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七叶一枝花种子萌发阶段实时荧光定量PCR内参基因的筛选

来源：花匠小妙招时间：2024-12-20 13:16

七叶一枝花(Paris polyphylla Smith var. chinensis)是中国名贵的中药材，具有极高的药用价值和经济价值，但其种子的休眠特性严重制约着其产业的发展。因此，七叶一枝花种子萌发调控的机制是当前的研究重点。基因表达模式分析是揭示基因功能及其分子调控机制的重要手段，实时荧光定量PCR是最为常用的基因表达模式分析技术，而内参基因的表达稳定性是影响目的基因表达模式分析准确性的关键。然而，尚未有针对七叶一枝花开展内参基因筛选的研究报道。本研究以七叶一枝花不同萌发阶段的种子和萌发幼苗的根、茎、叶为实验材料，对8个候选内参基因(PpEF-1α; PpGAPDH; PpACT; PpRPL13; PpRPII; Ppβ-TUB; Ppα-TUB; PpTEF)进行实时荧光定量PCR分析，并利用GeNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder分析候选内参基因的表达稳定性。结果显示，在七叶一枝花种子的不同萌发阶段，PpACT表达稳定性最佳，Ppβ-TUB表达稳定性最差。以PpABI3、PpICL和PpDELLA作为目的基因验证内参基因的可靠性，其结果进一步支持了PpACT是作为七叶一枝花种子不同萌发阶段基因表达模式分析最佳的内参基因。本研究结果为七叶一枝花相关基因的表达模式及功能分析研究提供基础。