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多花黄精中果聚糖产物的抗疲劳与改善肠道菌作用研究

来源:花匠小妙招 时间:2024-11-05 03:59

黄精Polygonati Rhizoma为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.、黄精Polygonatum sibiricum Red.或多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎,已被国家卫生健康委员会正式批准为药食同源物质,具有养阴润肺、益气健脾、补肾固精的功效[1-2]。与滇黄精、黄精比较,关于多花黄精的研究较少。多花黄精主产于江西、安徽、湖南等南方省份,含有多糖、皂苷、多酚、凝集素等多种活性成分[1, 3]。多糖既是多花黄精的有效成分,又是《中国药典》中评价黄精药材质量的重要指标[4]。多糖的研究难点在于分离纯化与结构鉴定。由于多糖的单糖组成、糖苷键连接及其构型的多样性,导致对多花黄精中多糖成分的结构与功能关系的认识严重缺乏。为此需要进一步地发现多花黄精中功能性多糖的结构及其药理作用。

随着现代社会高速发展,人们的生活变得更加忙碌,使得过度劳累成为严重的人类健康问题。一直以来,临床和民间常将黄精单用或是与其他中药配伍用于缓解体力疲劳[5]和延缓衰老[6]。现代研究也发现多花黄精具有增强免疫[7-8]、抗氧化[9]和抗疲劳[3]等功能活性。肠道微生物群被广泛认可是有助于调节人体健康的关键要素之一[10-11]。大量研究表明,中药多糖在调节肠道菌群促进人体健康方面发挥着重要作用[12]。相关报告指出,多花黄精中多糖化合物对一些致病菌有体外抑菌活性[9]。因此本文拟对从多花黄精干燥根茎中提取、纯化制备的多花黄精精制多糖进行抗疲劳与改善肠道菌作用研究,并对其进行系统的结构分析,以期为多花黄精精制多糖作为功能性成分的健康产品的开发提供研究基础。

1.   材料

1.1   药材与试剂

生多花黄精饮片购自安徽亳州药材市场,经南京中医药大学严辉教授鉴定为百合科植物多花黄精P. cyrtonema Hua的干燥根茎。红牛冻干粉是将市售红牛维生素饮料经冷冻干燥所得(100 mL红牛饮料约得1.62 g冻干粉)。葡萄糖(Glc,20210507)、半乳糖(Gal,20210630)、阿拉伯糖(Ara,20211215)、甘露糖(Man,20201223)、鼠李糖(Rha,20210518)、木糖(Xyl,20201109)、果糖(Fru,20200811)、半乳糖醛酸(GalA,20210107)标准品购自北京索莱宝有限公司;不同分子量的T系葡聚糖标准品(666.58、3 000、10 500、40 000、63 300、500 000 Da)、DEAE-纤维素-52(20180308)购自北京索莱宝有限公司;牛血清白蛋白(上海源叶有限公司,S12012);尿素氮(BUN,20220831)、尿酸(UA,20220926)、乳酸(LA,20221006)、超氧化物歧化酶(SOD,20221202)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px,20221201)、过氧化氢酶(CAT,20221228)和丙二醛(MDA,20221130)测定试剂盒均购自南京建成工程研究所。其他市售化学品和试剂均为分析级或色谱级。

1.2   仪器

SAGA-10TQ纯水仪(易普易达科技有限公司);Sartorius CPA 225D分析电子天平(赛多斯科学仪器北京有限公司);TGL-16M台式高速冷冻离心机(上海卢湘仪离心机仪器有限公司);LABCONCO冷冻干燥机(照生有限公司);SPARK 10M酶标仪[帝肯(上海)实验器材有限公司];AKTA Purifier 25M蛋白纯化仪(上海思拓凡生物科技有限公司);Waters e2695高效液相色谱仪(美国沃特世公司);GC-8860气相色谱仪(美国安捷伦公司);S-100红外分光光度仪(美国赛默飞世尔科技公司)。

1.3   实验动物

SPF级ICR小鼠64只,雄性,体质量(18~22 g),购自上海斯莱克实验动物有限公司,实验动物许可证号:SCXK(沪)2022-0004。饲养于南京中医药大学实验动物中心,适应性饲养1周,饲养条件:温度(25±1) ℃,相对湿度50%~60%,昼夜节律。本研究经南京中医药大学实验动物伦理委员会批准,伦理批号:202206A073。

2.   方法

2.1   多花黄精精制多糖的制备

取生多花黄精饮片(图 1a)于60 ℃热风烘干,干燥后粉碎,过4目筛。向1 000 g多花黄精粗粉中加入15倍体积量的纯水,于100 ℃水提1 h,重复2次,合并提取液,常压浓缩至2倍物料质量的体积,向浓缩液中加入95%乙醇,使其醇浓度达到70%,于4 ℃冰箱中静置24 h,6 500 r·min-1离心5 min,收集沉淀,加入纯水溶解,冷冻干燥得多花黄精粗多糖73.7 g,得率7.37%。采用D-301大孔树脂除去多花黄精粗多糖中的色素和蛋白质:称取预处理后的D-301树脂20 g,加入装有600 mL质量浓度为5 g·L-1多花黄精粗多糖水溶液的1 000 mL蓝口瓶中,密封后,在35 ℃、100 r·min-1的摇床中振荡吸附2 h。过滤,取滤液冷冻干燥,得多花黄精精制多糖(图 1b),转移率为36.6%。

图  1  多花黄精精制多糖的外观及化学特征分析

注:a.饮片;b.精制多糖;c.红外光谱;d.分子量分布

Figure  1.  Morphology and the chemical composition analysis of the purified polysaccharide prepared from root of Polygonatum cyrtonema Hua

2.2   一般化学分析

称取2 mg的多花黄精精制多糖与200 mg干燥的KBr置于研钵中研磨、混匀,压成薄片后,使用傅里叶变换-红外(FT-IR)光谱仪在4 000~400 cm-1的波数范围内对其进行扫描分析[13]。

配制约1 mg·mL-1的多花黄精精制多糖样品溶液,采用苯酚硫酸法[14]测定样品溶液总糖含量(D-Glc为标准品,标准曲线回归方程OD490=0.009 6C+0.071);采用BCA法[15]测定样品溶液蛋白质含量(以牛血清白蛋白为标准品,标准曲线回归方程OD562=0.003 2C+0.32)。

2.3   分子量分布测定

采用高效凝胶渗透色谱法(High performance gel permeation chromatography,HPGPC)按照凝胶渗透原理测定多花黄精精制多糖的分子量分布。色谱条件:OHpak-SB-803HQ色谱柱(8 mm× 300 mm,6 μm);流动相9 mol·L-1乙酸铵溶液;流速0.3 mL·min-1;进样量10 μL;柱温30 ℃;蒸发光散射检测器;漂移管温度115 ℃。以不同分子量的葡聚糖(666.58、3 000、10 500、40 000、63 300和500 000 Da)或Glc标准品测定并绘制分子质量-保留时间标准曲线(lgMw=-0.190 2t+9.149,R2=0.998 8)。

2.4   单糖组成分析

据文献报道,多花黄精多糖中可能含有醛糖(Glc、Gal、Ara、Man、Rha、Xyl)、酮糖(Fru)和糖醛酸(GalA),但这3类单糖无法用同一方法测出。故本文采用三甲基硅醚衍生化-气相色谱法(Trimethylsilylation derivatization-gas chromatography,TMS-GC)测定多花黄精精制多糖的醛糖和Fru,使用PMP柱前衍生化-高效液相色谱法(1-Phenyl-3-methyl-5-pyrazolone derivatization-high performance liquid chromatography,PMP-HPLC)测定多花黄精精制多糖的糖醛酸,综合2种方法测定结果并获得其单糖的组成与比例。高温会导致Fru分解,而低温会导致醛糖型单糖水解不完全,故在采用TMS-GC法测定酮糖和醛糖时,需取2份多糖样品分别在不同温度(121、60 ℃)下水解后再进行三甲基硅醚衍生化。

三甲基硅醚衍生化样品:取2份多糖样品分别置于5 mL离心管中(每份10 mg),各加入2 mL 2 mol·L-1三氟乙酸(TFA)溶解,转移至安瓿瓶中,密封后分别于121 ℃和60 ℃下水解1 h,减压蒸馏除去TFA,并多次少量加入甲醇继续蒸馏以除净TFA,得多糖水解样品。以正十二烷为内标,依据文献[16]对多糖水解样品、各单糖标准品(5 mg)和混合单糖标准品(各5 mg)进行糖肟三甲基硅醚衍生化,反应产物直接进行气相色谱分析。气相色谱条件:HP-5毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.5 μm);载气N2(2 mL·min-1);分流比20 ∶ 1;进样量1 μL;进样温度230 ℃;检测器温度230 ℃;程序升温:柱温130 ℃,保温1 min,以5 ℃·min-1速率升温至180 ℃,保持2 min,接着以5 ℃·min-1升温至220 ℃,保持2 min。

PMP衍生化样品:称取10 mg多糖样品置于5 mL离心管中,加入2 mL 2 mol·L-1 TFA溶解,转移至安瓿瓶中,密封后于121 ℃下水解1 h,减压蒸馏除去TFA,并多次少量加入甲醇继续蒸馏以除净TFA,向其中加入1 mL纯水溶解残渣,得样品水解溶液,根据文献[17]对水解样品溶液、各单糖标准品水溶液(1 mg·mL-1)、混合单糖标准品水溶液(2 mg·mL-1)进行PMP衍生化,衍生化样品进行高效液相分析。高效液相色谱条件:Thermo Acclaim TM 120色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相0.1 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲盐(pH6.7,87%);进样量10 μL;流速1 mL·min-1;柱温30 ℃;检测波长250 nm。

TMS-GC法计算结果中所得Glc、Gal、Ara、Man、Rha、Xyl的摩尔之比与PMP-HPLC法的分析结果接近。采用TMS-GC法计算每毫克多糖样品中醛糖和Fru质量百分比,并采用PMP-HPLC法计算每毫克多糖样品中GalA的质量百分比,最后将每毫克各单糖的质量百分比换算成每毫克各单糖的摩尔百分比。样品中单糖的定性分析以样品峰和单糖标准品中高响应的色谱主峰的保留时间决定,定量分析以对应峰的面积归一化进行校准[16]。

2.5   抗疲劳动物实验

40只ICR小鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、红牛冻干粉组、多花黄精精制多糖低剂量组和多花黄精精制多糖高剂量组,每组8只。多花黄精精制多糖低、高2个剂量组分别给予多花黄精精制多糖150、450 mg·kg-1,红牛冻干粉组给予红牛冻干粉225 mg·kg-1,空白对照组和模型组灌胃等体积纯水10 mL·kg-1,每日1次,连续30 d。在末次给药30 min后,除了空白对照组,其余组于小鼠尾根部负以其体质量7%的铅皮,将小鼠置于水深不低于30 cm,水温为(25±1)℃的游泳箱中进行负重游泳试验[18],记录小鼠的力竭游泳时间,即当小鼠头部全部沉入水中直至10 s不抬头时所用的时间。试验结束后,用5%异氟烷麻醉小鼠,立即眼眶取血于肝素钠处理的EP管中,于4 ℃、1 500 r·min-1离心10 min,取上清液为血浆样本供试液,采用二乙酰肟比色法测定BUN、酶比色法测定UA。颈椎脱臼法处死小鼠后进行解剖,取各组小鼠的骨骼肌(右后肢)和肝脏组织,采用比色法测定骨骼肌LA,WST-1法测定肝脏SOD,比色法测定肝脏GSH-Px, 钼酸铵法测定肝脏CAT,TBA法测定肝脏MDA。

2.6   小鼠肠道菌群测序与分析

24只ICR小鼠随机分为4组:空白对照组、红牛冻干粉组、多花黄精精制多糖低剂量组和多花黄精精制多糖高剂量组,每组6只。多花黄精精制多糖低、高2个剂量组分别给予多花黄精精制多糖150、450 mg·kg-1,红牛冻干粉组给予红牛冻干粉225 mg·kg-1,空白对照组灌胃等体积纯水10 mL·kg-1,每日1次,连续给药35 d。在末次给药30 min后,脱颈椎处死小鼠,解剖近端结肠,取出内容物立即冷冻于液氮中。接着,对肠道内容物进行16S rRNA测序,该过程由上海美吉生物医药科技有限公司完成:对小鼠粪便进行微生物群落总基因组DNA抽提,以该DNA为模板使用上游引物338F(ACTCCTACGGGAGGCAGCAG)和806R(GGACTACHVGGGTWTCTAAT)对16s rRNA基因V3~V4可变区进行PCR扩增[19]。按照上海美吉生物医药科技有限公司的标准方案操作,在Illumina MiSeq PE300(Illumina,San Diego,USA)平台上配对测序。

2.7   数据统计

抗疲劳实验数据以x±s表示,采用SPSS 26.0单因素方差分析(One-way ANOVA)进行统计学分析,采用LSD法进行组间显著性检验,P < 0.05表示差异有统计学意义。下一代测序结果使用美吉生物云平台进行分析,采用Kruskal-Wallis秩和检验进行事后检验,用Tukey-kramer检验两两比较显著性水平,P < 0.05被认为差异有统计学意义。采用GraphPad Prism 8.0.2软件进行绘图。

3.   结果

3.1   多花黄精精制多糖的化学表征

图 1c所示,在4 000~400 cm-1范围内的FT-IR光谱显示了多花黄精精制多糖的官能团:3 346、2 935、1 424 cm-1分别来自—OH的伸缩振动、C—H的伸缩振动和弯曲振动,是典型多糖类特征峰[13];1 054、818 cm-1处的峰值分别对应C—O—C和α糖苷键的不对称振动峰[18];1 625、1 742 cm-1区域分别是由羧酸中C—O和C O的拉伸振动引起的,表明含有糖醛酸[13];位于927 cm-1的吸收峰归属于Fru的β-糖苷键[14]。多花黄精精制多糖具有典型多糖类特征吸收峰,含有糖醛酸、α-糖苷键和β-糖苷键且含有果聚糖。

多花黄精精制多糖的HPGPC图谱中出现了多个明显峰(图 1d),根据分子质量-保留时间标准曲线计算得其相对分子质量在0.4~285 kDa之间,其中占比最高的组分分子量在3 kDa(1 kDa=1 000 g·mol-1)左右。

对多花黄精精制多糖进行一般化学分析,经计算其总糖含量达(93.87±2.71)%,蛋白质含量为(0.16±0.02)%。多花黄精精制多糖的单糖组成结果如图 2所示,经标准品比对,发现了7种单糖,包括Fru、Glc、Gal、Ara、Man、Rha和GalA,以单糖标准品峰的面积归一化进行校准,计算其摩尔百分比分别为89.89 ∶ 5.26 ∶ 1.67 ∶ 0.42 ∶ 0.47 ∶ 0.49 ∶ 1.80,本实验方法获得的多花黄精精制多糖是一种果聚糖产物,且含有少量Glc、Gal、Ara、Man、Rha等多种中性糖和GalA。

图  2  多花黄精精制多糖的单糖组成GC-FID与PMP-HPLC分析

注:a.混合单糖标准品GC-FID分析;b.样品121 ℃下水解后的GC-FID分析;c.果糖标准品GC-FID分析;d.样品60 ℃下水解后GC-FID分析;e.混合单糖标准品PMP-HPLC分析;f.样品121 ℃下水解后的PMP-HPLC分析

Figure  2.  Analysis of monosaccharide composition of polysaccharide from Polygonatum cyrtonema Hua. by GC-FID and PMP-HPLC

3.2   多花黄精精制多糖的抗疲劳作用

负重游泳试验过程中,小鼠疲劳状态明显,表现为小鼠无力挣扎致使头部全部沉入水中直至10 s无法抬头,疲劳模型造模成功。由图 3a可知, 红牛冻干粉组和多花黄精精制多糖高剂量组的小鼠力竭游泳时间均显著高于模型组(P < 0.01)。表明多花黄精精制多糖能增强小鼠的运动耐力。

图  3  多花黄精精制多糖的抗疲劳动物实验结果

注:NC.空白对照组;Model.模型组;Positive.红牛冻干粉组;DT-L.多花黄精精制多糖低剂量组;DT-H.多花黄精精制多糖高剂量组;与空白对照组比较,*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001;与模型组比较,#P < 0.05,##P < 0.01,###P < 0.001。

Figure  3.  Results of the anti-fatigue animal experiment of Polygonatum cyrtonema Hua

与空白对照组相比,模型组小鼠血清中BUN、UA含量均升高(P < 0.05),肌肉组织中LA含量显著升高(P < 0.001),红牛冻干粉,多花黄精精制多糖低、高剂量干预后可降低BUN、UA水平,但差异没有统计学意义(P>0.05),而多花黄精精制多糖高剂量干预后可以逆转LA水平的升高(P < 0.01),见图 3b~d。

由图 3e~h可知,与空白对照组相比,模型组小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活力无显著性差异(P>0.05),而MDA含量显著升高(P < 0.001)。与模型组相比,红牛冻干粉组小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px活力无显著提高(P>0.05),而多花黄精精制多糖低、高剂量组小鼠肝脏组织中SOD(P < 0.05,P < 0.01)、GSH-Px(P < 0.01,P < 0.001)活力均提高,差异具有统计学意义。红牛冻干粉、多花黄精精制多糖高剂量干预后可增强小鼠肝脏组织中CAT活力(P < 0.05,P < 0.01),两者均可逆转MDA的升高(P < 0.05),且均有统计学差异。

3.3   多花黄精精制多糖对小鼠肠道菌群的影响

应用Alpha多样性算法,分析各组小鼠肠道微生物群的均匀度和丰富度。如表 1所示,与空白对照组比较,多花黄精精制多糖低剂量组和红牛冻干粉组小鼠肠道菌群ACE指数和Shannon指数升高,Simpson指数降低,但差异没有统计学意义(P>0.05)。

表  1  各组小鼠肠道菌群多样性指数( ±s,n=6)

Table  1.  Intestinal flora diversity indexes in mice of each group (x±s, n=6)

组别 ACE指数 Simpson指数 Shannon指数 空白对照组 259.30±57.48 0.26±0.08 2.01±0.69 红牛冻干粉组 300.42±34.33 0.18±0.12 2.68±0.68 多花黄精多糖低剂量 271.95±28.51 0.21±0.14 2.46±0.75 多花黄精多糖高剂量 257.54±43.80 0.32±0.14 1.84±0.44

为判断各组小鼠肠道内容物是否具有差异性,基于OTU水平对各组小鼠肠道微生物组进行PCA和PLS-DA分析。PCA结果见图 4a,各组小鼠肠道内容物未能明显区分开来,可能由于粪便样本的复杂性和多样性使得各组间差异性的肠道微生物群未能体现。PLS-DA结果见图 4b,各组小鼠肠道内容物有明显的差异性,尤其多花黄精精制多糖低剂量组和红牛冻干粉组与空白对照组的组间差异非常明显,表明多花黄精精制多糖在一定程度上能够调控肠道菌群组成和结构。

图  4  各组小鼠肠道菌群的PCA(a)和PLS-DA分析(b)

Figure  4.  PCA (a) and PLS-DA analysis (b) of intestinal flora of mice in each group

如图 5a所示,在属水平上,与空白对照组比较,红牛冻干粉,多花黄精精制多糖低、高剂量组小鼠杜氏杆菌属(Dubosiella)、norank_f_Mueibaculaceae和Allobaculum这些有益菌的丰度均增加,但差异没有统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,多花黄精精制多糖低剂量组小鼠伊格尔兹氏菌属(g_unclassified_f_Eggerthelaceae)和魏斯氏菌属(g_Weissella)这些有益菌属丰度上调(P < 0.05)。采用Kruskal-Wallis秩和检验,对小鼠粪便中菌种进行差异性分析,与红牛冻干粉组和多花黄精精制多糖高剂量组比较,多花黄精精制多糖低剂量组小鼠肠道中益生菌类肠膜魏斯氏菌(Weissella_paramesenteroides)丰度显著增加(P < 0.05),见图 5b。

图  5  多花黄精精制多糖对小鼠肠道菌群组成属水平(a)及类肠膜魏斯氏菌种水平(b)的影响

注:NC.空白对照组;HN.红牛冻干粉组;DT-L.多花黄精精制多糖低剂量组;DT-H.多花黄精精制多糖高剂量组

Figure  5.  Effects of purified polysaccharide isolated from Polygonatum cyrtonema Hua on the composition of intestinal flora at the genus level (a) and the level of Weissella_paramesenteroides species (b) in mice

4.   结论

本研究从多花黄精干燥根茎中提取、纯化获得的多花黄精精制多糖是一种果聚糖产物,且含有少量Glc、Gal、Ara、Man、Rha等中性单糖和GalA。这与之前报道的多花黄精多糖不同[20]。不同来源多花黄精的单糖组成与比例有差异,可能导致多糖具有不同的结构特征和生物活性[21-22]。本文制备的多花黄精精制多糖中占比最高的组分分子量在3 kDa左右。田磊等[3]总结说明从多花黄精根茎中分离得到的均质多糖相对分子质量分布在2.09×103~4.26×104 Da范围,这与本实验结果相似。近年报道指出低聚糖有更优良的抗氧化、调节肠道菌群、抗衰老等生物活性[23]。

运动耐力下降是疲劳最直观的表现,力竭游泳时间是检测运动耐力的重要指标之一[18],力竭游泳时间能直观地反映小鼠运动耐力的大小。实验结果显示多花黄精精制多糖高剂量能显著延长小鼠的力竭游泳时间运动耐力,具有一定的抗疲劳作用。BUN是蛋白质代谢的产物,BUN水平越高,说明机体运动耐力越差[24];UA是嘌呤代谢的终产物,剧烈运动后人体中UA水平呈短时间的递增态势,若尿酸堆积过多,会导致人体的正常功能受到损害,导致高尿酸症疾病[25];LA是无氧运动的副产物,LA堆积过多会造成组织pH值下降,抑制磷酸果糖激酶活性,使肌肉工作能力下降[26]。多花黄精精制多糖低、高剂量能够减少小鼠负重游泳时有害代谢物质BUN、UA、LA的累积,延缓疲劳的发生。

过度运动促使机体产生大量氧自由基,氧自由基与脂质、脱氧核糖核酸等结合会产生有害物质,改变细胞膜结构完整性,损害细胞功能,而SOD、GSH-Px和CAT能对抗和阻断氧自由基造成的细胞损伤,减少MDA的生成,减少脂质过氧化[18, 27]。本实验结果显示,多花黄精精制多糖能够显著增强小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT等抗氧化物酶活力,减少脂质过氧化,保护细胞不受损伤,缓解体力疲劳。

在大健康时代背景下,中药多糖作为保健食品原料得到广泛的开发。由于预防保健是一个长期缓慢的过程,在长期使用过程中可能会出现一些不良反应。因此本研究延长小鼠的给药时间,对小鼠进行肠道菌群测序,旨在观察长期食用多花黄精精制多糖对健康状态下机体肠道菌群的影响,为多花黄精精制多糖作为功能性成分的健康产品长期食用提供研究依据。与空白对照组比较,多花黄精精制多糖低、高剂量组能够上调杜氏杆菌属(Dubosiella)、norank_f_Mueibaculaceae、Allobaculum、伊格尔兹氏菌属(g_unclassified_f_Eggerthelaceae)和魏斯氏菌属(g_Weissella)等有益菌相对丰度,这些菌能够参与调节代谢途径,例如碳水化合物代谢、氨基酸代谢等,在提高肠道免疫力、促进机体抵抗炎症和氧化应激方面发挥着重要作用[11, 28-29]。与红牛冻干粉、多花黄精精制多糖高剂量组相比,多花黄精精制多糖低剂量组小鼠类肠膜魏斯氏菌(Weissella_paramesenteroides)丰度上调,该菌可抑制促炎细胞因子的产生和诱导抗炎介质来调节免疫细胞反应[30],降低体内炎症,可能更有利于机体对抗疲劳。多花黄精精制多糖低剂量组中益生菌丰度大于高剂量组,这可能是因为肠道菌群通过选择性降解复杂碳水化合物发挥有益作用,过多的多糖反而会影响肠道中各微生物的发酵能力,不利于类肠膜魏斯氏菌生长。由此可知,长期服用多花黄精精制多糖在一定程度上能够增加益生菌的丰度,有利于控制炎症和氧化还原水平,这可能是因为本实验所制的多花黄精精制多糖富含Fru,而许多细菌可以利用植物果聚糖作为碳的替代来源,促进益生菌的生长、促进机体对矿物质的吸收[31]。

综上所述,本研究从多花黄精干燥根茎中制备的多花黄精精制多糖是一种低分子量的果聚糖产物,具有一定的抗疲劳和改善肠道菌作用,为其相关大健康产品的研制开发提供了较好的基础和保障。

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