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药用植物山乌龟的组织培养研究

来源：花匠小妙招时间：2024-12-21 08:53

药用植物山乌龟的组织培养研究

【摘要】：山乌龟是一类根块富含多种生物碱的千金藤属植物,是我国的传统中草药,在长江流域以南各地尤其是华南和西南等地少数民族中使用广泛。目前,商品山乌龟还以野生采集为主,年收购量约为20吨/年(鄂西南地区)。近几年由于其药用价值不断被发掘,市场需求增大,然而由于其雌雄异株、种子小、种壳坚硬,在自然条件下萌发困难,繁殖能力极差,加上近年来人为的过度消耗,环境的日益恶化,其种群及个体数量急剧减少,传统的播种、分块的方法已不能满足日益增长的市场需求。本研究应用组织培养技术建立了有效的山乌龟人工快繁体系,以山乌龟嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过不同激素种类和浓度配比选择出了最佳的诱导、继代增殖和生根培养基配方,为工厂化生产山乌龟种苗,解决山乌龟供需矛盾奠定了理论基础。其结果如下:1外植体的消毒:山乌龟嫩茎段为最佳外植体,最佳消毒方法是70%乙醇表面消毒15s后,再用1%HgCl_2(滴入1-2滴吐温-80)消毒6min,外植体存活率为73.6%。2初代培养:初代培养的最佳培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,出芽率为82.8%,芽苗生长快,经过21d培养,平均苗高3.5 cm。3继代增殖:继代培养不宜连续两代以上在含6-BA的培养基上进行,应在含6-BA和不含6-BA的培养基交替培养;最佳继代培养基为MS+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.4～0.8 mg/L+GA_30.5～1.0 mg/L,50天后增殖倍数为7,芽苗长势良好;不宜使用2,4-D,易使培养材料和培养基褐化。4生根培养:最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,培养基中附加0.06%活性炭,生根率平均为87.4%,通常培养35d后,每株长根4～6条,平均根长3.5 cm。5炼苗移栽:半揭膜炼苗1～2d,揭膜炼苗2～3d,炼苗过程中应及时注意保湿。生根苗移栽到河沙:珍珠岩(1:1)的基质中成活率最高,为84%。

【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009

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