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植物切片制作

来源：花匠小妙招时间：2024-12-17 22:43

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植物组织制片技术是随着显微镜的出现而开展起来的技术，是人们认识植物体构造的有
效手段，已成为植物生物学的重要组成局部。植物制片技术已建立了许多方法，现简要介绍
如下几种最常见的制片技术：徒手切片法、滑走切片法、可以经处理后再进展
切片。处理时，用FAA固定液固定一天，然后转入软化剂如甘油、氢氟酸中软化，软化时
间视不同材料而定。在木材制片时，也可以用水煮法排出木材中的空气并软化局部组织，然
后转入软化剂乙二胺中，软化适宜后，用聚乙二醇包埋。经由石蜡制片法包埋的材料也可以
利用滑走切片法切片。
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实验步骤
滑走切片机由机身、升降夹物装置、切片刀的夹刀滑行局部等组成。先把切片刀固定
在夹刀上，然后将材料固定在两片软木中，，再固定在切片机的夹物
装置上。调好材料的高度，使刀刃靠近材料的切面，并使材料与刀刃平行。调整厚度调节器，
使其符合切片的要求。切片时用右手扶切片刀的夹刀滑行局部，均匀用力往自己方向移动，
切片便被切下并粘在刀的外表上。用湿毛笔把切片取下，放入盛水的培养皿里，然后把刀推
回。当把刀向后推时，夹物装置就按调节好的厚度上升。如此循环往复。可将切片制成临时
装片或进展简单的显微化学染色后观察，亦可以通过固定、脱水、染色和封固等程序，制成
永久制片。
离析法〔补充〕
离析法是用一些化学药品使细胞间的胞间层溶解，细胞彼此别离，从而得到单个、完整
细胞的方法，便于研究细胞的立体构造。
1、铬酸-硝酸离析法适用于木质化组织，如木材、纤维等。把材料切成长约lcm、火柴棒
大小的小条，放人小玻璃管中，参加离析液，其量约为材料的20倍。盖紧瓶盖放在30~40℃
的温箱中。离析的时间，一般1~2天。如果2天后仍末离析，可换新的离析液，再放置几天，
时间因材料的性质而异。检查材料是否离析，可取出材料少许，放在载玻片上，用解剖针末
端轻轻敲打，假设材料别离，说明离析时间已够。这时移去离析液，用水清洗干净，保存在
50％或70％的酒精中备用。
2、盐酸-草酸铵离析法适用于草本植物的髓、薄壁组织和叶肉组织等。把材料切成小块，
约lcm××，放入3:1的70％或90％酒精和浓盐酸中。假设材料有空气，应
抽气，抽气后更换一次离析液。24h后，用水清洗干净。％草酸铵水溶液中，时间
的长短视材料的性质而定。可以每隔l~2天作检查。其余与上法一样。
石蜡切片法〔补充〕
石蜡切片法是用石蜡作为包埋剂的一种显微制片方法，是显微技术中最重要最常用的方
法之一。它的优点是能够切出薄而均匀的连续切片，便于进展器官的三维重构。此法多用手
摇切片机切片。对于较硬的材料，也可以使用滑走切片机。
石蜡切片法的操作程序包括：取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、修块、切片、粘
片、染色和封片。
实验步骤
1、取材：选取生长良好、有代表性的目标材料，洗净。用锋利的双面刀片截取材料，动作
要迅速。~lcm3。
2、固定：将选取的材料放人固定液中，固定液的体积大约是材料的20倍。固定是用化学试
剂迅速杀死细胞的过程。目的是尽可能使细胞中的各个组分保持生活状态的构造，并固定在
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