羊肚菌大田商业化栽培新方法.pdf
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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510771925.0 (22)申请日 2015.11.12 C12N 1/14(2006.01) A01G 1/04(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (71)申请人 尤世元 地址 266214 山东省青岛市即墨市店集镇即 东路 118 号 (72)发明人 刘明明 (54) 发明名称 羊肚菌大田商业化栽培新方法 (57) 摘要 本发明属于生物技术领域, 涉及一种羊肚菌, 通过克隆技术进行组织细胞分离、 培养、 获得母 种。原种配方 : 小麦 50-60, 麦麸 10-15, 土 壤 2025, 石膏卜 2,。
2、 过磷酸钙卜 2, 含水量 6065, 装瓶, 灭菌、 接入母种。栽培种制作 : 植 物有机物 70-80, 加 10-15的麦麸, 加 1的 石膏, 加入 1的白糖, 含水量 60-65, 装袋、 灭 菌, 接种、 培养。栽培新方法 : 将水稻田耕作后, 播 上羊肚菌的菌种, 盖上塑料薄膜保温, 保湿, 荫度 70-90, 温度 5-20, 土壤含水量 6065, 空气 相对湿度 8095, 通过这些方法至出菇收获 ; 本 创新方法成本低效果好, 按照本法可以栽培出与 野生质量完全相同的羊肚菌。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1。
3、页 说明书3页 CN 106701591 A 2017.05.24 CN 106701591 A 1/1 页 2 1.权利要求 1 : 羊肚菌生物克隆技术 ; 它是用新鲜羊肚菌的子实体在无菌条件下, 进行 组织细胞分离。切取 23mm 直径的组织细胞, 放在 PDA 培养基上, 经特定环境条件下培养。 2.根据权利要求 1 所述的羊肚菌的母种 PDA 培养基配方 ; 马铃薯、 黄豆芽、 香樟木片 ( 任意选择一种 )200 克, 琼脂 25 克, 葡萄糖 25 克, 磷酸二氢钾 2 克, 硫酸镁 2 克, VB, 1 克, 水 1000 毫升, 通过溶化、 装管、 高温灭菌、 接种、 培养。 。
4、3.根据权利要求 1 所述的羊肚菌的菌丝体发育特定环境条件, 温度是在 520的范 围内, 基物含水量 6065, 羊肚菌的子实体生长特定环境, 温度是 520范围内, 空气 相对湿度是 8095。 4.根据权利要求 3 所述的羊肚菌原种培养基配方 ; 小麦 5060, 麦麸 10 一 15, 细 颗粒土壤2025, 石膏卜2, 过磷酸钙卜2, 含水量6065, 装瓶、 封口、 灭菌。 温度 100 一 120, 保持 38 小时, 冷却后在无菌条件下接种。 5.根据权利要求 1 所述的羊肚菌栽培种培养基配方, 用植物有机物或桔杆粉 70 80, 麦麸或米糠10一15, 石膏1, 石灰1, 含。
5、水量6065, 装入1733c : m塑料袋 中, 封口、 灭菌。常压 100以上保持 8 小时, 高压 1.5 磅保持 90 分种, 冷却后接种, 在特定 的环境下培养 2030 天成为栽培种。 权 利 要 求 书 CN 106701591 A 2 1/3 页 3 羊肚菌大田商业化栽培新方法 技术领域 0001 本发明属于生物技术领域, 涉及的是一种野生羊肚菌人工大田商业化栽培的新技 术, 通过采集野生羊肚菌进行人工生物克隆方法, 在无菌条件下进行细胞组织分离, 获得羊 肚菌的优良菌株, 特别是羊肚菌大田商业化栽培新方法。 背景技术 0002 羊肚菌人工栽培研究早在 1883 年, 英、 美。
6、、 法等国家开始了栽培研究, 时过 100 多 年都没有完全取得成功, 直到 1986 年 4 月, 美国一名大学教授 R0m 0wer 第一个申报了羊肚 菌人工栽培发明专利, 当时这项技术震惊了全世界, 遗憾的是他还未等到专利颁布的前几 周, 就被谋杀在旧金山, 从此这项专利断绝了实施。 两年后, 1988年6月, 美国另一名大学教 授san R0naid(曾与R0m 0wer教授当过助手), 又申报了羊肚菌人工栽培的发明专利, 但这 项专利己过 10 多年, 仍然没有实现大田栽培野生羊肚菌的商业化方法。 0003 经过提纯复壮, 培养出羊肚菌母种, 然后经过不同的原料、 不同配方, 对比研。
7、制出 适合羊肚菌的菌丝生长的母种、 原种及栽培种的原料和配方, 制出了羊肚菌母种、 原种及栽 培种, 在栽培方法上, 经过 23 年的摸索试验和 1000 多次的失败, 总结出了先进的本栽培方 法, 获得了羊肚菌在大田商业化栽培的成功 ; 羊肚菌是一种非常珍稀名贵的食用菌, 它主要 生长在大山区森林之中, 一年只长一次, 由于受地区条件和资源等限制, 产量很少, 采集十 分困难。目前市场售价每公斤 1500 一 1800 元, 产品主要出口西欧国家, 需大量货源 ; 羊肚 菌的作用 : 羊肚菌是世界上很名贵的菌类, 属高级营养滋补品, 含丰富的蛋白质、 多糖、 碳水 化合物, 多种维生素和 2。
8、0 多种氨基酸及微量元素, 具有补肾、 壮阳、 补脑、 提神的功能 ; 对精 肾亏损、 阳萎不举、 性功能减退、 性欲冷淡有明显的作用, 长期食用可防癌抗癌、 抑制肿瘤、 预防感冒、 增强人体免疫力的效果, 在医学上和保健上都有重要的开发价值。 0004 羊肚菌营养成份 : 羊肚菌干鲜均可食用, 风味独特、 味道鲜美、 嫩脆可口、 营养极为 丰富。据测定 : 羊肚菌含蛋白质 22、 粗脂肪 3.82、 氨基酸高达 20 多种, 含 47.47, 特 别是对人体必需的 8 种氨基酸含量很高, 占氨基酸总量的 44.14, 多种维生素及矿物质元 素含量也极为丰富, 被誉为食品之冠。 0005 羊肚。
9、菌既是宴席上的珍品, 又是医药中久负盛名的良药, 李时珍 本草纲目 记载 羊肚菌用于治疗各种胃病。过去人们把羊肚菌作为敬献皇帝的滋补贡品, 如今己成为出口 西欧国家的高档食品, 是一种不含任何激素, 无任何副作用的天然保健品, 是人类最理想的 健康长寿食品。 0006 我国著名的食用菌专家, 四川省绵阳市食用菌研究所朱斗锡教授, 是国内研究羊 肚菌最早的人, 他从 1985 年开始研究羊肚菌, 1992 年首次在野外利用纯菌种栽培成功, 2000 年在野外中试栽培取得了成功, 获得了国家发明专利 ( 专利号 : zL00112812.4, 但这种 方法还存在投资高, 工序复杂, 产量不稳定的因。
10、素, 因此还无法实现野生羊肚菌在大田进行 商业化栽培。 说 明 书 CN 106701591 A 3 2/3 页 4 发明内容 0007 本发明是以如下技术方案实现的 : 0008 . 羊肚菌的生物克隆细胞分离方法 ; 0009 . 羊肚菌特定培养环境条件及驯化方法 ; 0010 . 羊肚菌母种配方及制作方法 ; 0011 . 羊肚菌的原种配方及制作方法 ; 0012 . 羊肚菌的栽培种配方及制作方法 ; 0013 . 羊肚菌的大田商业化栽培及管理方法。 具体实施方式 0014 本方法是指野生羊肚菌在大田商业化栽培的新技术。 它包含野生羊肚菌的采集方 法、 生物克隆技术、 细胞组织分离方法、 。
11、羊肚菌的菌种制作方法、 包括母种制作、 原种制作、 栽培种制作等方法。 菌种培养条件及培养技术, 羊肚菌的大田商业化播种栽培及管理, 直到 出菇采收等技术方法, 具体实施方案如下 : 一种野生美味羊肚菌的采集和生物克隆细胞组 织分离法 : 在野生羊肚菌出菇季节, 采集朵大、 肉厚、 健壮、 无病虫害且处于壮龄的新鲜羊肚 菌, 进行生物克隆和细胞组织分离。分离使用的 PDA 培养基为 : 香樟木片 200 克、 葡萄糖 25 克、 琼脂 25 克、 磷酸二氢钾 2 克、 硫酸镁 2 克、 VB, l 克、 水 1000 毫升。 0015 方法是 : 先将香樟木片煮 30 分钟, 过滤取汁, 加入。
12、上述原料煮至融化后分装试管, 封口、 灭菌。经高压灭菌锅 1.5 磅压力维持 90 分钟后, 趁热放成斜面, 斜度为试管的 2/3 为 宜。待冷却后即可作为羊肚菌分离使用的 PDA 培养基。 0016 分离方法是 : 在无菌条件下或接种箱内, 放入 PDA 培养基试管数支, 将新鲜羊肚菌 及接种的工具, 刀片等, 用75的酒精消毒后放入接种箱, 在将5克高锰酸钾和10毫升甲醛 混合进行箱内空间消毒。30 分钟后开始克隆分离。用刀片将羊肚菌切成 23mm 小块细胞 组织, 放入 PDA 培养基上。置于 520温度范围内, 培养 57 天菌丝发育完成, 再通过驯 化、 提纯、 转管后培养成羊肚菌母。
13、种。 0017 一种羊肚菌原种的制作培养方法 : 原材料及配方 : 小麦 5060, 麦麸 10 一 15, 细颗粒土壤 2025, 石膏 l, 过磷酸钙卜 2, 含水量 6065, 装入 750 克的玻 璃瓶中, 封口、 灭菌, 温度在 l()() 一 120保持 38 小时。待冷却后接种。接种方法是在 接种箱内或无菌条件下进行, 先将灭菌后的原种培养基放入接种箱, 在将接种针和羊肚菌 母种用 75的酒精消毒后, 放入接种箱内, 然后用高猛酸钾 5 克和甲醛 10 毫升混合产生气 体进行空间消毒, 30 分钟后开始接种。 0018 每支母种可接原种 58 瓶, 接种后置于 520温度条件下,。
14、 培养 2030 天, 完 成原种。 0019 一种羊肚菌栽培菌种的制作及培养方法 : 原材料及配方 : 植物有机物或秸杆粉 7080, 麦麸或米糠 10 一 15, 石膏 l, 石灰 l, 含水量 6065, 装入 1733cm 塑 料袋封口, 灭菌。常压在 l()()以上保持 8 小时, 高压在 1.5 磅的压力下保持 90 分钟, 冷 却后接种。每袋原种可接栽培种 5080 瓶, 接种后放在 520的环境下培养, 2030 天 菌丝长满全袋即可栽培。 0020 一种羊肚菌大田商业化栽培播种及管理采收方法 : 其特征在于选择地势平坦的水 说 明 书 CN 106701591 A 4 3/3。
15、 页 5 稻田, 水稻收割完毕后, 将田进行耕作, 要求土粒较细, 然后对土壤进行高温灭菌、 消毒, 或 药物灭菌消毒, 消毒后播上羊肚菌的栽培菌种, 每平方米播菌种 500 克, 播种后每隔 1.2 一 1.5米一厢开沟, 用塑料薄膜覆盖保温、 保湿。 为防止太阳暴晒, 还要用草棚或遮阳网并搭建 荫棚, 阴度为 7090, 出菇时揭开塑料薄膜, 保持土壤含水量为 6065, 空气相对湿度 为 8095, 温度为 520范围内, 直至出菇到采收。 0021 本发明与过去其它同类的栽培方法完全不同, 本方法解决了野生羊肚菌过去无法 在大田进行商业化栽培的世界技术难题, 这是一项羊肚菌人工栽培的重。
16、大的技术突破, 它 不受地区的条件和资源的限制, 在任何野外的大田都可进行人工栽培。 是一种成本很低, 原 料来源丰富, 出菇较稳定、 产量较高、 质量较好的栽培新方法。 0022 本申请人经过多年的试验研究及不断创新, 发明了一种适用于大田栽培野生羊肚 菌的新方法, 它包括适应的环境培养条件和生长控制条件、 培养基材料及科学配方、 栽培方 法、 管理技术等。 0023 本方法所用的培养基植物有机物一股是阔叶树的木屑或秸杆类, 如棉籽壳、 玉米 芯、 玉米杆、 甘蔗渣、 花生壳、 稻草、 麦草、 树枝、 树叶、 小麦、 谷物等。 0024 本方法所用的培养基中的辅助营养基质为麦麸、 米糠、 玉米粉及其它营养剂等。 0025 本方法所用的泥土是一股泥土, 是壤土或腐殖质土, 泥土是出菇的重要成份, 泥土 是完全可以循环使用的。 0026 本方法除了在野外大田中栽培, 还可在大地、 林中地上、 果树下或人工荫棚栽培。 0027 本发明的特点在于原料创新、 配方创新、 工艺方法创新等, 其表现为生产成本低, 工序简单, 产量高, 收入大, 质量好的特点, 完全能栽培出与野生羊肚菌相同的产品, 本方法 达到了发明创新的目的。 说 明 书 CN 106701591 A 5 。
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