七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法.pdf

《七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法.pdf（5页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。

1、(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201410176881.2 (22)申请日 2014.04.29 A01H 4/00(2006.01) A01C 1/00(2006.01) (73)专利权人 中南民族大学 地址 430074 湖北省武汉市洪山区民族大道 708 号 (72)发明人 宋发军 刘学群 王春台 余晓东 张鹏 (74)专利代理机构 武汉华旭知识产权事务所 42214 代理人 刘荣 CN 102144553 A,2011.08.10, 宋发军 & 黄宗华 .“七叶一枝花组织培养和 种子萌发条件的研究” .中南民族大学学报 ( 自 然科学版 ) .2013, 第 。

2、32 卷 ( 第 2 期 ), (54) 发明名称 七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法 (57) 摘要 本发明提供了一种七叶一枝花种子繁殖的两 步育苗法， 该方法第一步对种子的进行预处理， 并 使其在无菌条件下萌发， 待萌发的种子胚根长至 2.53cm时剥去胚乳及种皮 ； 第二步在培养基上 培养成无菌植株苗， 这种方法 5-6 个月即能生成 无菌苗， 与现有的七叶一枝花的育苗技术相比较， 实现了在保证萌发率较高的情况下大幅缩短萌发 时间， 5-6 个月即可繁育出具有一片子叶的种苗， 由于使用了培养基， 种苗生长发育良好， 使用本发 明方法通过在实验室获得无菌苗， 移栽至大田， 出 苗率可达 70-。

3、75。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 杜玉娟 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书3页 CN 103931502 B 2016.03.02 CN 103931502 B 1/1 页 2 1.一种七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法， 其特征在于 ： 第一步对种子进行预处理， 并使其在无菌条件下萌发 ； 第二步待萌发的种子胚根长至 2.5 3cm 时， 剥离胚乳及种皮 , 然后在培养基上培养成无菌植株苗 ； 具体采用如下步骤 ： 第一步 ： 预处理及萌发 (1) 对种子进行预处理 ： 将采摘的成熟的七叶一枝花种子去除颖壳， 搓去红色外种皮，。

4、 剩下乳白色的种子， 室温条件下自然阴干 7 14 天 ； 将种子装入透气袋内， 进行高低温 交替变温处理 , 即交替于 0 4低温环境放置 n 天， 于 18 22高温环境放置 n 天， 10 n 15， 共持续 60 90 天 ； (2) 浸种 ： 将变温处理的种子先用 ddH2O 于 25 35浸泡 24 48h， 期间每隔 5 6 小时换水一次， 再用 200 400mg/L 的 GA3于 18 22浸泡 48 72h， 将浸种后的种子用 ddH2O 冲洗 3 5 次 ； (3) 种子培养 ： 种子经医用酒精消毒 30 45s、 质量百分比浓度 0.1 0.15 HgCl2消 毒 10。

5、 15min， 再转移至双层无菌滤纸上， 暗培养 30 60 天， 然后光培养 15 30 天， 整个 培养过程温度控制在 18 22， 相对湿度 70 80， 光照强度 1000 1100lx， 光照时 间每天 10 12h ； 第二步 ： 剥离胚乳及种皮后培养 (4)剥离胚乳及种皮 ： 挑选胚根长度达到2.53cm的种子， 用医用酒精消毒3045s， 再用质量百分比浓度 0.1 0.15的 HgCl2消毒 5 6min， 在超净工作台内将胚乳及种皮 完全剥离 ； (5) 将剥离胚乳及种皮的种子先转移至第一 1/2MS 培养基上培养， 该培养基配方包含 ： 0.5mg/L 6-BA、 0.4。

6、mg/L NAA、 0.1mg/LGA3； 待呈卷曲状子叶将展开时换至第二1/2MS培养基 上培养， 此培养基配方包含 0.1mg/LGA3； 整个培养过程温度控制在 18 22， 相对湿度 7080， 光照强度10001100lx， 光照时间1012h， 在两种培养基上共培养45天 60 天， 便得到发育成具有根茎叶的完整植株苗。 权 利 要 求 书 CN 103931502 B 2 1/3 页 3 七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法 技术领域 0001 本发明涉及一种七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法， 属于植物种植技术领域。 背景技术 0002 七叶一枝花(Paris polyphylla va。

7、r.chinensis)又叫重楼、 七叶莲、 蚤休等， 最早 在 神农本草经 记载的是以药用部位根状茎之名 “蚤休” ， 是百合科 (Liliaceae) 重楼属 (Paris) 多年生草本植物的总称 ( 国家药典委员会， 2010)。 0003 七叶一枝花的株高为 30 100cm， 叶片 5 11 枚， 形状为长圆状披针形、 窄卵形， 一朵黄绿色的花生长于轮生叶片的茎顶 ； 茎单一直立生长， 多呈白绿色和紫红色， 生长发育 时期一般为 275 376 天 ； 褐色、 具有斜向环节、 横生、 肥大且常弯曲的根状茎生长于地下， 直径1.33cm， 长38cm， 在其顶端有凹陷的茎残基或芽痕， 。

8、且有收缩根 ； 花期一般在5 7 月份 ； 果期在 8 10 月份， 果实为蒴果， 蒴果裂开， 种子为多数的红色肉质浆果， 种子从繁 殖到药用需要510年， 资源再生很慢。 导致药用野生七叶一枝花的资源濒临枯竭。 因此， 国内外学者开始广泛关注七叶一枝花的引种栽培、 不同外植体的组织培养和种子的快速萌 发繁殖技术。 0004 现有技术中研究七叶一枝花繁殖方式主要是有性繁殖和营养繁殖。 七叶一枝花种 子具有 “二次休眠” 的特性， 使其繁殖周期长， 技术的关键是打破种子休眠， 促使种子快速萌 发。目前采用较多是根茎的切块繁殖， 不仅消耗了药用部分， 而且易造成种质资源退化， 抗 逆性降低。研究表。

9、明， 高温和低温都能抑制七叶一枝花种子的萌发和胚根的生长， 在 9的 低温， 其发根率为0。 研究七叶一枝花种子的结构发现， 成熟种子的胚分化不完全， 种子具有 “二次休眠” 的生理特性， 若单独使用高温和低温， 则对种子休眠的解除没有效果， 只有通过 高温和低温的交替处理， 才能打破种子的休眠， 促进种子的萌发和长出幼苗。 0005 对七叶一枝花种子的研究还发现， 每年910月采摘成熟的开裂的七叶一枝花种 子， 去掉红色的外种皮后把种子置于低温 4保存， 结果 1 年内， 实验时种子可以随时取用， 这就给试验带来很大的方便。 但是， 通过对新种子和旧种子萌发率的检测试验发现， 新种子 的萌发。

10、率比保存一年的旧种子高。种子在低温条件储存， 虽然可能引起了细胞内的某些生 理生化的变化或打破了胚的生理平衡， 从而可以增强种子的脱分化的能力， 但是种子层积 的时间过久， 也可能细胞内某些酶的生理结构遭到破坏， 从而影响了种子的萌发率。 0006 从上述分析中可以看出， 目前七叶一枝花种子萌发繁殖技术存在下述不足 ： 一是 种子具有 “二次休眠” 特性， 萌发繁殖时间较长 ； 二是萌发率不高 ； 三是不适合大规模生产， 虽然有些育苗法能实现缩短育苗时间， 但却存在出苗率低的问题。因此有必要研究开发更 好的促使七叶一枝花种子快速萌发繁育的技术， 既能实现快速繁育， 又能保证高的出苗率。 000。

11、7 技术方案 0008 为改进现有的七叶一枝花种子萌发技术中， 种子处理操作繁琐、 萌发时间长的缺 点， 本发明提供了一种七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法， 该方法采用两步法萌发繁育七 叶一枝花种苗， 与现有的七叶一枝花的育苗技术相比较， 实现了在保证萌发率较高的情况 说 明 书 CN 103931502 B 3 2/3 页 4 下大幅缩短萌发时间， 一般 5-6 个月即可繁育出具有一片子叶的种苗， 萌发率高达 70 75， 而且由于本发明使用了培养基， 种苗生长发育良好。 0009 实现本发明目的所采用的技术方案是第一步对种子的进行预处理， 并使其在无菌 条件下萌发 ； 第二步待萌发的种子胚根。

12、长至2.53cm时， 剥离胚乳及种皮,然后在培养基 上培养成无菌植株苗。 0010 该方法的具体步骤如下 ： 0011 第一步 ： 预处理及萌发 0012 (1) 对种子进行预处理 ： 将采摘的成熟的七叶一枝花种子去除颖壳， 搓去红色外 种皮， 剩下乳白色的种子， 室温条件下自然阴干 7 14 天 ； 将种子装入透气袋内， 进行高低 温交替变温处理 , 即交替于 0 4低温环境放置 n 天， 于 18 22高温环境放置 n 天， 10 n 15， 共持续 60 90 天 ； 0013 (2)浸种 ： 将变温处理的种子先用ddH2O于2535浸泡2448h， 期间每隔5 6 小时换水一次， 再用。

13、 200 400mg/L 的 GA3于 18 22浸泡 48 72h， 将浸种后的种子 用 ddH2O 冲洗 3 5 次 ； 0014 (3) 种子培养 ： 种子经医用酒精消毒 30 45s、 质量百分比浓度 0.1 0.15 HgCl2消毒 10 15min， 再转移至双层无菌滤纸上， 暗培养 30 60 天， 然后光培养 15 30 天， 整个培养过程温度控制在 18 22， 相对湿度 70 80， 光照强度 1000 1100lx， 光照时间每天 10 12h ； 0015 第二步 ： 剥离胚乳及种皮后培养 0016 (4)剥离胚乳及种皮 ： 挑选胚根长度达到2.53cm的种子， 用医用。

14、酒精消毒30 45s， 再用质量百分比浓度 0.1 0.15的 HgCl2消毒 5 6min， 在超净工作台内将胚乳及 种皮完全剥离 ； 0017 (5) 将剥离胚乳及种皮的种子先转移至第一 1/2MS 培养基上培养， 该培养基配方 包含 ： 0.5mg/L 6-BA、 0.4mg/L NAA、 0.1mg/LGA3； 待呈卷曲状子叶将展开时换至第二 1/2MS 培养基上培养， 此培养基配方包含 0.1mg/LGA3； 整个培养过程温度控制在 18 22， 相 对湿度 70 80， 光照强度 1000 1100lx， 光照时间 10 12h， 在两种培养基上共培养 45 天 60 天， 便可得。

15、到发育成具有根茎叶的完整植株苗。 0018 由上述技术方案可知本发明分两步对七叶一枝花种子进行繁殖育苗， 即首先通过 将采摘的种子进行去除外种皮的预处理、 高低温交替进行变温处理， 赤霉素溶液浸泡、 滤纸 无菌培养， 然后剥去胚乳和种皮， 再依次转移至两种不同的 1/2MS 培养基上进行无菌培养， 最终获得具有一片子叶的无菌苗， 整个过程只要 5-6 个月时间， 而且出苗率可高达 70 75， 在保证出苗率的前提下大大缩短了育苗时间。 具体实施方式 0019 将采摘的七叶一枝花成熟的种子， 去除颖壳， 用手搓去红色外种皮， 并用细孔筛筛 去外种皮， 得到乳白色的种子， 室温条件下自然阴干 7 。

16、14 天， 晾干水分， 放在 4冰箱备 用。 0020 将种子装入透气袋内， 进行高低温交替变温处理， 即先于04低温环境放置15 天， 再于 18 22高温环境放置 15 天， 两种温度状况下交替各放置 15 天， 持续 45 60 说 明 书 CN 103931502 B 4 3/3 页 5 天 ； 将变温处理后的种子先用 ddH2O 于 30浸泡 24 48h， 期间每隔 5 6 小时换水一次， 然后用 200 400mg/L 的 GA3于 18 22浸泡 48 72h。浸种结束后， 将浸种后的种子 用 ddH2O 冲洗 3 5 次。 0021 用医用酒精消毒浸种后的种子 30 45s，。

17、 再用质量百分比浓度为 0.1 0.15 HgCl2消毒 10 15min， 然后将种子转移至双层无菌滤纸上， 暗培养 30 60 天， 再光培养 1530天， 整个培养过程温度控制在1822， 相对湿度7080， 光照强度1000lx， 光照时间每天 12h。 0022 挑选胚根长度达到2.53cm的种子， 用医用酒精消毒3045s， 再用质量百分比 浓度 0.1 0.15的 HgCl2消毒 5 6min， 在超净工作台内将胚乳及种皮完全剥离。 0023 将剥离胚乳及种皮的种子转移至 1/2MS(0.5mg/L 6-BA， 0.4mg/L NAA， 0.1mg/ LGA3) 第一培养基上培养， 待子叶呈卷曲状子叶将展开时换至 1/2MS(0.1mg/LGA3) 第二培养 基上培养， 约 45 天 60 天便可发育成具有根茎叶的完整植株。整个培养过程温度控制在 18 22， 相对湿度 70， 光照强度 1000lx， 光照时间 12h。 0024 通过实践验证， 采用本发明提供的这种萌发时间短、 出苗率较高的七叶一枝花种 子萌发繁育技术， 在实验室培养成无菌苗后移栽到大田， 出苗率可达 70-75， 可以为七叶 一枝花药材的生产在育苗期节省 1 年半以上的时间， 在生产实践中具有重要的意义和经济 价值。 说 明 书 CN 103931502 B 5 。

相关知识

七叶一枝花种子繁殖法
七叶一枝花种子育苗技术研究
七叶一枝花种子超低温保存方法.pdf
七叶一枝花如何处理种子育苗，七叶一枝花栽培技术
助农驿站：重楼（七叶一枝花）种子繁殖技术
资源所七叶一枝花种子育苗技术有新的突破
七叶一枝花种子超低温保存方法与流程
七叶一枝花种子繁殖技术
七叶一枝花种子繁殖技术的研究
一种七叶一枝花根茎高倍切块快速繁殖方法

网址: 七叶一枝花种子繁殖的两步育苗法.pdf https://www.huajiangbk.com/newsview1165276.html