实验六 担子菌门真菌形态及其所致病害症状观察

实验六 担子菌门真菌形态及其所致病害症状观察

担子菌门真菌一般称作担子菌,是真菌中最高等的。其共同特征是有性生殖产生担子和担孢子。担子菌门的分纲依据是担子果的有无。担子果的发育类型可分为三个纲：冬子包菌纲、层菌纲、腹菌纲。与植物病害关系密切的是冬孢菌纲。根据担子的来源及特征,担孢子的数目及位置,冬孢菌纲分为锈菌目和黑粉菌目。锈菌的分类主要依据冬孢子的形态、排列和萌发的方式。而黑粉菌主要依据冬孢子的萌发方式、孢子的分隔、排列及其大小、形状及是否有不孕细胞等进行分类。

一、目的要求

通过实验了解担子菌门冬孢菌纲主要病原菌的形态特征,掌握锈菌目和黑粉菌目中与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致主要病害的症状特点。

二、仪器与用品

显微镜、幻灯机、技影仪、计算机及多媒体教学设备；灭菌培养皿、载玻片、盖玻片、浮载剂(蒸馏水或乳酚油)、吸水纸、解剖刀、挑针、镊子、纱布、蒸馆水滴瓶、刀片、擦镜纸、酒精灯、无菌水、PDA培养基等。

三、实验材料

1.锈菌目

(1)菜豆锈菌(Uromyces appendiculatus)。

(2)禾柄锈菌(Puccinia graminisf.sp. tritici)

(3)小麦叶锈菌(Puccinia recondita)。

(4)小麦条锈菌(Puccinia striiformis)。

(5)梨胶锈菌(Gymnosporagium haraeanum)。

(6)蔷薇多胞锈菌(Phragmidium rosae－multiflorae)

(7)亚麻锈菌(Melampsora lini)。

(8)花椒鞘锈菌(Coleosporium xanthoxyli)

(9)松枥锈菌(Cronartium quercum)

(10)枣层锈菌(Phakopsora ziziyphi－vulgaria)

2.黑粉菌目

(1)小麦散黑粉菌(Ustilago tritici)

(2)玉蜀黍黑粉菌(U.maydis)。

(3)丝孢堆黑粉菌(Sporisorium reilianum)。

(4)高粱坚孢堆黑粉菌(Sporisorium sorghi)。

(5)高粱散孢堆黑粉菌(Sporisorium crtentum)

(6)小麦网腥黑穗菌(Tilletia caries)。

(7)小麦光腥黑穗菌(Tilletia tritici)。

(8)稻尾孢黑粉菌(Neovossia horrida)

(9)稻叶黑粉菌(Entyloma oryzae)。

(10)小麦条黑粉菌(Urocystis tritici)。

以上病菌引起的病害标本或新鲜材料、挂图、病原菌永久玻片和病菌的PDA培养物；多媒体教学课件(包括幻灯片、录像带、光盘等影像资料)。

四、观察内容和方法

{一}冬孢子萌发试验

冬孢菌纲不同类型冬孢子萌发方法各不相同，几种常见的冬孢子的萌发方法如下：

1.小麦网腥黑穗菌和光腥黑穗菌 将冬孢子撒在保湿器内用1%硝酸钙液润湿的滤纸上,在17～22℃下培养,每天于日光灯下照射4h,3d后检查萌发情况。

2.小麦条锈病菌 取带冬孢子病叶在0.5%~1%柠檬酸中浸15min,再放于两层潮湿的滤纸之间,于－2～－5℃下冷冻5d后,挑取冬孢子置于水滴内,在冰箱内(4℃)保存48h即可萌发。

(二)锈菌目

1.单胞锈菌属(Uromyces) 观察菜豆锈病标本,挑取冬孢子制成玻片观察。冬孢子具柄,单细胞。

2.柄锈菌属(Puccinia) 观察小麦轩锈病、小麦叶锈病或小麦条锈病标本,冬孢子堆黑色。将有冬孢子堆的寄主叶片组织切下,制切片于显微镜下观察。冬孢子有一隔膜,分隔处稍缝缩,柄不胶化。

3.胶锈菌属(Gymnosporagium) 从用水浸泡过的胶锈菌冬孢子角上用挑针挑取冬孢子制片观察。冬孢子双胞,分隔处不缝缩或稍缝缩。柄丝状,很长,含胶质。

4.多胞锈属(Phragmidium) 挑取攻瑰锈病组织上的冬孢子,制片观察。冬孢子多细胞,通常下部膨大易胶化。

5.栅锈菌属(Melampsora) 取亚麻锈菌病组织制作徒手切片观察。冬孢子无柄,集成壳状或垫状,冬孢子仅侧面结合成一层,埋生于寄主表皮下。

6.鞘锈菌属(Coleosporium) 取花椒锈病组织制作切片观察。冬孢子堆生于叶背或排列成环状,圆形黄褐色。冬孢子无柄,集成壳状或垫状的孢子粒,集生于寄主表皮层下。

7.柱锈菌属(Cronartium) 取马尾松锈病标本制片观察。冬孢子堆生于叶背,毛状,冬孢子梭形。

8.层锈菌属(Phakopsora) 取枣锈病组织制作切片观察。冬孢子堆呈黑色,冬孢子排成2~4层,长椭圆形或多角形。

(三)黑粉菌目

1.黑粉菌属(Ustilago) 孢子堆外露,很少由寄主组织长期包裹。担子分隔,担孢子生在担子每一细胞的侧面。

挑取小麦散黑粉(穗)病组织上的冬孢子制成玻片观察。冬孢子球形或近球形。另取冬孢子萌发切片观察。冬孢子萌发产生4个细胞的担子,从担子的不同细胞分别生出丝状分枝,不产生担孢子。

挑取玉米瘤黑粉病组织上的冬孢子制片观察,冬孢子球形至卵形。另取冬孢子萌发切片观察。冬孢子萌发时产生有隔担子,担子顶端或分隔处侧生梭形的担孢子。

2.孢堆黑粉菌属(Spoisorium) 冬孢子堆周围有膜(不孕菌丝),中央有寄主组织,担子分隔,担孢子生在担子每一细胞的侧面。

挑取高粱丝黑穗病组织上的冬孢子制片观察。冬孢子卵圆形或球形,暗褐色,有时混生有不孕细胞。不孕细胞无色透明。

取高粱坚粒黑穗病标本观察。孢子堆生于子房中。冬孢子多圆形或近圆形,不孕细胞长圆形至近圆形。

取高粱散粒黑穗病标本观察。冬孢子堆有由菌丝体组成的灰白色被膜。冬孢子球形,分散。

3.腥黑粉菌属(Tilletia) 取小麦网腥黑穗病或小麦光腥黑穗病标本观察。冬孢子单生,孢子堆成熟时呈粉末状,冬孢子较小。孢子堆生于子房内,外包果皮,内部充满黑紫色粉状子包子,有腥味。

4.尾孢黑粉菌属(Neovossia) 取水稻粒黑穗病标本挑片观察。孢子堆寄生于子房内,产生黑粉。挑取黑粉制片,显微镜下可见,孢子球形,常有一部分未成熟的透明孢子。

5.叶黑粉菌属(Entyloma) 取水稻叶黑粉病标本,切片观察。孢子堆生于叶的两面,圆形至长条形。孢子多角形，结合紧密。取萌发的担孢予玻片观察,担孢子顶生于担子上,纺锤形。

6.条黑粉菌属(Urocystis) 取小麦秤黑粉病标本,制片观察。一至多个厚垣孢子集结成牢固的孢子球,孢子球外有淡色而小的不孕细胞包围。

五、实验作业

1.绘黑粉菌属、腥黑粉菌属和条黑粉菌属冬孢子形态图。

2.绘腥黑粉菌属冬孢子萌发图。

3.绘柄锈菌属、单胞锈菌属、栅锈菌属和胶锈菌属冬孢子形态图。

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