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在酸性PH值下具有经增强活性的抗真菌剂的制作方法

来源：花匠小妙招时间：2024-12-29 08:57

本发明涉及恩夫芬净(enfumafungin)衍生物类三萜抗真菌化合物治疗或预防在ph低于约7的酸性条件中或下发生的真菌感染的用途。更详细地说，本发明涉及作为(1,3)-β-d-葡聚糖合成的抑制剂的衍生物三萜化合物(或其药学上可接受的盐或水合物)在治疗或预防在具有低酸性ph的条件或解剖区域中发生的酵母菌或霉菌感染；此类感染包括其中ph通常约4至约4.5的阴道酵母菌感染、其中ph通常约5.5至约6.8的脓肿和上胃肠道的感染。展示在酸性ph下增强的抗真菌性能的抗真菌剂经预期提供在于低ph条件下发生的真菌感染(如外阴阴道念珠菌病(vvc)、脓肿和上胃肠道感染)的治疗方面的优势。

背景技术：

1、真菌感染是主要的健康问题且通常表现为侵袭性或全身性真菌疾病(例如念珠菌血症、侵袭性曲霉病)、局部真菌感染(例如肋膜蓄脓和局限于腹部、大脑、肺部等的脓肿)和粘膜皮肤感染(例如口部、食道和外阴阴道念珠菌病)。感染的类型和范围取决于真菌病原体的致病性因子、宿主的防御和所涉及的解剖区域。

2、严重的全身性或侵袭性真菌感染更常见于免疫功能不全患者(如，接受化疗以治疗恶性病或接受免疫调节剂以治疗慢性发炎病状或患有后天性抑或由于遗传病症导致的免疫不全的患者)中。不管当前可用的抗真菌疗法如何，全身性真菌感染伴随有高达50％的死亡率，其视病原体和患者的基础病状而定。

3、局部真菌感染通常通过酵母菌自其通常定殖至通常无菌的区域(例如在肠穿孔或手术后的腹腔脓肿)或自进入血液或淋巴系统而达到特定器官(例如肺、肝脾)和产生深部感染的真菌的传播。在外伤或手术后继发于肠胃漏的脓肿通常为涉及念珠菌和细菌的混合感染，且通常具有在脓肿内的低ph(例如脓肿内介于约5.5至约6.8的ph)。

4、粘膜皮肤真菌感染可发生在免疫功能不全以及非免疫功能不全的个人中。最常见的粘膜皮肤真菌感染为外阴阴道念珠菌感染，其主要由假丝酵母的物质引起且通常被称作外阴阴道念珠菌病(vvc)。vvc经估计会在其寿命期间感染70％至75％女性至少一次(索贝尔(sobel)j.,外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis),柳叶刀(lancet)369:1961-71(2007))，且虽然未危和生命，但可对受感染个人，尤其在罹患反复发作的那些个人的生活质量有实质影响。vvc的诊断和治疗以及生产力由于病状的损失经估计在美国花费约$10亿(福克斯曼(foxman)b,等人，念珠菌阴道炎：自报发病率和相关费用(candidavaginitis:self-reported incidence and associated costs),性传播疾病(sex transmdis)2000,27:230-35(2000))。虽然大部分女性仅呈现出vvc的偶发性发作，但一些女性具有更慢性表现和/或通常被称作复发性vvc(rvvc)的反复发作。若干局部和两种口服抗真菌剂(氟康唑(fluconazole)和伊曲康唑(itraconazole)经批准用于全局治疗vvc，但不存在用于rvvc的经批准疗法。在美国，氟康唑仅为经批准用于vvc和全局的口服药，其为最常用的用以治疗此病状的口服抗真菌剂。然而，在标签下报道的口服氟康唑的研究中，在大致一半vvc案列中达成关于征兆和症状的完全消退和阴性氢氧化钾检查和阴性培养物的研究中定义的治疗治愈。参见(氟康唑标签(2011年5月)。阴道环境的ph为酸性的(约4至约4.5的ph)且在念珠菌感染期间保持不变；此低ph环境被视为至少部分为利用vvc的当前抗真菌疗法的次佳治疗结果的原因(丹比(danby)cs,等人，ph对光滑念珠菌和白色念珠菌针对11种抗真菌剂的体外易感性的影响和对临床使用的启示(effect of phon in vitro susceptibility of candida glabrata and candida albicans to11antifungal agents and implications for clinical use),抗微生物剂化学疗法(antimicrob agents chemother)56:1403-6(2012))。

5、抗真菌剂的表现为最低抑制浓度(mic)的性能频繁受ph影响，所述最低抑制浓度(mic)经展示为抑制生物体在所测试分离株的50％(mic50)或90％(mic90)中的生长。考虑到归因于用于测定mic的方法的变化性，在任一方向上的为4倍或更小的mic差异的临床关联性可能难以确定，使得4倍差例如可能并非在临床上显著。另一方面，大于4倍的变化大体上被视为在临床上有意义且很可能是显著的。鉴于发生感染的环境的ph可能变化且可对既定治疗感染的抗真菌剂的临床功效有影响，ph对抗真菌性能的影响已经研究和报道。尽管关于低ph下的抗真菌活性的大部分研究已着重于引起vvc的分离株，相同念珠菌属导致其它感染，其中ph经预期为酸性的(例如腹部脓肿、反流性食道念珠菌病、肋膜蓄脓等)；因此，来自这些报道的表明抗真菌剂在低ph下的减少性能的研究结果经预期为适用于较宽数组的临床病状，其中低ph为常见因素。

6、丹比等人(2012)进行极其全面研究，其评估ph对11种抗真菌剂对引起vvc的最常见念珠菌属的抗真菌性能的影响。来自所述研究的结果指示：对于大部分抗真菌剂，存在mic的增加(例如大于4倍)，其指示当与中性ph条件(例如ph为7))时，抗真菌性能在酸性条件(例如ph为4)下的降低。一般来说，属于唑化学类别的所有抗真菌剂且特别是氟康唑(在世界大部分地区中用于vvc的唯一可用口服唑试剂)明显受此现象影响，其指示将在感染在中性ph条件(例如ph约7)下发生时被视为易受影响的许多念珠菌菌株在ph环境为酸性(例如ph约4至4.5)(如在vvc中)时有抗性。丹比c等人(2012)得出以下结论：在酸性ph下的抗真菌性能的降低为解释一些抗真菌剂在vvc中的功效缺乏的重要因素，其中ph通常为约4至4.5。尽管在丹比等人(2012)的此实验中测试的一些抗真菌剂表现出受ph降低的影响较小，但没有一个展示出抗真菌性能在酸性条件下的显著增加(例如，mic的降低>3/4)。

7、表a.在不同ph条件下对于阴道念珠菌分离株的抗真菌易感性(改编自丹比等人(2012))

8、

9、ph对抗真菌性能的影响和其对于vvc的治疗的潜在暗示也由博伊科夫(boikov)等人报道：在ph 7和4下的新颖棘白菌素cd101对来自患有外阴阴道念珠菌病的患者的念珠菌分离株的体外活性，抗微生物化学疗法杂志(j antimicrob chemother)72:1355-1358(2017)。在博伊科夫等人研究中，在ph 7和ph 4下评估经审批用于vvc的唑(氟康唑和伊曲康唑)以及三种批准的棘白菌素(卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净)和处于开发中的一种棘白菌素(cd101)康通常与vvc相关的念珠菌属的抗真菌活性。唑和棘白菌素(唯一可用的葡聚糖合成抑制剂)的性能受低ph不利影响，确定来自更早研究的结果：此现象对于一种抗真菌类别(唑)并不独特，但一些药物类别相比其它药物类别似乎更受影响。此外，与先前报道的结果一致，不存在抗真菌性能在酸性条件下的显著增加(例如mic的降低>3/4)的实例。因此，来自所属领域的一般期望在于抗真菌剂的性能在至少一定程度上不利地受低ph条件影响。

10、恩夫芬净为在与欧刺柏的活叶相关的黑酵母菌属(hormonema spp.)的酦酵中产生的半缩醛三萜醣苷(美国专利第5,756,472号；佩莱斯(pelaez)等人,系统与应用微生物学(systematic and applied microbiology),23:333-343,2000；施瓦兹(schwartz)等人,美国化学学会期刊(jacs),122:4882-4886,2000；施瓦兹,r.e.,治疗专利专家意见(expertopinion on therapeutic patents),11(11):1761-1772,2001)。恩夫芬净为具有体外抗真菌活性的若干三萜醣苷中的一种。恩夫芬净和其它抗真菌类三萜糖苷的抗真菌作用模式经测定为通过其对(1,3)-β-d-葡聚糖合成酶的特异性作用抑制真菌细胞壁葡聚糖合成(大西(onishi)等人，抗微生物剂和化学疗法(antimicrobial agents and chemotherapy),44:368-377(2000)；佩莱斯等人，(2000))。1,3-β-d-葡聚糖合成酶仍为抗真菌药物作用的有吸引力的靶标，因为其存在于许多病原性真菌中且因此提供宽抗真菌谱。此外，因为不存在与(1,3)-β-d-葡聚糖合成酶的哺乳动物配对物，因此本文所描述的恩夫芬净衍生物具有很少或没有基于机制的毒性。根据本发明的所用恩夫芬净的类三萜化合物衍生物已表明抗念珠菌的真菌分离株的活性，所述真菌分离株包括对唑或其它葡聚糖合成酶抑制剂有抗性的那些分离株(例如脂肽试剂，如棘白菌素)，指示恩夫芬净衍生物的生物和分子标靶不同于其它葡聚糖合成酶抑制剂的生物和分子标靶。

11、已在例如国际专利公开案第wo 2007/126900号和第wo 2007/127012号中公开各种恩夫芬净衍生物。

12、这些恩夫芬净衍生物的某些代表可经口投与，已展示出抗念珠菌属的抗真菌活性且已展示出至组织(包括阴道组织)中的充分分布。然而，同时，先前研究展示在酸性ph环境中且更具体地在类似于阴道环境的ph环境(其ph约4至4.5)下，各种试剂抗念珠菌的抗真菌性能的大体减少。参见丹比等人(2012)和博伊科伊(boikoy)等人(2017)。

13、在关于vvc治疗的可行性研究中评估scy-078(本文所描述的恩夫芬净衍生物的代表性化合物)的抗真菌活性。

14、作为可行性评估的第一步骤，在患有中度至重度急性vvc的96个患者中进行概念验证探测性试验。个体经口接收scy-078锭剂，在第1天以1250mg的剂量投与，接着一日一次投与750mg，持续2至4天。也包括在经批准的剂量(150mg，单次剂量)接受口服氟康唑的患者的对比群。scy-078的两种剂量方案展示出类似活性。功效结果概述于下表中：

15、表b.意向治疗(itt)人群

16、

17、*在此研究中，临床治愈经定义为在未使用其它抗真菌治疗的情况下的感染征兆和症状的消退(在试药参观时，在基线处评分为2或1的征兆和症状应为0，且在基线处评分为3的征兆和症状应为0或1)；真菌根除经定义为用于基线酵母菌病原体的阴性培养物；且治疗治愈经定义为临床治愈和真菌根除两者。

18、鉴于各种化合物，包括迄今为止可供使用的所有临床相关类别的抗真菌剂(如唑、多烯和棘白菌素)，已展示出在酸性ph环境下(丹比等人(2012)和博伊科伊等人(2017))和更具体地在类似于阴道环境的ph环境(其ph为约4至4.5)下的经降低性能，作为针对其中预期低ph的真菌感染开发抗真菌剂的恩夫芬净衍生物类别的可行性评定中的下一步骤，在不同ph条件下评估scy-078的抗真菌活性。

19、在所属领域中存在对于用于人类，特别是用于发生在低ph条件下的真菌感染(如外阴阴道念珠菌病和胃肠道感染)的治疗中的抗真菌疗法，其中抗真菌维持在低ph条件下的性能。

技术实现思路

1、出人意料地发现，恩夫芬净衍生的类三萜化合物scy-078-a——本文所描述的恩夫芬净衍生物的代表性化合物——并未展示在低ph条件下的经降低性能。此外，化合物出乎意料地展现在此类条件下的增加的活性。恩夫芬净衍生物衍生的类三萜化合物出人意料地显现在表示阴道环境的低ph(ph 4.5)下的显著增强的抗真菌活性。另外，scy-078展示在经口投与小鼠之后的良好生物可用性和广泛组织分布。当此类治疗或预防涉及经口投与时，此类特征对于真菌感染(包括vvc)的治疗和预防至关重要。

2、本发明涉及使用恩夫芬净衍生物用于治疗或预防在酸性条件(例如低于约5的ph)中或下发生的真菌感染。恩夫芬净衍生物和其药学上可接受的盐或水合物适用于抑制(1,3)-β-d-葡聚糖合成酶，且尤其适用于预防或治疗在例如ph为约5或较低的酸性局部条件下发生的真菌感染，所述酸性局部条件为在所属领域中需要强效抗真菌活性的感染情境。

3、本发明解决所属领域中的需要，如上文所述的那些需要，是因为本文所描述的恩夫芬净衍生物不仅出乎意料地(a)保留在酸性ph下的活性，而且(b)甚至更出人意料地，展现在低ph条件下显著增强的抗真菌性能。在预期酸性ph且其它抗真菌剂将经预期归因于低ph局部环境而具有降低的性能的区域中的真菌感染的治疗中，这些特性是特别适用和相关的。预期低ph环境的真菌感染的一些实例包括(但不限于)外阴阴道念珠菌病(vvc)、腹部脓肿、肋板蓄脓、肺脓肿、肝脓肿和口咽或食道脓肿。

4、本发明的应用包括(但不限于)更易于在感染部位处达成可有效治疗或预防酸性条件下的真菌感染的(恩夫芬净衍生物的)浓度(例如，更易于达成高于治疗或预防酸性条件下的真菌感染所需的mic的浓度)的能力，是因为这些化合物的抗真菌活性出人意料地在酸性条件下增强。因为抗真菌活性在酸性条件下增强，治疗或预防低ph条件下的感染所需的本发明的恩夫芬净衍生物的mic低于治疗或预防在约为7的ph条件下的感染所需的恩夫芬净衍生物的mic。本发明还使得有可能治疗或预防在酸性ph条件下(例如，在约5或较低的ph下)发生的真菌感染，以投与一定剂量的恩夫芬净衍生物，所述剂量低于治疗约为7的ph条件下的真菌感染所需的剂量。

5、本发明提供式(i)化合物或其医学药上可接受的盐或水合物的用途：

6、

7、其中：

8、x为o或h、h；

9、re为c(o)nrfrg或含有1或2个氮原子的6元环杂芳基，其中杂芳基任选地在环碳上经氟或氯单取代或在环氮上经氧单取代；

10、rf、rg、r6和r7各自独立地为氢或c1-c3烷基；

11、r8为c1-c4烷基、c3-c4环烷基或c4-c5环烷基-烷基；

12、r9为甲基或乙基；且

13、r8和r9任选地结合在一起以形成含有1个氧原子的6元饱和环，

14、其在个体中用于治疗或预防在酸性ph条件下发生的真菌感染。所述真菌感染可为在ph低于约7(包括例如ph约5、约4.5或约4)的条件或解剖区域中发生的酵母菌或霉菌感染。此类感染包括(但不限于)阴道酵母菌感染、在任何位置的真菌脓肿或蓄脓和在上胃肠道中的感染。

15、本发明还提供通过投与式(i)化合物或其药学上可接受的盐或水合物治疗或预防个体内在酸性ph条件下发生的真菌感染的方法。此外，本发明提供式(i)化合物或其药学上可接受的盐或水合物的用途，其用于制备供治疗个体的在酸性ph条件下发生的真菌感染用的药剂。