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试题一植物病原菌种类之判别.doc

来源：花匠小妙招时间：2024-09-12 08:37

文档介绍：试题一植物病原菌种类之判别【試題一】植物病原菌種類之判別組別,總分25分實驗背景病毒可以危害動物、植物造成嚴重病狀,而檢測造成危害之病毒的種類為重要研究之一,利用血清學之技術,酵素連結免疫分析法,普遍被使用方法之一。酵素連結免疫吸附法,Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay,簡稱ELISA,利用抗原、抗體之間專一性鍵結之特性,對檢體進行檢測,由於結合於固體承載物(塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍具有免疫活性,因此經過鍵結後,配合酵素呈色反應,即可顯示特定抗原是否存在,可進行定性分析,或利用呈色之深淺,藉由酵素免疫微盤分析儀,ELISAreader,測定塑膠盤中的吸光值(OD值),可進行定量分析。595nm操作步驟為:,coating,於塑膠孔盤上,經靜置後洗去多餘檢體。,檢體中若含有待測之抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。,加入帶有酵素之二次抗體,與一次抗體鍵結。,加入酵素受質使呈色反應,以肉眼觀察呈色結果或以儀器讀取塑膠盤中的吸光值(OD值),實驗組OD值大於對照組OD595nm值兩倍以上,視為正反應。今有蘭花農民發現培育的蝴蝶蘭葉片,產生嵌紋病毒感染病徵,送請檢驗機構以酵素連結免疫吸附法,ELISA,檢測。,抗體1,東亞蘭嵌紋病毒抗體,,抗體2,,胡瓜嵌紋病毒抗體,,抗體3,齒舌蘭輪班病毒抗體,依上述步驟進行檢測,經加入酵素受質使呈色反應,經過20、40、60分鐘以酵素免疫微盤分析儀,ELISAreader,判讀,其結果如表一所示,請就表一結果作定性分析。1組別,表一、蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒病徵樣品,以不同抗體進行酵素連結免疫吸附法,ELISA,檢測結果OD值判讀時間抗體1,1µg/ml,抗體2,1µg/ml,抗體3,1µg/ml,(分鐘),胡瓜嵌紋病毒抗體,,亦進行酵素連結免疫吸附法不同抗體濃度試驗,分別用1µg/ml、µg/ml、µg/ml、µg/ml抗體濃度進行檢測,經加入酵素受質使呈色反應,經過20、40、60、80分鐘以酵素免疫微盤分析儀,ELISAreader,判讀,其結果如表二所示,請就表二結果作定量分析。表二、蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒感染病徵樣品,以不同抗體濃度進行酵素連結免疫吸附法,ELISA,檢測結果OD值判讀抗體濃度抗體濃度抗體濃度抗體濃度時間,1µg/ml,,µg/ml,,µg/ml,,µg/ml,(分鐘),,,1,蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒感染病徵樣品,以不同抗體進行酵素連結免疫吸附法,ELISA,檢測結果,為感染何種病毒,,5分,,2,說明原因。,7分,3組別,,1,蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒感染病徵樣品,以不同抗體濃度進行酵素連結免疫吸附法,ELISA,檢測結果,以何種抗體濃度進行檢測,最為適當,,5分,4,2,說明原因。,8分,【試題二】酵母菌的呼吸組別,總分25分實驗背景酵母菌於發酵工業上應用廣泛,除釀酒、麵包製造等大宗傳統發酵產品外,特定酵母菌可製成單細胞蛋白,作為蛋白質營養劑或製成飼料供動物食用。部份酵母菌甚可生產一些高價產物如泛素Q10、超氧歧化酶(superoxidedismutase)及工業上各式有用的酵素、蛋白質及各式代謝產物等,除此之外,一種類似啤酒酵母菌(haromycescerevisiae)的食用酵母菌(haaromycesboulardii)已證實可以拮抗腸道中的病原菌和治療慢性腹瀉症。此外,酵母菌,haromycescerevisiae,和裂殖酵母菌,haromyscespombe,,亦常作為學術基因遺傳、細胞生理、細胞分化等學術研究之主要模式。甚至在基因工程領域中,選殖後的基因常殖入酵母菌中,以進行選殖基因產物的生產。酵母菌細胞較一般細菌稍大,但比絲狀真菌小,5會行出芽或分裂生殖,其出芽方式可分為單極,monopolar,、雙極,dipolar,和多極,multilateral,出芽。單極出芽的細胞僅在細胞一端出芽,雙極出芽則是在細胞