草甘膦是一种非选择性除草剂,杀死杂草的同时也杀死农作物。它与植物体内的PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)结构相似,可与PEP竞争结合EPSP合酶,阻止PEP转化,影响植物细胞正常代谢。我国科学家从草甘膦施用土壤中的某微生物体内获取GR79基因(草
(1) GR79基因发挥抗草甘膦作用的机理可能是。从分离得到的某土壤微生物体内获取含有GR79基因的质粒,并将其保存在某细菌群体(受体菌)中,各个受体菌分别含有该微生物的不同的基因,这些受体菌群中该微生物的所有DNA序列克隆的汇总,称为。
(2) 据图推测,利用PCR技术扩增GR79基因时,需设计能与该基因两条模板链3’端的引物;同时为构建该基因表达载体,需在引物1和引物2的端加上限制酶的识别序列。
(3) 实验中常采用法将GR79基因表达载体导入植物受体细胞;为避免该基因在近缘农作物中传播,可将其导入植物受体细胞的;除温度、酸碱度等环境因素外,影响该基因导入植物受体细胞成功率的因素有。
(4) 为检测GR79基因是否导入植物体细胞,可在培养基中添加筛选含该基因的受体细胞;也可利用技术更加精准地进行检测,若待检DNA中含有该基因,则会发现硝酸纤维素膜上会出现。
(5) 经检测,科研人员发现部分获得GR79基因的植物幼苗不具有抗草甘膦的能力,原因可能是。
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