。

更新时间：2024/08/14 11:44:33 |

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（1）转化是指

______

。使用T—DNA介导转化的原因是

____________________

。
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______

（每个序列写出6个碱基即可）。除上述两种引物外还应加入依据

______

序列设计的一种引物，目的是

______________________________

。
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____________________

。

【推荐2】四尾栅藻是一种淡水藻类，繁殖快、适应性强，可作为制备生物柴油的重要原料之一。为提高四尾栅藻油脂含量，研究人员将从含油量高的紫苏中获得的二酰甘油酰基转移酶基因（DGAT1）与pBI121质粒构建表达载体，经转化成功获得高产油脂四尾栅藻，主要研究过程如下图，其中DGAT1-F（）和DGAT1-R（）是以DGAT1基因为依据设计的一对引物，lacZ基因编码产物在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。请回答下列问题。

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______

和

______

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______

和

______

。
(2)在保存DGAT1基因时，将克隆载体导入大肠杆菌的优点有

______

（多选）。
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(3)过程③经转化的大肠杆菌通过

______

（方法）接种到培养基上继续培养。为筛选获得目标菌株，培养基应加入的成分有

______

。
(4)为检测表达载体转化四尾栅藻的情况及确定目的基因是否表达，研究人员进行了如下实验，请完成下表。

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【推荐3】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题：