一种金线莲培养方法与流程

本发明属于植物组培领域，具体涉及一种金线莲培养方法。

背景技术：

金线莲，又称金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。主要分布在我国的福建、台湾、广西、广东等地。具有清热凉血，除湿解毒，平衡阴阳、扶正固本，阴阳互补、生津养颜、调和气血、五脏、养寿延年等功用。主要用于治疗肺热咳嗽，肺结核咯血，尿血，小儿惊风，破伤风，肾炎水肿，风湿痹痛，跌打损伤，毒蛇咬伤、支气管炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、急慢性肝炎、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症，目前主要作为煲汤、茶饮等保健食品材料使用。

因金线莲药用价值而深受人们的喜爱，市场需求量大增。近年来自然环境遭受严重破坏和人为的大量掠夺性采摘，导致野生金线莲越来越少，加之金线莲对生长环境要求苛刻，自然繁殖率低，商品价格居高不下。而且金线莲种子不具胚乳，无发芽能力，只有在真菌共生下，才促进种子萌发生长，但发芽率非常低。在金线莲生产上对优良品种选育更新是一项亟待展开的工作。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种金线莲培养方法，该金线莲的培养方法具有优异的成活率以及繁殖率。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种金线莲培养方法，包括如下步骤：

（1）选择野生金线莲带叶茎段为种源，经消毒后，接种于诱导培养基中进行诱导培养，在20-25℃下培养10-20天，光照强度为1000-1500lx，避免直射，光照时间为4-6h/天；

（2）将步骤（1）获得的不定芽切成2-3cm的小段，接种在增殖培养基上，培养25-30天；培养温度为20-25℃，光照强度为1000-1500lx，避免直射，光照时间为6-8h/天；

（3）当苗长到5-6cm时，将苗切成单株，接种到生根培养基上，光照强度为500-1500lx，避免直射，光照时间为5-8h/天，培养温度为20-25℃；

（4）当根长培养到3-5cm时，进行驯化移栽，将含有培养基的金线莲整个移至大棚内炼苗10-15天，洗去培养基，将金线莲移栽至有遮阴棚的基质中栽培，温度为20-25℃，相对湿度为80-90%，自然散色光，基质要求疏松透气。

所述的诱导培养基为ms+茶梗粉1-3g/l+6-ba0.3-0.6mg/l+zt0.05-0.1mg/ml+iba0.2-0.5mg/l，ph5.8-6.0。

所述的增殖培养基为ms+naa0.2-0.4mg/l+iba0.1-0.5mg/l+kt0.05-0.1mg/l+茶梗粉2-4g/l+0.3～0.5mg/l谷氨酰胺+蔗糖5-10g/l+琼脂粉2-3g/l，ph5.5-5.8。

所述的生根培养基为1/2ms+多效唑0.1-0.2mg/l+赤霉素0.05-0.1mg/l+茶梗粉1-2g/l+竹黄酮1-2g+琼脂3-6g/l+白糖1-3g/l，ph5.3-5.5。

所述基质由以下重量份原料组成：麸皮12-15份、玉米芯4-7份、榴莲壳粉2-5份、腐殖土2-6份、田园土5-10份、芒果皮2-5份、香菇菌渣5-15份。

本发明的优点在于：

1．本发明选用野生金线莲茎段作为培养对象，采用特定的诱导培养基、增殖培养、生根培养基和基质共同培养作用，获得的金线莲苗成活率高，增殖率高，在培养基中增加茶梗粉不仅有助于金线莲的组织诱导培养，还起到抑菌的作用，避免金线莲在培养过程中收到病菌感染而死亡。

2．在基质中加入麸皮、玉米芯、榴莲壳粉、腐殖土、田园土、芒果皮、杏鲍菇菌渣等成分对于促进幼苗生长非常有利，叶片净增量、发根数和鲜重净增量高。

3．经过组培试验，增殖率可达7倍以上，成活率100%；与现有技术相比，本发明的金线莲培育方法，其可显著增强金线莲幼苗的根系发达程度，进而提高移栽的成活率和快速生长概率，实用性强。

具体实施方式

实施例1

一种金线莲培养方法，包括如下步骤：

（1）选择野生金线莲带叶茎段为种源，经消毒后，接种于诱导培养基中进行诱导培养，在22℃下培养15天，光照强度为1200lx，避免直射，光照时间为5h/天；

（2）将步骤（1）获得的不定芽切成2-3cm的小段，接种在增殖培养基上，培养28天；培养温度为22℃，光照强度为1200lx，避免直射，光照时间为7h/天；

（3）当苗长到6cm时，将苗切成单株，接种到生根培养基上，光照强度为1000lx，避免直射，光照时间为7h/天，培养温度为22℃；

（4）当根长培养到4cm时，进行驯化移栽，将含有培养基的金线莲整个移至大棚内炼苗13天，洗去培养基，将金线莲移栽至有遮阴棚的基质中栽培，温度为22℃，相对湿度为85%，自然散色光，基质要求疏松透气。

所述的诱导培养基为ms+茶梗粉2g/l+6-ba0.4mg/l+zt0.05mg/ml+iba0.3mg/l，ph5.9。

所述的增殖培养基为ms+naa0.3mg/l+iba0.3mg/l+kt0.05mg/l+茶梗粉3g/l+0.4mg/l谷氨酰胺+蔗糖8g/l+琼脂粉2g/l，ph5.6。

所述的生根培养基为1/2ms+多效唑0.1mg/l+赤霉素0.08mg/l+茶梗粉1g/l+竹黄酮1g+琼脂5g/l+白糖2g/l，ph5.4。

所述基质由以下重量份原料组成：麸皮14份、玉米芯5份、榴莲壳粉3份、腐殖土4份、田园土7份、芒果皮3份、香菇菌渣10份。

采用本发明方法进行金线莲组织培养，可使工作效率提高，植株长势良好，苗污染率在0.5%以下，成苗率达100%，增殖率可达8倍，生产成本可减少30%～50%。

实施例2

一种金线莲培养方法，包括如下步骤：

（1）选择野生金线莲带叶茎段为种源，经消毒后，接种于诱导培养基中进行诱导培养，在20℃下培养10天，光照强度为1000lx，避免直射，光照时间为4h/天；

（2）将步骤（1）获得的不定芽切成2cm的小段，接种在增殖培养基上，培养25天；培养温度为20℃，光照强度为1000lx，避免直射，光照时间为6-8h/天；

（3）当苗长到5cm时，将苗切成单株，接种到生根培养基上，光照强度为1500lx，避免直射，光照时间为5h/天，培养温度为20-25℃；

（4）当根长培养到3cm时，进行驯化移栽，将含有培养基的金线莲整个移至大棚内炼苗10天，洗去培养基，将金线莲移栽至有遮阴棚的基质中栽培，温度为20℃，相对湿度为80%，自然散色光，基质要求疏松透气。

所述的诱导培养基为ms+茶梗粉1g/l+6-ba0.3mg/l+zt0.1mg/ml+iba0.2mg/l，ph5.8。

所述的增殖培养基为ms+naa0.2mg/l+iba0.1mg/l+kt0.1mg/l+茶梗粉2g/l+0.3mg/l谷氨酰胺+蔗糖5g/l+琼脂粉2g/l，ph5.5。

所述的生根培养基为1/2ms+多效唑0.1mg/l+赤霉素0.05mg/l+茶梗粉1g/l+竹黄酮1g+琼脂3g/l+白糖1g/l，ph5.3。

所述基质由以下重量份原料组成：麸皮12份、玉米芯4份、榴莲壳粉2份、腐殖土2份、田园土5份、芒果皮2份、香菇菌渣5份。

采用本发明方法进行金线莲组织培养，可使工作效率提高，植株长势良好，苗污染率在1%以下，成苗率达99.9%，增殖率可达7倍，生产成本可减少30%～50%。

实施例3

一种金线莲培养方法，包括如下步骤：

（1）选择野生金线莲带叶茎段为种源，经消毒后，接种于诱导培养基中进行诱导培养，在25℃下培养20天，光照强度为1500lx，避免直射，光照时间为6h/天；

（2）将步骤（1）获得的不定芽切成3cm的小段，接种在增殖培养基上，培养30天；培养温度为25℃，光照强度为1500lx，避免直射，光照时间为8h/天；

（3）当苗长到6cm时，将苗切成单株，接种到生根培养基上，光照强度为500lx，避免直射，光照时间为8h/天，培养温度为25℃；

（4）当根长培养到5cm时，进行驯化移栽，将含有培养基的金线莲整个移至大棚内炼苗15天，洗去培养基，将金线莲移栽至有遮阴棚的基质中栽培，温度为25℃，相对湿度为90%，自然散色光，基质要求疏松透气。

所述的诱导培养基为ms+茶梗粉3g/l+6-ba0.6mg/l+zt0.05mg/ml+iba0.5mg/l，ph6.0。

所述的增殖培养基为ms+naa0.4mg/l+iba0.5mg/l+kt0.05mg/l+茶梗粉4g/l+0.5mg/l谷氨酰胺+蔗糖10g/l+琼脂粉3g/l，ph5.8。

所述的生根培养基为1/2ms+多效唑0.2mg/l+赤霉素0.1mg/l+茶梗粉2g/l+竹黄酮2g+琼脂6g/l+白糖3g/l，ph5.5。

所述基质由以下重量份原料组成：麸皮15份、玉米芯7份、榴莲壳粉5份、腐殖土6份、田园土10份、芒果皮5份、香菇菌渣15份。

采用本发明方法进行金线莲组织培养，可使工作效率提高，植株长势良好，苗污染率在1%以下，成苗率达100%，增殖率可达7倍，生产成本可减少30%～50%。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

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