一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法及其使用的基质与流程

本发明属于食用菌栽培技术领域，涉及一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法及其使用的基质。

背景技术：

金针菇，别名冬菇、朴蕈、绒毛柄金钱菌等，属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、金钱菌属。金针菇是一种常见食用菌，其菌盖滑嫩、菌柄脆爽、营养丰富、味美适口，深受大众喜爱。

金针菇由营养器官(菌丝体)和繁殖器官(子实体)两大部分组成。菌丝体由孢子萌发而成，在人工培养条件下，菌丝通常呈白色绒毛状，有横隔和分枝，很多菌丝聚集在一起便成菌丝体。和其它食用菌不同的是，菌丝长到一定阶段会形成大量的单细胞粉孢子(也叫分生孢子)，在适宜的条件下可萌发成单核菌，金针菇丝或双核菌丝。有试验证明，金针菇菌丝阶段的粉孢子多少与金针菇的质量有关，粉孢子多的菌株质量都差。金针菇属低温结实性真菌，菌丝体在5～32℃范围内均能生长，但最适温度为22～25℃，菌丝较耐低温，但对高温抵抗力较弱，在34℃以上停止生长，甚至死亡。因此，金针菇菌种的合理保藏至关重要。

在金针菇工厂化生产中，通常采用pda培养基培养菌种，然后放置于4℃冰箱保藏。但是用此方法保藏的菌种一般2-3个月必须转管，而且容易出现低温出菇及种性退化的现象。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法及其使用的基质。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种基质，所述基质的原料配方包括下列质量百分比的原料：

所述基质的含水量为63-65％，ph值为6.0-6.5。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法，包括下列步骤：

步骤1：按照权利要求1的原料配方将各原料混合后装入一容器内，然后压平料面，然后由料面一端向另一端打通孔，然后倒置所述容器于水中，并使料面不接触水面以清洗去除打通孔时产生的多余残料，用毛巾擦干瓶口后盖上硅胶塞，用锡箔纸包裹瓶塞，置于121℃条件下灭菌60-70分钟，出锅后在无菌超净工作台冷却至室温；

步骤2：将保存于pda培养基上的金针菇菌种分割成菌种块，接菌种块于料面上和通孔内，盖上硅胶塞；放置于18-20℃的生化培养箱内黑暗培养，待菌丝发满培养料后，用封口膜密封三角瓶瓶口，然后放入4℃冰箱保藏6-12月。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：

本发明采用的基质培养基菌种，可以实现金针菇菌种放置于4℃冰箱保藏6-12月。在保藏的过程中没有出菇现象。对保藏6个月及12个月的基质菌种进行生产栽培试验，结果显示菌丝生长速度、芽出时间及产质量等性状表现稳定。本发明可以保持金针菇菌种种性稳定，避免pda培养基低温保藏频繁转接及低温出菇造成的菌种种性退化。

具体实施方式

以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。

实施例1：一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法及其使用的基质

一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法，其特征在于，包括以下技术步骤。

基质配方为：木屑64％、米糠22％、玉米芯13％、碳酸钙1％、含水量64％，ph值6.2。

质量标准：

注：所有原材料均要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味。

(2)具体操作方法：

基质菌种培养基制备方法：使用250毫升的三角瓶，装料150克/瓶，压平料面，用直径8mm的铁棒在料面正中央打孔到底(透过空洞能完全看见亮光)，倒置三角瓶于清水中(料面不接触水面)清洗去除多余残料，用毛巾擦干瓶口，最后盖上硅胶塞，用锡箔纸包裹瓶塞，置于121℃高压灭菌60-70分钟，出锅后在无菌超净工作台冷却至室温(20℃以下)。

(3)基质菌种继代方法：

按照无菌操作规程，将pda菌种分为大小为5mm*5mm的菌种块，接3块菌种于三角瓶料面上，1块菌种于三角瓶的料孔内，盖上硅胶塞。放置于19℃的生化培养箱内黑暗培养。待菌丝发满培养料后，用封口膜密封三角瓶瓶口，然后放入4℃冰箱保藏6-12月。

基质菌种生产试验(菌种稳定性验证试验)

将在4℃冰箱保藏的基质培养基菌种取出，采用液体菌种进行工厂化生产栽培，依次扩繁至培养皿种、摇瓶菌种、发酵罐菌种，按照金针菇工厂化生产工艺规程，试验2000瓶，以常规的pda培养基菌种，4℃冰箱保藏生产种作对照。

试验结果：

两种基质菌种继代培养在菌丝生长速度方面均比对照快，各处理之间生长速度差距小。从单产来看，继代培养均高于对照种。所以基质菌种继代培养技术在生产中优势显著，值得在大生产中推广应用。

实施例2：一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法及其使用的基质

一种基质，所述基质的原料配方包括下列质量百分比的原料：

所述基质的含水量为65％，ph值为6.5。

一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法，包括下列步骤：

步骤1：按照权利要求1的原料配方将各原料混合后装入一容器内，然后压平料面，然后由料面一端向另一端打通孔，然后倒置所述容器于水中，并使料面不接触水面以清洗去除打通孔时产生的多余残料，用毛巾擦干瓶口后盖上硅胶塞，用锡箔纸包裹瓶塞，置于121℃条件下灭菌60分钟，出锅后在无菌超净工作台冷却至室温；

步骤2：将保存于pda培养基上的金针菇菌种分割成菌种块，接菌种块于料面上和通孔内，盖上硅胶塞；放置于18℃的生化培养箱内黑暗培养，待菌丝发满培养料后，用封口膜密封三角瓶瓶口，然后放入4℃冰箱保藏12月。在保藏的过程中没有出菇现象。

实施例3：一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法及其使用的基质

一种基质，所述基质的原料配方包括下列质量百分比的原料：

所述基质的含水量为63％，ph值为6.0。

一种提高菌种稳定性的金针菇菌种基质保藏方法，包括下列步骤：

步骤1：按照权利要求1的原料配方将各原料混合后装入一容器内，然后压平料面，然后由料面一端向另一端打通孔，然后倒置所述容器于水中，并使料面不接触水面以清洗去除打通孔时产生的多余残料，用毛巾擦干瓶口后盖上硅胶塞，用锡箔纸包裹瓶塞，置于121℃条件下灭菌70分钟，出锅后在无菌超净工作台冷却至室温；

步骤2：将保存于pda培养基上的金针菇菌种分割成菌种块，接菌种块于料面上和通孔内，盖上硅胶塞；放置于20℃的生化培养箱内黑暗培养，待菌丝发满培养料后，用封口膜密封三角瓶瓶口，然后放入4℃冰箱保藏6月。

以上所述者仅为用以解释本发明之较佳实施例，并非企图具以对本发明做任何形式上之限制，是以，凡有在相同之发明精神下所作有关本发明之任何修饰或变更，皆仍应包括在本发明意图保护之范畴。

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