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（1）

研究者分别用EcoR Ⅰ 、HindⅢ、BamH Ⅰ三种限制酶处理突变体的总DNA （T-DNA上没有三种限制酶的酶切位点），用HindⅢ处理野生型的总DNA。将上述酶切产物及 Ti 质粒分别与DNA 分子探针进行杂交并进行电泳，得到如图1结果。

①DNA 分子杂交的原理是，上述DNA分子探针是含放射性同位素标记的片段，由于杂交结果中，表明T-DNA 成功插入到水稻染色体基因组中。用不同限制酶处理突变体的DNA都只得到一条杂交带，可以判断突变体为T-DNA（填“单个”或“多个”）位点插入。

②限制酶能催化水解DNA 片段中的键。用某种限制酶处理突变体的DNA（如图2），然后用酶将两端的黏性末端连接成环，以此为模板进行 PCR。为使 PCR 产物能被限制酶切割，需在引物（填3'或5'）端添加相应的限制酶识别序列，再利用下列表格中的引物（填编号）组合进行PCR，扩增出 T-DNA插入位置两侧的未知序列。经过与野生型水稻基因组序列比对，确定 T-DNA插入了2号染色体上的B基因中。若B基因能促进水稻穗粒的形成，则该突变体产量（低于/高于）野生型。

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