首页分享不同寄主植物棉蚜抗性基因的研究.pdf全文

不同寄主植物棉蚜抗性基因的研究.pdf全文

来源：花匠小妙招时间：2025-09-18 12:28

424 走向2l世纪的中国昆虫学不同寄主植物棉蚜抗性基因研究金莹赵章武冯国蕾李梅谢佳燕何凤琴’o (中国科学院动物研究所，农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室，北京100080) 摘要本文用PCR方法扩增不商寄主植物上棉蚜的基因组DNA，在抗性最高的棉蚜种群中获得4个长度分别为550．480，250和150bp左右的扩增产物．很可能是拂蚜的抗性相关基固．在其它种群中没有这四个产物。在不接触杀虫剂3个月后，高抗性韩蚜种群的后代有抗性衰退现象。关■词棉蚜抗性基因HR 地区棉蚜种群个体a—NA酯酶的频率分布，以及有机磷杀虫剂对其的抑制频率分布，可正确 eLI，1996；赵章武等．1996；李梅区分棉蚜种群中敏感、抗性和杂合子所占的比例(Feng，et lnoue，1987；郑炳宗等，1988；Saito，1989；Abdel一^a1，elal，1990；王健等，1996；高希武等，1998)，但是否也存在抗性基因扩增尚无报道。棉蚜抗性分子遗传和基因方面的研究报道较少。本文用常规PCR方法扩增棉蚜基因组DNA，初步探索棉蚜的抗性相关基因。在某些事例中，抗药性是由于编码解毒酶的基因扩增造成的。由于结构基因的拷贝数增多，过量合成的解毒酶代谢或与杀虫剂螯合，从而增加害虫对杀虫剂毒力的抵抗能力。由基因扩增而导致的害虫抗药性的证据主要来源于对桃蚜、蚊虫和家蝇对有机磷杀虫剂的抗性研子机翻的研究具有重要的理论和实际意义。 1实验材料与方法 1．1实验材料 1．1．1本实验所用蚜虫及采集地点：花椒、木槿、冬青、石榴采自北京海淀。乞基鑫震犀鲁。九五”国家科技攻关和国家白然科学基金重点项目伯963021∞资助通讯作者药剂毒理 425 1．1．2实验药品引物，北京格莱克斯公司合戚；TaqDNAse．中国农业大学生物系产品；dNTPs，北京鼎国产分析纯试荆。 1．2实验方法 1．2．1生物测定将100pl一定浓度的杀虫剂丙酮液均匀涂布在5ml小玻璃瓶及封I=l膜，室温放置丙酮挥发。用丙酮作对照。每瓶放15—20头无翅成蚜，每浓度重复三次，5小时后检查死亡教，死亡标准为轻触虫体时试虫不动。计算死亡率。 1．2．2群体棉蚜基因组DNA的提取：化过夜。Tris饱和酚提取DNA(参见卢圣栋，1993)。 1．2．3引物： eta1．1993)，设计台成两个参照桃蚜(Myzu*pers／cae(Su]xer))的酯酶E4保守序列(Field 引物： ACATGTTCGGCG托一3’ CAG邢1-rc 引物1：5’一CTG GCT GGTCTG一3’ c订C,CTA。I℃GCClTr 引物2：5’一AAG 1．2．4PCR反应体系各100rig，2．5出10 后加25m石蜡油覆盖．稍离心后于PCR仪中扩增。94t预变性5分钟后进入以下循环(40 保存。’ 1．2．5产物检测分析扩增产物在含0．04％EB的1．5％琼脂糖凝胶上进行电泳。上样量为15一，电泳缓冲液为 1×TAE，7．5Vitro恒压电泳70min，紫外透射仪上观察，成相。 2结果与分析 2．1生物测定杀虫剂对不同寄主植物棉蚜的毒力见表l。结果表明鼠李和石榴上的棉蚜对有机磷杀虫剂最敏感；花椒、冬青上的棉蚜对敌敌畏有较高抗性；术槿上的棉蚜对甲基对硫磷有较高抗性。表明不同寄主植物棉蚜对不同杀虫荆的抗性有一定差异。而高密棉蚜对各种不同杀虫剂的抗性程度都很高。 2．2不同青主檀物棉蚜种群扩增产物 426 走向21世纪曲中国昆虫学而在其它的5种群中投有。北京棉蚜的扩增产物中没有高密棉蚜的4个特异性